一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法技术

本发明专利技术提供了一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法，属于食品安全检测领域。本发明专利技术包括链霉素特异性适配体的定点突变优化和侧向层析适配体试纸条的开发。定点突变STR适配体的酶切位点保证酶反应的进行，根据纳米金比色法测定结合饱和曲线获得亲和力最佳的适配体Apt52‑0。设计包含Apt52‑0的发卡结构，结合Vent®exo‑DNA聚合酶和Nt.AlwI切刻内切酶辅助信号放大实现靶标循环和目的序列置换，制备扩增探针和捕获探针实现信号放大和目的序列与扩增探针的同时识别，开发酶循环和多重AuNPs复合探针的二次信号放大侧向层析适配体试纸条。基于适配体试纸条检测STR的视觉检出限为25 nM，通过Image J软件分析的检出限为17.6 nM，为检测STR提供了一种实惠、高效、简便的手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术提供一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法，属于食品安全检测。

技术介绍

1、链霉素（str）是一种对革兰氏阴性细菌具有特别的抑制作用的氨基糖苷类抗生素。然而，当其作为兽药使用不规范时，将会导致残留于肉类、牛奶和蜂蜜等食品中，对人体造成过敏反应、听力丧失和肾脏毒性等危害。因此，建立高效简便、灵敏准确的str残留检测方法至关重要。目前，高效液相色谱、微生物检测、酶联免疫等检测方法已用于检测牛奶中str的残留，但这些方法由于设备昂贵、技术水平要求高、检测时间长和操作繁琐等弊端限制了它们的应用。

技术实现思路

1、专利技术的目的在于需求一种高效灵敏、实惠简便的技术手段检测牛奶中的str。

2、其技术方案为：适配体是一小段通过经过体外筛选获得的对目标物质具有高亲和力的寡核苷酸序列。适配体因其合成容易、热稳定性高、靶标范围广等优势，为解决当前食品安全及环境监测等问题提供新的高效快速的识别元件。

3、所述的一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法（图1），针对str本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法，其特征在于：定点突变优化获得的链霉素特异性适配体Apt52-0，设计包含Apt52-0的发卡结构用于酶促反应，开发了一种基于酶辅助和多重纳米金复合探针的二次信号放大的侧向层析纸基适配体试纸条，用于检测链霉素。

2.如权利要求1所述的一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法，其特征在于：定点突变STR特异性适配体Apt52保护酶切位点，根据纳米金比色法选择亲和力最佳的适配体Apt52-0。

3.如权利要求1所述的一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法，其特征在于：设计包含Apt52-0的发...

【技术特征摘要】

1.一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法，其特征在于：定点突变优化获得的链霉素特异性适配体apt52-0，设计包含apt52-0的发卡结构用于酶促反应，开发了一种基于酶辅助和多重纳米金复合探针的二次信号放大的侧向层析纸基适配体试纸条，用于检测链霉素。

2.如权利要求1所述的一种检测链霉素残留的侧向层析适配体试纸条的制备方法，其特征在于：定点突变str特异性适配体apt52保护酶切位点，根据纳米金比色法选择亲和力最佳的适配体apt52-0。

【专利技术属性】
技术研发人员：李发兰，张皖齐，孙志聪，孙霞，郭业民，张妍妍，杨青青，
申请(专利权)人：山东理工大学，
类型：发明
国别省市：