含有LK8蛋白作为活性成分的抗癌剂制造技术

本发明专利技术涉及一种包含ＬＫ８蛋白作为活性成分的抗癌剂。本发明专利技术的抗癌剂有效抑制恶性肿瘤的生长和转移。因此，该药剂不仅可有效用于癌转移的抑制剂，也可有效用作原发性恶性肿瘤的治疗剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种含某蛋白作为活性成分的抗癌剂，更明确地，涉及一种抗癌剂，该药剂含一种与载脂蛋白(a)的半胱氨酸卷曲区(kringle)KV38相对应的蛋白作为活性成分。背景肿瘤由失控的混乱的异常的细胞增殖发展而成。如果肿瘤显示出破坏性的生长、入侵和转移，则被认为是恶性肿瘤。入侵性是一种浸润或破坏周围组织的特性，尤其，形成组织边界的基底层被这种特性破坏，导致局部扩散及有时肿瘤通过循环系统流入。转移指肿瘤细胞从原发病灶通过淋巴管或血管向其它区域的扩散。广义上讲，转移性也指肿瘤细胞通过腹腔或其它空间直接扩散。迄今为止，外科手术、放射性治疗和化学治疗已单独或联合应用于癌症治疗。外科手术是除去患病组织的一种方法。这样，特定区域内的肿瘤，如乳房、结肠和皮肤，可由外科手术有效去除。然而，脊椎内的肿瘤或分散性肿瘤如白血病则不能通过外科手术进行适当的治疗。化学治疗阻断了细胞复制或代谢，并已被应用于乳腺癌、肺癌和睾丸癌的治疗。然而，接受化学治疗的癌症患者严重遭受了全身化疗的副作用的痛苦。其中普遍但严重的例子是晕动病和呕吐。化学治疗的副作用甚至会影响患者的生活，因为这些副作用可能使患者的适应性迅速降低。另外，剂量限制毒性(DLT)也是化学治疗的一个主要副作用，它引起了对药品服用的仔细的关注。粘膜炎就是针对抗癌药的DLT的一个例子，这些抗癌药如抗代谢细胞毒剂5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、以及抗癌抗生素如多柔比星等。如果患者受化疗副作用影响严重，他或她应该住院并被施以镇痛剂以减轻痛苦。所以，化学治疗或放射性治疗的副作用是癌症患者治疗中的最大问题。因此，急需开发一种源于生物体内的抗癌剂以减轻化学治疗的副作用。特别地，在一种生物体内产生的物质中，发现了一种有希望的物质，它不直接攻击癌症细胞，但通过对众多辅助癌细胞生长的内皮细胞发生作用而阻止癌细胞生长。所以，含此物质的抗癌剂不仅可以治疗癌症还可以阻止转移。Kringle是一种包含80个氨基酸和三个分子内二硫键的蛋白结构。Kringle结构在许多蛋白中都有发现，如凝血酶原(Walz，D.A.等，Proc.Natl.Acad.Sci.，741069-1073，1977)、尿激酶(Pennica，D.等，Nature，301579-582，1983)、肝细胞生长因子(Lukker，N.A.等，Protein Eng.，7895-903，1994)和载脂蛋白(a)(下文中称为’apo(a)’)(McLean，J.W.等，Nature，330132-137，1987)。Kringle包含一个单独的折叠单元。Kringle的功能尚未完被清楚阐明。Apo(a)包含两种kringle域，KIV和KV，和一个无活性的蛋白酶样区域。Kringle域KIV根据氨基酸同源性分为10个亚型(KIV-1～KIV-10)，15～40个拷贝数的该域发现于许多人apo(a)基因的等位基因中。Apo(a)通过与apo B-100共价结合形成一种脂蛋白(a)(下文中称为’Lp(a)’)，apo B-100是低密度脂蛋白(LDL)的一种主要蛋白成分(Fless，G.M.，J，Biol.Chem.，2618712-8717，1986)。细胞质中Lp(a)的增加本身就是动脉粥样硬化的主要风险因子(Armstrong，V.W.et al.，Artherosclerosis，62249-257，1986；Assmann，G，Am.J.Cardiol.，771179-1184，1996)。基于动脉粥样硬化和癌细胞生长依赖于血管发生的事实，本专利技术人研究了KV38的抗癌活性，KV38是人apo(a)kringle结构的一种。结果显示，本专利技术人已完成了本专利技术，证实此蛋白可有效用作一种抗癌剂，这是由于其通过一种bFGF样的内源生长因子抑制了血管生成，血管生成在癌细胞生长中是必需的。专利技术概述本专利技术的一个目的是提供一种包含人apo(a)kringle KV38(下文中称为LK8蛋白)作为活性成分的抗癌剂。优选实施方案详述为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术提供一种包含LK8蛋白作为活性成分的抗癌剂。下文中，本专利技术被详述。本专利技术的抗癌剂的特征在于含有具有SEQ.ID.No.1所示氨基酸序列的LK8蛋白作为活性成分。优选使用此药剂作为转移抑制剂，更优选地，其被应用于抑制结肠癌或直肠癌向肝的轩移。另外，该抗癌剂优选用于原发性肿瘤的治疗。更优选地，此药剂用于治疗从由前列腺癌、肺癌、结肠癌和直肠癌的组中选择的癌症。本专利技术中抗癌剂优选地含有0.1～100mg/kg LK8蛋白，更优选地含1～50mg/kg LK8蛋白，施药次数为每天1～4次。但组成不限于上述，并可能根据病人情况、疾病的种类和进展速度而改变。本专利技术中，“KV38”指一种apo(a)kringle，“LK8”指KV38的重组蛋白。然而，除非特别声明，KV38和LK8蛋白都通称为LK8蛋白。本专利技术中的LK8蛋白是一个与许多apo(a)kringle域的KV38kringle相对应的域，通过体外以及体内抑制内皮细胞的活性而具有对癌细胞增殖和分化以及转移的抑制效应。如本专利技术优选实施方案所述，LK8蛋白的全身用药导致了对原发性肿瘤及其转移的抑制(见图2～图6)。因此，由于其抑制肿瘤生长和转移的功能，本专利技术中的LK8蛋白可有效用作一种针对原发性肿瘤的抗癌剂及一种转移抑制剂。如果本专利技术中LK8蛋白与常规化学治疗或放射治疗共同使用则其治疗效果将被增强。放射性治疗优选破坏原发性肿瘤，如果在放射性治疗中施用LK8蛋白，可更有效的阻止转移。对于化学治疗，大剂量化学抗癌剂产生的细胞毒性是最大的问题。如果在化学治疗中施用本专利技术的LK8蛋白，降低了剂量的化学抗癌剂将带来相同甚至改善了的抗癌效果并减轻了细胞毒性。总之，如果施用LK8与外科手术、放射性治疗、化学治疗或免疫治疗同时进行，治疗效果将被最大化。更进一步，LK8蛋白的连续施用延长了微转移的休眠，抑制了原发性肿瘤的生长并稳定了病情。许多常规抗癌剂被设计用于长期服用，导致诸如连续生产蛋白和产品的高价等问题。它们的替代者是基因治疗。如果用于基因治疗，我们仍然预期LK8蛋白能使抗癌剂或转移抑制剂的效果最大化。本专利技术含LK8蛋白的抗癌剂可口服或肠胃外给药并用于药物制剂的一般形式。通过与通用的填充剂、膨胀剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、稀释剂如表面活性剂、或赋形剂相混合，本抗癌剂可制备用于口服或肠胃外给药。口服给药的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、粒剂或胶囊。这些固体制剂通过混合一种或多种合适的赋形剂制备，如淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖、明胶等。除了简单的赋形剂，也可使用硬脂酸镁、滑石等润滑剂。口服给药的液体制剂为混悬剂、溶液、乳剂和糖浆，上述制剂在通用的稀释剂如水和液体石蜡外可含有多种赋形剂如湿润剂、甜味剂、芳香剂和防腐剂。肠胃外给药制剂为无菌的水溶液、水不溶性赋形剂、混悬剂、乳剂和栓剂。水不溶性赋形剂和混悬剂可含有，除一种或多种活性化合物外，丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄榄油、可注射酯如油酸乙酯等。栓剂可含有，除一种或多种活性化合物外，witepsol、聚乙二醇、吐温61、可可脂、月桂脂、甘油明胶等。LK8蛋白的LD50约为1,000mg/kg，说明本专利技术的抗癌剂非常安本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗癌剂，包含ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ１所示的ＬＫ８蛋白作为有效成分。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：柳贤京，金章性，安珍衡，李好晶，康官烨，林滢权，朴政奂，林仁焕，金圣根，朱学奎，李志贤，尹烨，朴斗鸿，
申请(专利权)人：财团法人牧岩生命工学研究所，
类型：发明
国别省市：KR[韩国]