一种糖基亚磷酰胺单体及其制备方法和糖基寡聚核苷酸的合成方法技术

本发明专利技术公开了一种糖基亚磷酰胺单体及其制备方法，步骤：1)利用糖苷化反应制备含有炔基官能团修饰的糖模块；2)制备5’端保护的5‑碘‑2’‑脱氧尿苷模块；3)连接糖模块和核苷酸模块；4)制备糖基亚磷酰胺单体。一种糖基寡聚核苷酸的合成方法：1)将糖基亚磷酰胺单体溶于无水乙腈中；2)将糖基亚磷酰胺单体同时装配在商用DNA固相合成仪；3)用糖基亚磷酰胺单体在固相合成过程中全部或者部分替代天然核酸亚磷酰胺单体；4)分离纯化后，得到特定序列的糖基寡聚核苷酸。本发明专利技术提供了一种安全、经济、高效的糖基亚磷酰胺单体的合成制备方法，通过DNA固相合成技术，可自动化、批量化、定制化制备高生物稳定性的糖基寡聚核苷酸(包括糖基核酸适体功能分子)。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，尤其是一种糖基亚磷酰胺单体及其制备方法和糖基寡聚核苷酸的合成方法。

技术介绍

1、近年来，功能核酸(fna)在临床恶性疾病治疗中引起了广泛关注。fna是一类人工合成的核酸链(dna或rna)，除了其信息作用外，还具有特定的生物学功能。基于功能核酸的分子药物已取得显着进展，许多相关药物已经获得fda批准或进入临床试验,包括短干扰rna(sirna)、小激活rna(sarna)、微小rna(mirna)和反义寡核苷酸(aso)等。其中，被称为“化学抗体”的适配体(aptamer)，在功能上与传统抗体相当，不仅具有物理尺寸小、结构灵活、化学生产速度快、化学修饰用途广泛，无免疫原性等诸多优点。同时，因为适配体具有广泛的亲和力，因此有望开发出更高效的分子工具，在药物递送、疾病检测与诊断、分子识别等生物医学领域有着广泛的应用需求。

2、尽管，核酸适配体或及其药物偶联物，在癌症等恶性疾病的临床前研究中取得了良好的治疗效果。然而，核酸适体生物稳定性较差，进入血液中后会被血液中的核酸酶迅速识别并降解，这大大限制了核酸适体分子药物的临床转化本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种糖基亚磷酰胺单体，其特征在于：所述糖基亚磷酰胺单体具有如下结构：

2.根据权利要求1所述的一种糖基亚磷酰胺单体，其特征在于：所述R5的结构如下所示：

3.一种制备如权利要求1或者2所述糖基亚磷酰胺单体的方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的一种糖基亚磷酰胺单体的制备方法，其特征在于，所述步骤1)具体包括以下过程：以质量份计，取2份干燥的N-乙酰氨基半乳糖溶解在无水DCM中，在氩气保护条件下，向溶液中加入0.61份的5-己炔-1-醇，搅拌30min；在冰浴下向溶液中加入三氟化硼乙醚溶液；反应16h，加入饱和碳酸氢钠水...

【技术特征摘要】

1.一种糖基亚磷酰胺单体，其特征在于：所述糖基亚磷酰胺单体具有如下结构：

2.根据权利要求1所述的一种糖基亚磷酰胺单体，其特征在于：所述r5的结构如下所示：

3.一种制备如权利要求1或者2所述糖基亚磷酰胺单体的方法，其特征在于，该制备方法包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的一种糖基亚磷酰胺单体的制备方法，其特征在于，所述步骤1)具体包括以下过程：以质量份计，取2份干燥的n-乙酰氨基半乳糖溶解在无水dcm中，在氩气保护条件下，向溶液中加入0.61份的5-己炔-1-醇，搅拌30min；在冰浴下向溶液中加入三氟化硼乙醚溶液；反应16h，加入饱和碳酸氢钠水溶液终止反应；减压蒸馏除去低沸点溶剂，将得到的残渣用硅胶柱色谱法提纯即可得到含有炔基官能团修饰的糖模块。

5.根据权利要求3所述的一种糖基亚磷酰胺单体的制备方法，其特征在于，所述步骤2)和步骤3)具体包括以下过程：以质量份计，分别在干燥的反应容器中加入2.56份步骤1)制备得到的含有炔基官能团修饰的糖模块、0.9份四三苯基膦钯、0.3份碘化亚铜，并用氩气保护；加入无水dmf溶解；再加入无水三乙胺和2份步骤1)制备得到的含有炔基官能团修饰的糖模块，避光室温搅拌过夜；反应结束后减压蒸馏除去溶剂，将得到的残渣用硅胶柱色谱法提纯得到糖模块和核苷酸模块连接的化合物。

6.根据权利要求3所述的一种糖基亚磷酰胺单体的制备方法，其特征在于，所述步骤4)具体包括以下过程：以质量份计，将0.16份三乙胺、1.7份步骤2)和步骤3)制备得到的糖模块和核苷酸模块...

【专利技术属性】
技术研发人员：姬丁坤，谭蔚泓，韩永琪，章荣俊，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属仁济医院，
类型：发明
国别省市：