本发明专利技术属于生物医用材料技术领域，具体涉及一种基于智能响应水凝胶的3D微组织培养方法及应用。所述培养方法包括以下步骤：(1)将细胞、微载体与智能响应型水凝胶的前驱体溶液混合，置于25‑37℃下孵育成胶，再加入细胞培养基，培养制备3D微组织；(2)再置于4‑25℃下轻轻吹打使水凝胶呈溶液状态，收集培养基混合物，离心，弃上清，即得到3D微组织；所述智能响应型水凝胶由氧胺键封端的LCST型三嵌段聚合物和醛基化聚合物混合制得。本发明专利技术通过将细胞和微载体混合到智能响应水凝胶中得到3D微组织培养体系，该体系能够在温和的条件下成胶并且成胶速度可控，有利于细胞和微载体的封装，且实现3D微组织的释放与可控收集。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医用材料，具体涉及一种基于智能响应水凝胶的3d微组织培养方法及应用。
技术介绍
1、目前，传统的二维细胞培养方法面临培养液、培养空间等利用率低下的问题，同时难以模拟细胞生长的体内微环境，易于造成细胞结构和组织功能的丧失。3d微组织在细胞空间和组织形态结构包括营养物质、生长和信号因子，以及细胞-细胞及细胞-细胞外基质之间的相互作用方面与人体组织极为相似。因此，3d微组织培养和制备在干细胞扩增、组织修复与再生、药物筛选、疾病模型构建、类器官培养等领域备受关注。
2、人们已经开发了许多方法来获取3d微组织，包括基质培养法和无基质培养法。常见的基质培养材料有ecm凝胶、胞外基质等，难以实现培养的微组织的可控收集，或者常规智能水凝胶需酶降解或者化学添加剂降解，在此过程中有可能因引进额外添加剂而破坏培养的3d微组织。无基质培养法主要包括低粘附孔板法，转瓶法，微孔板法，球团培养法，悬滴法和外力驱动技术。然而，目前3d微组织培养技术在实际生产和应用过程中仍面临操作繁琐、成本高、难以规模化生产和收集困难等问题。
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【技术保护点】
1.一种3D微组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的3D微组织培养方法，其特征在于，所述智能响应型水凝胶的前驱体溶液的制备方法包括以下步骤：将质量浓度为5-20％的氧胺键封端的LCST型三嵌段聚合物溶液与质量浓度为5-20％的醛基化聚合物溶液在4-25℃条件下轻轻吹打混合制得。
3.根据权利要求2所述的3D微组织培养方法，其特征在于，所述氧胺键封端的LCST型三嵌段聚合物溶液与醛基化聚合物溶液的体积比为(10-20):1。
4.根据权利要求2所述的3D微组织培养方法，其特征在于，氧胺键封端的LCST型三嵌段聚合物和醛基化聚合...
【技术特征摘要】
1.一种3d微组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的3d微组织培养方法，其特征在于，所述智能响应型水凝胶的前驱体溶液的制备方法包括以下步骤：将质量浓度为5-20％的氧胺键封端的lcst型三嵌段聚合物溶液与质量浓度为5-20％的醛基化聚合物溶液在4-25℃条件下轻轻吹打混合制得。
3.根据权利要求2所述的3d微组织培养方法，其特征在于，所述氧胺键封端的lcst型三嵌段聚合物溶液与醛基化聚合物溶液的体积比为(10-20):1。
4.根据权利要求2所述的3d微组织培养方法，其特征在于，氧胺键封端的lcst型三嵌段聚合物和醛基化聚合物采用pbs溶液...
【专利技术属性】
技术研发人员：李自伊，邹颖，
申请(专利权)人：广东医科大学，
类型：发明
国别省市：
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