一种兼抗两种黄灯笼辣椒病毒的弱毒疫苗及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种兼抗两种黄灯笼辣椒病毒的弱毒疫苗及其应用，属于植物保护技术领域。本发明专利技术通过将PVMV 6K1蛋白上第15位丙氨酸(A)突变为甘氨酸(G)的方式获得致病力明显减弱的弱毒疫苗，同时该弱毒疫苗能够预防上述两种病毒的侵染，实现对PVMV、ChiVMV的交叉保护，为田间防抗黄灯笼辣椒病毒提供新途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物保护，涉及一种兼抗两种黄灯笼辣椒病毒的弱毒疫苗及其应用。

技术介绍

1、黄灯笼辣椒(capsicum chinense)，又称黄帝椒、黄辣椒，是海南省特有的地方珍稀辣椒品种，也是5个辣椒主要栽培种之一。其味辛辣，辣度达15万位单位，有独特的香味，且含有人体所需的多种维生素、氨基酸和微量元素，具有极高的使用价值和经济价值，能促进热区农业经济的发展。虽然黄灯笼辣椒栽培相对简单，但随着黄灯笼辣椒种植面积的扩大，病毒病已成为影响黄灯笼辣椒种植业的最主要的因素，严重制约了其推广种植。potyvirus病毒则是侵染辣椒作物的最重要病毒类别之一，其中pvmv、chivmv严重影响辣椒产业和质量。

2、甜椒脉斑驳病毒(pepper veinal mottle virus，pvmv)于1971年首次在加纳被发现，并将其归属为马铃薯y病毒科(potyviridae)，马铃薯y病毒属(potyvirus)。pvmv侵染黄灯笼辣椒后在叶片上主要呈现褪绿、斑驳、畸形等症状。目前，关于黄灯笼辣椒的研究，主要集中在种质研究、栽培技术、辣椒食品工艺、基因研究本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种PVMV 6K1弱毒突变体，通过将黄灯笼辣椒6K1蛋白上第15位氨基酸由丙氨酸(A)突变成甘氨酸(G)的回复片段A15G连接到PVMV侵染性克隆上获得。

2.根据权利要求1所述的一种PVMV 6K1弱毒突变体，其特征在于，所述回复片段A15G的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

3.根据权利要求1所述的一种PVMV 6K1弱毒突变体，其特征在于，所述PVMV侵染性克隆为携带GFP标签的PVMV侵染性克隆pHNu-GFP。

4.一种PVMV 6K1弱毒突变体的构建方法，包括：先提取6K1蛋白上第15位氨基酸由丙氨酸(A)突变成甘氨酸(G)的...

【技术特征摘要】

1.一种pvmv 6k1弱毒突变体，通过将黄灯笼辣椒6k1蛋白上第15位氨基酸由丙氨酸(a)突变成甘氨酸(g)的回复片段a15g连接到pvmv侵染性克隆上获得。

2.根据权利要求1所述的一种pvmv 6k1弱毒突变体，其特征在于，所述回复片段a15g的核苷酸序列如seq id no：1所示。

3.根据权利要求1所述的一种pvmv 6k1弱毒突变体，其特征在于，所述pvmv侵染性克隆为携带gfp标签的pvmv侵染性克隆phnu-gfp。

4.一种pvmv 6k1弱毒突变体的构建方法，包括：先提取6k1蛋白上第15位氨基酸由丙氨酸(a)突变成甘氨酸(g)的黄灯笼辣椒rna，并进行反转录得到cdna，再通过pcr扩增得到发生回复突变的a15g片段，最后通过同源重组将a15g片段连接到pvmv侵染性克隆上。

5.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔红光，邓昌慧，戴兆基，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：