同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法技术

技术编号:42780160 阅读:82 留言:0更新日期:2024-09-21 00:41
本发明专利技术公开了一种同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,包括如下步骤:将负载有细胞色素P450酶基因片段、多巴4,5‑双加氧酶基因片段和葡糖基转移酶基因片段的超量表达载体转化入镰刀菌体内,得到新的镰刀菌,其中,细胞色素P450酶基因片段、多巴4,5‑双加氧酶基因片段和葡糖基转移酶基因片段被构建为连锁基因;将新的镰刀菌接种于液体培养基中进行培养,分别获取发酵液和菌体,并从发酵液中收获甜菜红素,从菌体中收获菌丝体蛋白。本发明专利技术通过在威尼斯镰刀菌中定向过表达甜菜红素合成基因RUBY,获得高效合成甜菜红素的威尼斯镰刀菌菌株,达到菌株菌丝体蛋白生产时提高综合经济效益的目的。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及威尼斯镰刀菌基因工程领域,涉及产甜菜红素威尼斯镰刀菌表达载体的构建及产甜菜红素威尼斯镰刀菌株的创建,具体涉及同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法


技术介绍

1、由威尼斯镰刀菌发酵生产的菌丝体蛋白安全性好且能够提供均衡的营养,具有替代动植物来源膳食蛋白的潜质。然而,天然菌株生产菌丝体蛋白的高成本成为限制其发展的关键因素。而打破当前这种限制因素的方式主要有两种,一种是通过对菌株进行改造以提高菌丝体蛋白的合成效率直接降低成本;另一种则是在菌株中合成具有附加价值的产品以提高总体的经济效益。

2、甜菜红素是一种从红甜菜根中提取的天然红色食用色素,对人体具有抗氧化、抗炎、降血脂和抗肿瘤等功效。然而,考虑到甜菜根中甜菜红素的含量较低,提取过程中产品的回收率相对较低,以及全球市场需求的不断增长,迫切需要一种新的甜菜红素供应模式。当前,从土地利用、生产周期和可持续大规模生产的角度来看,微生物发酵生产甜菜红素的优势最为明显。因此,创建高产甜菜红素的威尼斯镰刀菌菌株不仅可以提高菌株生产菌丝体蛋白时的总体经济效益以及缓解甜菜红素供应不足的现状,本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.如权利要求1所述的同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,其特征在于,将细胞色素P450酶基因片段、多巴4,5-双加氧酶基因片段和葡糖基转移酶基因片段通过2A肽串联在一起的开放阅读框命名为RUBY基因。

3.如权利要求2所述的同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,其特征在于,得到所述新的镰刀菌的方法包括如下步骤:

4.如权利要求3所述的同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,其特征在于,进行原生质体转化时,所述介导RUBY定点整合威尼斯镰刀菌基因组的C...

【技术特征摘要】

1.同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.如权利要求1所述的同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,其特征在于,将细胞色素p450酶基因片段、多巴4,5-双加氧酶基因片段和葡糖基转移酶基因片段通过2a肽串联在一起的开放阅读框命名为ruby基因。

3.如权利要求2所述的同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,其特征在于,得到所述新的镰刀菌的方法包括如下步骤:

4.如权利要求3所述的同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,其特征在于,进行原生质体转化时,所述介导ruby定点整合威尼斯镰刀菌基因组的crispr/cas9表达载体和供体dna片段pgpda-ruby-ttef1的加入量均为800ng/μl。

5.如权利要求3所述的同时提高镰刀菌菌丝体蛋白和甜菜红素产量的方法,其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员:李德茂童胜王钦宏洪如如陈吴西柴梦丹
申请(专利权)人:中国科学院天津工业生物技术研究所
类型:发明
国别省市:

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