本发明专利技术利用现代生物学技术和生物信息学分析对ｍｉＲ－２２３的功能进行了初步研究，发现ｍｉＲ－２２３具有抑制ＭＤＳＣｓ的功能，进而发现ｍｉＲ－２２３具有抑制肿瘤生长的用途，可以将ｍｉＲ－２２３设计为靶向药物来治疗肿瘤，对肿瘤临床免疫治疗有着潜在的巨大应用价值，并且为进一步研究ｍｉＲ－２２３的生物学功能奠定了基础。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及miR-223的新用途。技术背景 在2000年，随着人类基因组计划(human genome project, HGP)中人类基因 组草图绘制工作的完成，揭开了组成人体10万个基因的30亿个碱基对的秘密。研究 人员发现编码基因的数目大约2-2. 5万左右，只占整个基因组长度的1.5%，而剩下 的98. 5 %为非编码序列。非编码RNA包括核糖体RNA (rRNA)、转运RNA (tRNA)在内的 组成性表达RNA (constructive RNA)和小干扰RNA (siRNA)、microRNA在内的调控性 RNA(regulatoryRNA)。MicroRNA这种非编码调控RNA，是由机体自我产生，具有18-25个碱 基，主要通过与靶基因信使RNA(mRNA)3’非翻译区(3’ -UTR)配对结合来实现对基因的调 控。microRNA在个体的生长发育、细胞分化凋亡、疾病发生、免疫调节等过程起着重要作用， 它可以以转录水平或者转录后水平方式调节其他基因的表达。目前，根据miRNA数据库显 示miRNA总数达五千个左右，miR-223就是其中的一个。肿瘤是危害人类身体健康的首要疾病之一，据报道癌症患者的平均生存率仅为5 年，而癌症治愈率只有20% -30%左右。过去十年我国虽然在肿瘤的防治方面取得了很大 进展，出现了许多新技术新方法，发展了多种抗肿瘤免疫治疗，但到目前为止，这些方法远 没有达到人们的预期效果，一个重要的原因就是缺少生物治疗。目前肿瘤治疗中发展最为 迅速的一个领域是靶向药物治疗，被大家广泛重视，同时基因治疗代表着未来肿瘤防治方 向。髓系来源抑制细胞(MDSC)是近来研究发现在肿瘤患者体内大量聚积的一类细 胞，参与肿瘤细胞的免疫编辑，包括免疫清除，免疫对抗，免疫逃逸三个过程，其在人类外 周血的增高表达已经在肾细胞癌，乳腺癌，结肠癌等中得到证实。在小鼠模型中，MDSCs 可积聚在骨髓、脾和外周血中。MDSCs是一群具有高度异质性的髓系细胞群体，包括包括 1/3为末成熟巨噬细胞和树突样细胞，其他的是处于分化早期的髓系细胞。MDSCs在人表 达为⑶33+HLAT)R-细胞，在小鼠表达为CDllb+Gr-Γ细胞。小鼠⑶llb+Gr-Γ细胞通过形 态学、分子组成和功能学三方面分成了两个亚型单核细胞型(MO-MDSCs)类似炎症性的 单核细胞，表达Ly6C标记；低密度的多形核白细胞型(PMN-MDSCs)类似不成熟的白细胞， 表达Ly6G标记，它们都对T淋巴细胞有抑制作用。研究发现在小鼠⑶llb+Gr-Γ细胞中 白介素-10 (IL-10)，转化生长因子β (TGF- β )，白介素_6 (IL-6)，血管内皮细胞生长因子 (VEGF)，类前列腺素，前列腺素E2(PGE2)和基质细胞衍生因子α (SDF α )这些肿瘤相关因 子的释放抑制了免疫调节细胞的成熟和分化，从而影响了细胞分化的正常途径，导致MDSCs 的大量积聚。但是目前对于遗传因素究竟如何影响MDSCs在肿瘤细胞中积聚的机制还没有 具体阐明。肿瘤患者体内大量积聚髓系来源抑制细胞(MDSCs)，这类细胞可造成肿瘤细胞的 免疫逃逸。虽然具体抑制免疫的机制尚不明确，但MDSCs可抑制淋巴细胞的增殖并促使其凋亡；另外MDSCs可通过影响一氧化氮合酶、精氨酸酶的活性来影响肿瘤的生长。因此通过 降低这群细胞，或促使其分化，可有助于肿瘤免疫激活，将是很有前景的肿瘤免疫辅助治疗方法。因此，发现和研究可以抑制MDSCs在肿瘤细胞中积聚的因子对于肿瘤的预防、治疗等方面有着重要的意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供miR-223的新用途。为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案是miR-223具有抑制髓系来源抑制细胞积聚的用途。优选的，所述miR-223通过阻碍髓系来源抑制细胞(MDSCs)的积聚从而具有抑制 肿瘤生长的用途。优选的，所述肿瘤为肾细胞癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌或卵巢癌。优选的，所述肿瘤为结肠癌、肺癌或卵巢癌。优选的，所述肿瘤为结肠癌。优选的，所述miR-223在制备用于抑制肿瘤生长的药物中的用途，即制备以 miR-223为靶点的药物来抑制肿瘤生长。优选的，所述miR-223在制备用于抑制结肠癌、肺癌或卵巢癌生长的药物中的用途。优选的，所述miR-223在制备用于抑制结肠癌生长的药物中的用途。本专利技术的有益效果是本专利技术利用现代生物学技术和生物信息学分析对miR-223的功能进行了初步研 究，发现miR-223具有抑制MDSCs的功能，进而发现miR-223具有抑制肿瘤生长的用途， 可以将miR-223设计为靶向药物来治疗肿瘤，对肿瘤临床免疫治疗有着潜在的巨大应用价 值，并且为进一步研究miR-223的生物学功能奠定了基础。附图说明图1是；实施例中所使用的引物图谱；图2是流式细胞分析对MDSCs分群结果图谱；图3是肿瘤鼠体内MDSCs对miR-223的抑制图谱；图4是miR-223在不同实验模型中的表达图谱；图5是不同miRNA对MDSCs积累的影响图谱；图6是miR-223及其抑制剂对MDSCs积累的影响图谱；图7是不同实验模型中MDSCs表达图谱；图8是miR-223及其抑制剂对MO-MDSCs和PMN-MDSCs积累的影响图谱；图9是MEF2C对MDSCs积累的影响图谱；图10是MEF2C对MDSCs不同亚群细胞的积累的影响图谱；图 11 是MEF2C 图谱；图12是miR-223对靶分子MEF2C表达的影响验证图谱；图 13 是miR-223、miR-223 抑制剂、MEF2C3，UTR 及 MEF2C3，UTR 突变体及对 MDSCs 的影响图谱；图14是miR-223抑制剂对肿瘤鼠体内Grl+⑶lib+细胞分化的影响图谱；图15是不同肿瘤细胞上清和PGE2对MDSCs的分化的影响图谱；图16是与不同肿瘤细胞上清和PGE2共培养的BMCs中miR-223前体、成熟miR-223及MEF2C表达水平随时间变化的图谱；图17是miR-223、MEF2C对BMCs分化的影响图谱；图18是miR-223与肿瘤生长速度关系图谱。具体实施例方式为了使本领域的技术人员更好的理解本专利技术的技术方案，下面结合附图及具体实 施方式对本专利技术所述技术方案作进一步的详细说明。实施例1构建肿瘤小鼠模型、BMCs的制备以及miRNA基因和3’ -UTR的表达构建(1)肿瘤鼠模型的建立使用4-6周的雌性BALB/C鼠和C57BL/6鼠(北京动物中心)，并且至少在实验前 一周将鼠饲养在不存在对鼠致病的病原体的环境内，保证鼠处于病原体免疫状态。实验构 建了 s. c.肿瘤模型(静脉注射肿瘤模型)，包括在BALB/C鼠内构建CT26结肠癌(ATCC)模 型，以及在C57BL/6鼠体内构建Lewis肺癌模型和1D8卵巢癌模型(Ruby，Texas大学)，鼠皮 下一次性注射100微升PBS，内含5 X IO5肿瘤细胞。模型构建时每个模型所注射的肿瘤细胞 的数量是以在注射后3-4周内能形成一个直径约为1. 5厘米的肿瘤为依据的，对于构建好 的实验鼠，在肿瘤直径约为0. 25厘米时，通过球后静脉向模型鼠体内一次性注射2. 5X IO6 转染BMCs。(本文档来自技高网...
【技术保护点】
ｍｉＲ－２２３具有抑制髓系来源抑制细胞积聚的用途。
【技术特征摘要】
miR-223具有抑制髓系来源抑制细胞积聚的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于所述miR-223具有抑制肿瘤生长的用途。3.根据权利要求2所述的用途，其特征在于所述肿瘤为肾细胞癌、乳腺癌、结肠癌、肺 癌或卵巢癌。4.根据权利要求3所述的用途，其特征在于所述肿瘤为结肠癌、肺癌或卵巢癌。5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘乔飞，张苗苗，王萌萌，陈颖莹，张园，杨荣存，
申请(专利权)人：南开大学，
类型：发明
国别省市：12[中国|天津]
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