一种用于敲除鸭短喙矮小综合征病毒VP1u基因的双位点sgRNA及其CRISPR/Cas9系统与应用技术方案

本发明专利技术涉及一种用于靶向敲除鸭短喙矮小综合征病毒VP1u基因的双位点sgRNA及其CRISPR/Cas9系统与应用，所述的双位点sgRNA，包括up3‑sgRNA和ud3‑sgRNA；up3‑sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，ud3‑sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。本发明专利技术提供的双位点sgRNA可通过CRISPR/Cas9系统特异靶向敲除SBDSV的vp1u蛋白片段，可有效干扰SBDSV的复制，阻止其对宿主细胞的感染，为实现病毒基因编辑提供了有效的技术手段，为SBDSV病毒VP1u蛋白功能研究提供了重组病毒模型，为SBDSV致病机制研究等奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术主要涉及基因工程，具体涉及一种用于靶向敲除鸭短喙矮小综合征病毒vp1u基因的双位点sgrna序列及其应用，还涉及一种通过crispr/cas9技术敲除鸭短喙矮小综合征病毒vp1u基因编辑技术及其应用。

技术介绍

1、鸭短喙矮小综合征(shortbeak and dwarfism syndrome，sbds)是2015年以来，在我国多省、市樱桃谷鸭、半番鸭中流行的一种以短喙(喙变短，严重时舌头外露)、跛行(脚骨折)、严重生长障碍(僵鸭)、羽毛不齐等为典型临床特征的新疫病，给养殖户造成极大经济损失。鸭短喙矮小综合征的病原为鹅细小病毒(goose parvovirus，gpv)变异株或新型鹅细小病毒(novel goose parvovirus)，鉴于该病以短喙和生长障碍为临床特征，将该病毒命名为短喙矮小综合征鹅细小病毒(sbds-gpv)，也称为鸭短喙矮小综合征病毒(sbdsv)。其基因组全长约5100bp，为单链dna病毒，两端为发夹itr区，中间编码区含有两个主要的开放阅读框(orf)，左侧orf编码非结构蛋白ns1(rep1)和ns2(rep2本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于敲除鸭短喙矮小综合征病毒VP1U基因的双位点sgRNA，其特征在于：它包括up3-sgRNA和ud3-sgRNA；

2.根据权利要求1所述的用于敲除鸭短喙矮小综合征病毒VP1U基因的双位点sgRNA，其特征在于：

3.一种包含权利要求1所述的双位点sgRNA的表达载体。

4.如权利要求3所述的表达载体，其特征在于：它包括表达载体VP1u-UP3Cas9-PX459和表达载体VP1u-UD3Cas9-PX459；

5.一种用于敲除鸭短喙矮小综合征病毒VP1U基因的CRISPR/Cas9系统，其特征在于：所述CRISPR/Cas9系...

【技术特征摘要】

1.一种用于敲除鸭短喙矮小综合征病毒vp1u基因的双位点sgrna，其特征在于：它包括up3-sgrna和ud3-sgrna；

2.根据权利要求1所述的用于敲除鸭短喙矮小综合征病毒vp1u基因的双位点sgrna，其特征在于：

3.一种包含权利要求1所述的双位点sgrna的表达载体。

4.如权利要求3所述的表达载体，其特征在于：它包括表达载体vp1u-up3cas9-px459和表达载体vp1u-ud3cas9-px459；

5.一种用于敲除鸭短喙矮小综合征病毒vp1u基因的crispr/cas9系统，其特征在于：所述crispr/cas9系统包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑敏，陈仕龙，林昶，王劭，陈少莺，
申请(专利权)人：福建省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：