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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于多肽研发,具体涉及一种抗菌肽及其应用。
技术介绍
1、抗菌肽广泛分布在动植物体内,是一类具有广谱抗微生物活性的小分子多肽,具有不易产生耐药性和低毒等特性,被科学家誉为"天然抗生素"。两栖类动物皮肤一直以来都是科学家眼中的资源宝库,其分泌物中含有大量未知功能的活性多肽。宜章臭蛙(odorranayizhangensis)分布于广西龙胜和湖南宜章,体型较小,体背面棕色斑大而密,形状不规则;腹面褐色,其上斑纹稀少;股后部色浅,深色斑明显。臭蛙可能是自然界中抗菌肽多样性最为丰富的物种,然而对于宜章臭蛙其分泌物的研究报道甚少,开发宜章臭蛙皮肤分泌物中的抗菌肽具有重要的意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于,针对现有技术的上述不足,提供了一种抗菌肽及其应用,该抗菌肽对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和青霉菌具有一定的抑制作用。
2、为实现上述目的,本专利技术采用如下的技术方案:
3、本专利技术的第一目的是提供一种抗菌肽,所述抗菌肽的氨基酸序列如seq id no.1所示。
4、上述的抗菌肽可人工合成、也可先合成其编码基因,再进行生物表达得到。
5、本专利技术的第二目的是提供与上述的抗菌肽相关的生物材料,a1)至a4)中的任一种:
6、a1)编码权利要求1所述抗菌肽的核酸分子;
7、a2)含有a1)所述核酸分子的重组载体;
8、a3)含有a1)所述核酸分子的重组微生物;
9、a4)含有
10、进一步的,所述核酸分子为如下1)或2):
11、1)编码序列是序列表中seq id no.2的dna分子;
12、2)序列表中seq id no.2所示的dna分子。
13、本专利技术的第三目的是提供上述生物材料在制备抗菌肽中的应用。
14、本专利技术的第四目的是提供上述抗菌肽在制备抗菌产品中的应用。
15、进一步的,所述抗菌肽对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、娄地青霉和禾谷镰刀菌具有抑制作用。
16、进一步的,所述抗菌肽对白色念珠菌的最小抑菌浓度为64μg/ml、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为8μg/ml、娄地青霉菌的最小抑菌浓度为32μg/ml、禾谷镰刀菌的最小抑菌浓度为32μg/ml。
17、本专利技术的第五目的是提供一种药物组合物,包括上述的抗菌肽或其药学上可接受的盐,和药学上可接受的赋形剂。
18、进一步,所述抗菌肽为唯一有效活性成分,可以理解为所述的药物组合物中,所述的抗菌肽或其药学上可接受的盐的用量可为治疗有效量。
19、术语“赋形剂”广泛指有效活性成分以外的任何组分。赋形剂可为惰性物质、非活性物质和/或无医药活性的物质。
20、赋形剂可满足不同目的,例如作为载体、溶媒、稀释剂、片剂助剂和/或改进活性物质的给予和/或吸收。赋形剂在这里不做限定,根据制剂工艺进行选择,包括但不限于:溶剂、稀释剂、缓冲剂、防腐剂、等渗剂、ph调节剂、表面活性剂,佐剂,离子强度增强剂、螯合剂、稳定剂或其任何组合。
21、本专利技术的药物可以配制成医学领域已知的任何剂型,例如,缓释剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、片剂或注射剂等。优选剂型取决于预期的给药方式和预防/治疗用途。例如,药物为液体制剂,即包含水的水性制剂。液体制剂可为溶液剂或混悬剂。水性制剂通常包含至少50%w/w的水或至少60%、70%、80%或甚至至少90%w/w的水。或者,药物可为固态制剂,例如冻干或喷雾干燥组合物,其可原样使用,或医生或患者在临用前向其中加入溶剂和/或稀释剂使用。
22、水性制剂的ph可为ph 1-ph 9之间的任何值,例如约7.0-约8.5;或约1.0-约7.0。
23、按照本领域常规的制剂工艺,在具体实施方案中,例如,可通过下述方法来制备注射剂:在适当的溶剂中加入必需剂量的本专利技术的抗菌肽,以及任选地,同时掺入其他改善的成分(包括但不限于,溶剂、稀释剂、缓冲剂、等渗剂、ph调节剂、表面活性剂,佐剂,离子强度增强剂、螯合剂和稳定剂,或其任何组合),随后过滤除菌。或者可通过下述方法来制备冻干制剂:在适当的溶剂中掺入必需剂量的本专利技术的多肽,以及任选地,同时掺入其他期望的成分(溶剂、稀释剂、缓冲剂、防腐剂、等渗剂、ph调节剂、表面活性剂,佐剂,离子强度增强剂、螯合剂、稳定剂或其任何组合),随后过滤除菌,冷冻干燥或直接冰冻。
24、缓冲剂可选自:乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸盐、甘氨酰甘氨酸、组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠和三(羟甲基)-氨基甲烷、苹果酸、琥珀酸盐、马来酸、富马酸、酒石酸、天冬氨酸及其混合物。
25、本专利技术的第六目的是提供一种食用防腐剂,包含上述的抗菌肽。
26、需要说明的是,作为食用防腐剂可以用在食品加工中,还可以用在饲料加工中。
27、术语“药学上可接受的盐”是指本领域常规的成盐反应,例如:由碱和酸之间的化学反应形成盐,如:nh3+h2so4→(nh4)2so4。
28、盐可以为碱性盐、酸性盐,或中性盐。碱性盐在水中产生氢氧根离子而酸性盐产生水合氢离子。
29、在具体实施方案中,本专利技术抗菌肽的类似物为碱性盐。这些盐可例如在肽部分的阴离子基团和钠或钾阳离子之间形成。
30、在另一具体实施方案中,本专利技术抗菌肽的类似物为酸性盐。这些盐可例如在肽部分的阳离子基团和氯离子或乙酸根阴离子之间形成。
31、上述生物材料中,所述重组载体可为质粒,具体可为pet32a、pet26b。
32、上述生物材料中,所述微生物可为酵母、细菌或真菌。其中,细菌可为大肠杆菌,如大肠杆菌bl21(de3)。
33、与现有技术比较,本专利技术提供的技术方案带来的有益效果是:
34、(1)本专利技术以宜章臭蛙(odorranayizhangensis)为研究对象,通过对毒腺样本转录组测序、数据分析与多肽挑选,首次发现了宜章臭蛙来源的抗菌肽及其编码基因,该抗菌肽对对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、娄地青霉和禾谷镰刀菌具有显著的抑制作用。
35、(2)本专利技术通过构建重组质粒和重组细胞表达高效制备出氨基酸序列为seq idno.1的抗菌肽(msnrrfwwmk),其分子量为1441.73,等电点为12.01。
36、(3)本专利技术通过对抗菌肽进行抑菌研究,研究结果表明该抗菌肽对白色念珠菌的最小抑菌浓度为64μg/ml、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为8μg/ml、娄地青霉菌的最小抑菌浓度为32μg/ml、禾谷镰刀菌的最小抑菌浓度为32μg/ml。同时,对抗菌肽的稳定性研究结果表明,其耐高温80℃,而且在ph为1~9仍保持优异的抑菌效果。
37、(4)本专利技术获得了一个新型抗菌肽,该分子易于制备,具备一定的抗降解能力,对抗菌药物的开发提供一种新的先导分子。作为防腐本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗菌肽,其特征在于:所述抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.与权利要求1所述的抗菌肽相关的生物材料,为下述A1)至A4)中的任一种:
3.如权利要求2所述的生物材料,其特征在于,所述核酸分子为如下1)或2):
4.如权利要求2或3所述的生物材料在制备抗菌肽中的应用。
5.如权利要求1所述的抗菌肽在制备抗菌产品中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述抗菌肽对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、娄地青霉和禾谷镰刀菌具有抑制作用。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于,所述抗菌肽对白色念珠菌的最小抑菌浓度为64μg/mL、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为8μg/mL、娄地青霉菌的最小抑菌浓度为32μg/mL、禾谷镰刀菌的最小抑菌浓度为32μg/mL。
8.一种药物组合物,其特征在于,其包括如权利要求1所述的抗菌肽或其药学上可接受的盐,和药学上可接受的赋形剂。
9.如权利要求8所述的药物组合物,其特征在于,所述抗菌肽为唯一有效活性成分。
10.一种
...【技术特征摘要】
1.一种抗菌肽,其特征在于:所述抗菌肽的氨基酸序列如seq id no.1所示。
2.与权利要求1所述的抗菌肽相关的生物材料,为下述a1)至a4)中的任一种:
3.如权利要求2所述的生物材料,其特征在于,所述核酸分子为如下1)或2):
4.如权利要求2或3所述的生物材料在制备抗菌肽中的应用。
5.如权利要求1所述的抗菌肽在制备抗菌产品中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述抗菌肽对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、娄地青霉和禾谷镰刀菌具有抑制作用。<...
【专利技术属性】
技术研发人员:吕荣,吕绍田,徐华超,
申请(专利权)人:长沙质谱佳科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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