【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医学和生物，利用细菌外膜囊泡表面携带高丰度细菌外膜蛋白ａ（ompa）的特点，构建ompa-nanoluc荧光素酶融合蛋白，并将表达ompa-nanoluc荧光素酶融合蛋白的基因整合进宿主细菌基因组中。
技术介绍
1、细菌外膜囊泡（bacterial outer membrane vesicles，omvs）是一种由细菌外膜释放的小型膜结构球状物质，一般被认为是由细菌细胞外膜（outer membrane）脱落形成，其直径通常在20到400纳米之间，其内容物包含了脂质、蛋白质和核酸等。
2、细菌外膜囊泡在细菌生物学中具有多种功能。首先，它是一种细菌间信号传递的工具，从而调节细菌的生长、代谢和生物行为等方面的活动。其次，它可以用作一种细菌与宿主细胞装之间传递分子的手段。第三，它还被认为具有激活宿主免疫系统，参与宿主对细菌感染免疫应答的作用。并且，它作为纳米级的颗粒具有许多潜在的应用价值，可以作为药物传递系统、疫苗候选者、生物标志物等用于医学和生物
，有助于开发新的治疗方法、诊断工具和生物技术应用。因此，细菌外...
【技术保护点】
1.一种对细菌外膜囊泡进行荧光标记的质粒，其特征在于，所述质粒包含如SEQ IDNO：1所示的重组蛋白DNA序列。
2.根据权利要求1所述的质粒，其特征在于，所述质粒包含Tn7转座子和tnsABCD转座酶。
3.根据权利要求1或2所述的质粒，其特征在于，所述质粒为pGRG25载体，MCS区包含如SEQ ID NO：1所示的重组蛋白DNA序列。
4.一种制备荧光素酶报告基因标记的细菌外膜囊泡的方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤A通过酶切和连接的方式构建，其中酶切反应体系为：...
【技术特征摘要】
1.一种对细菌外膜囊泡进行荧光标记的质粒，其特征在于，所述质粒包含如seq idno：1所示的重组蛋白dna序列。
2.根据权利要求1所述的质粒，其特征在于，所述质粒包含tn7转座子和tnsabcd转座酶。
3.根据权利要求1或2所述的质粒，其特征在于，所述质粒为pgrg25载体，mcs区包含如seq id no：1所示的重组蛋白dna序列。
4.一种制备荧光素酶报告基因标记的细菌外膜囊泡的方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤a通过酶切和连接的方式构建，其中酶切反应体系为：1 µg限制性内切酶、1µl dna片段、5 µl 10*nebuffer、43µl h...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘畅，李智洋，周万青，张燕，王丹微，李佳，孟玲宁，
申请(专利权)人：南京鼓楼医院，
类型：发明
国别省市：
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