【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于丹参素制备领域，具体地，涉及一种大肠杆菌高产丹参素的发酵方法。
技术介绍
1、丹参素(salvianic acid a)是一种有机化合物，分子式为c9h10o5。为白色长针状结晶，是丹参水溶性成分中的主要药效成分之一。具有活血化瘀、理气止痛的功效，常用于胸憋闷等症状的治疗。此外，随着人们对健康意识的提高和消费水平的提高，丹参素在医药、化妆品和功能性食品等多个领域都展现出广阔的市场前景。在医药行业，丹参素可以用于治疗心血管疾病、糖尿病、癌症等疾病，因其具有较好的疗效和较低的毒副作用而备受关注。在化妆品行业，丹参素因其抗氧化、抗炎、保湿等作用而被广泛应用于护肤品中。在功能性食品行业，丹参素可用于开发低热量、高抗氧化活性的食品。
2、最初，从天然植物提取的丹参酮等前体物质,经过化学修饰合成丹参素，但是产率较低,需要大量天然植物原料；化学合成路线是从原料丹参酮出发,经过氧化、还原、酯化、脱保护一系列的化学反应来合成丹参素。但是使用的试剂包括过氧化物、金属氢化物、酸、碱等，存在环境污染问题；生物合成法是利用微生物的代谢过程,将天然前体物质转化为丹参素，绿色环保,不产生化学污染。
3、中国专利cn 103667371a，使用基因工程谷氨酸棒状杆菌和大肠杆菌,进行发酵生产丹参素,不需底物添加即可合成丹参素,实现了丹参素的从头合成，摇瓶补料发酵到48h，发酵液中丹参素产量7.5g/l，但该方法产量低。
4、中国专利cn 110592038 a，构建l-苯丙氨基酸脱氢酶和α-羟基羧酸脱氢酶共表达的
5、中国专利cn 108424937 a，也是采用酶法，利用酪氨酸解氨酶酶、苯丙酮酸还原酶和葡萄糖脱氢酶催化左旋多巴生产丹参素，摩尔转化率大于52.3％。但是也是需要额外提供底物左旋多巴。
6、考虑到，目前采用的微生物法发酵合成丹参素，发酵液中丹参素产量低、且发酵工艺复杂、原料成本较高，实现丹参素商业化生产依旧很困难。所以需要提供一种可以提高发酵产量、原料价格低、工艺简单的高产丹参素的发酵方法。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种大肠杆菌高产丹参素的发酵方法。
2、本专利技术的技术方案概述如下：
3、一种大肠杆菌高产丹参素的发酵方法，包括如下步骤：
4、(1)对大肠杆菌进行种子培养，得到种子液；
5、(2)将所述种子液，按体积比0.5％-2％比例接种于发酵培养基中，在35-40℃，用氨水调ph＝6.5-7.5，溶氧do为5％-30％，同时溶氧与搅拌关联，转速200-1000rpm，开始发酵；发酵到6h时，加终浓度为0.1-0.5mm iptg为诱导剂；降温到25-35℃，继续发酵到6.5h时，开始补加补料培养基，补料速度为10ml/l/h-25ml/l/h；继续发酵；
6、(3)发酵到40h，停止发酵；
7、所述发酵培养基包括：葡萄糖10-40g/l，酵母提取物3-8g/l，蛋白胨3-8g/l，硫酸铵1-5g/l，磷酸二氢钾2-8g/l，七水硫酸镁1-5g/l，柠檬酸钠1-5g/l，七水硫酸亚铁10-50mg/l，一水硫酸锰2-8mg/l，维生素b1 0.1-1mg/l，、维生素h 0.1-1mg/l，消泡剂0.5ml/l，甜菜碱0-2g/l，微量元素混合液1ml/l，余量为水；
8、所述补料培养基包括：葡萄糖400-900g/l，七水硫酸镁5-15g/l，甜菜碱0-5g/l，余量为水。
9、本专利技术的一种大肠杆菌高产丹参素的发酵方法，采用优化后的发酵培养基进行发酵，培养基成份简单清晰，原料成本低，发酵工艺简便，产量水平高，大大提高了丹参素产量，使大肠杆菌工业化生产丹参素得以实现可，不需要成本高的底物左旋多巴。
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1.一种大肠杆菌高产丹参素的发酵方法，其特征在于包括如下步骤：
【技术特征摘要】
1.一种大肠杆菌高产丹参素的发酵...
【专利技术属性】
技术研发人员：乔建军，郁庄，李伟国，田道光，罗春威，卢立夏，梁冬梅，
申请(专利权)人：天津大学浙江研究院绍兴，
类型：发明
国别省市：
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