以SOD1基因调控长链二元酸产量的方法及其载体和微生物技术

一种以SOD1基因调控长链二元酸产量的方法，其将含有靶向SOD1基因的识别序列的sgRNA和激活因子的载体转染产长链二元酸的微生物实施发酵生产长链二元酸。本发明专利技术的方法不仅通过CRISPRa技术提高SOD1编码基因表达量，从而显著提高了长链二元酸产量，降低载体体量和构建的难度，还实现了调控长链二元酸产量，提高多基因表达调控灵活性，利于实践应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种化合物的生产方法，尤其涉及一种长链二元酸的生产方法，以及对其产量实施调控的方法和生物载体。

技术介绍

1、长链二元酸(lcda)包括分子式为hooc(ch2)ncooh的二元酸，其中n≥7，其在α和ω位各有一个羧基的脂肪族二羧酸。以长链二元酸作为单体原料合成的材料不仅具有较好的性能、经济实用，并且能够节省能源、降低对环境的污染，已被广泛用于精细化工和医药等领域，如合成尼龙、树脂、粉末涂料、高等香料、航空润滑油、高温电解质和防腐剂等。

2、长链二元酸的获取方式主要有植物油裂解法、化学合成法和微生物发酵法三种，长期以来化学合成法占据了主导地位。然而化学合成流程冗长繁琐，环境污染严重，且在合成过程中常会出现断链的情况，无法获得高纯度产品，生产成本高。微生物发酵法主要是利用微生物特有的氧化能力和胞内酶作用的特点来合成二元酸，其具有环境友好、操作简便易控以及产品质量高等特点，发展前景和工业价值广阔，目前已逐渐成为长链二元酸生产的主要途径。

3、采用基因工程的手段来对菌株进行针对性的遗传改造，可以达到控制产物代谢途径的目的，目本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种调控长链二元酸产量的方法，其特征在于将含有靶向SOD1基因的识别序列的sgRNA和激活因子的载体转染产长链二元酸的微生物实施发酵生产长链二元酸；

2.根据权利要求1所述的调控长链二元酸产量的方法，其特征在于所述靶向SOD1基因的识别序列选自于如下至少一组：

3.根据权利要求1所述的调控长链二元酸产量的方法，其特征在于在产长链二元酸的微生物中表达dCas9表达盒、sgRNA表达盒和激活因子表达盒；其中：

4.根据权利要求1所述的调控长链二元酸产量的方法，所述微生物选自棒状杆菌(Corynebacterium)、白地霉(Geotrichumcand...

【技术特征摘要】

1.一种调控长链二元酸产量的方法，其特征在于将含有靶向sod1基因的识别序列的sgrna和激活因子的载体转染产长链二元酸的微生物实施发酵生产长链二元酸；

2.根据权利要求1所述的调控长链二元酸产量的方法，其特征在于所述靶向sod1基因的识别序列选自于如下至少一组：

3.根据权利要求1所述的调控长链二元酸产量的方法，其特征在于在产长链二元酸的微生物中表达dcas9表达盒、sgrna表达盒和激活因子表达盒；其中：

4.根据权利要求1所述的调控长链二元酸产量的方法，所述微生物选自棒状杆菌(corynebacterium)、白地霉(geotrichumcandidum)、假丝酵母属(candida)、毕赤酵母属(pichia)、红酵母属(rhodotroula)、酵母属(saccharomyces)或耶氏酵母属(yarrowia)；优选为酵母菌，更优选为热带假丝酵母(candida tropicalis)、维斯假丝酵母(candidaviswanathii)或清酒假丝酵母。

5.一种微生物，其特征在于靶向含有sod1基因的识别序列的sgrna和激活因子的载体，该微生物用于调控长链二元酸产量。

6.根据权利要求5所述的微生物，其特征在于所述微生物含有靶向sod1基因的识别序列的sgrna和激活因子的载体；所述靶向sod1基因的识别序列选自于seq id no：1、seq idno：2、seq id no：3、seq id no：4、seq id no：5、seq id no：6、seq id no：7、seq id no：8、seq id no：9、seq id no：10、seq id no：11、seq id no：12、seq id no：13和seq id no：14中的一种或...

【专利技术属性】
技术研发人员：戎倩倩，刘文波，刘修才，
申请(专利权)人：上海凯赛生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：