【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于动物模型构建，具体涉及一种头颈鳞癌骨侵犯鼠模型的建造方法及其应用。
技术介绍
1、鳞状细胞癌是指一种鳞状上皮来源的恶性肿瘤，可发生于头颈部、肺和食管等处，具有恶性程度高和侵袭性强等生物学特点，较易发生转移和复发，给患者及家庭乃至社会医疗体系带来沉重负担。骨骼是鳞癌浸润及转移常累及的器官之一。鳞癌骨侵犯可发生于全身骨骼，主要集中在颅颌面部、脊柱、肋骨和四肢，引起骨质破坏和病理性骨折，是影响患者生存质量和生存时间的重要因素。其中，头颈部鳞癌是极具恶病质的鳞癌之一，约占所有头颈部恶性肿瘤的90％，包括唇和口腔癌、喉癌、鼻咽癌以及口咽癌等。头颈部鳞癌较常侵及颅颌面骨，在行手术切除时常需扩大切除，手术难度大且风险高。且头颈部鳞癌颅骨侵犯的发生和发展机制尚不清楚，是肿瘤研究领域亟需解决的关键问题之一。
2、动物模型是疾病研究和药物开发的工具之一。鳞癌骨侵犯动物模型对于研究头颈部鳞癌骨侵犯的生物学特性、骨侵犯的分子机制以及检验和改进骨侵犯治疗新方式具有重要意义。近年来，已被报道并广泛应用的肿瘤骨侵犯动物模型皆关注发生于肺部、食管和四肢的肿瘤侵犯长骨的情形，多以四肢骨为靶器官。由于头颈部鳞癌具有较独特的生物学行为特点，且颅颌面骨的发育和稳态与长骨等软骨化骨不同，颅颌面骨的特点是膜内骨化为主，现有的肿瘤骨侵犯动物模型并不能完全适用于头颈部鳞癌侵犯颅颌面骨等膜内骨化形成的骨，甚至可能截然相反。因此，本领域亟需开发一种头颈部鳞癌骨侵犯模型，为头颈部鳞癌的临床诊疗和研究提供新工具。
技术实现思路b>
1、本专利技术的目的在于提供一种构建头颈部鳞癌骨侵犯模型的方法，为头颈部鳞癌的临床诊疗和研究提供新工具。
2、为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
3、本专利技术提供了一种头颈鳞癌骨侵犯鼠模型的建造方法，包括以下步骤：
4、(1)制备头颈鳞癌scc-vii-gfp肿瘤细胞悬液；
5、(2)将步骤(1)所述头颈鳞癌scc-vii-gfp肿瘤细胞悬液紧贴骨面注射于小鼠颅骨外膜下或颌骨骨外膜下。
6、优选地，所述头颈鳞癌scc-vii-gfp肿瘤细胞悬液由scc-vii-gfp单细胞悬液与基质胶按照体积比2～7:3～8组成。
7、更优选地，所述头颈鳞癌scc-vii-gfp肿瘤细胞悬液由scc-vii-gfp单细胞悬液与基质胶按照体积比1:1组成。
8、优选地，所述scc-vii-gfp单细胞悬液的制备方法为：将ssc-vii小鼠鳞癌细胞株稳转绿色荧光蛋白gfp得到稳定表达gfp的ssc-vii单克隆株scc-vii-gfp，将scc-vii-gfp置于pbs液中，调整细胞浓度为(0.8～1.2)×107/ml得到单细胞悬液。
9、优选地，所述头颈鳞癌scc-vii-gfp肿瘤细胞悬液的注入量为150～250μl/只小鼠。
10、优选地，所述小鼠为c3h品系小鼠。
11、优选地，步骤(2)所述颅骨外膜为小鼠正中矢状缝处的颅骨外膜。
12、本专利技术还提供了由上述的建造方法构建的头颈鳞癌骨侵犯鼠模型在研究头颈部鳞癌侵犯颅骨、颌骨中的应用。
13、有益效果
14、本专利技术阐述了一种建立头颈部鳞状细胞癌(鳞癌)骨侵犯小鼠模型的实验方法，通过将小鼠鳞癌细胞株scc-vii-gfp的细胞悬液经骨膜下原位注射至c3h小鼠颅顶骨矢状缝处，模拟头颈部鳞癌的快速生长及侵犯颅颌面骨等生物学行为，并借助组织学和影像学评估，确定了不同时间点鳞癌和受侵犯颅顶骨的具体特征。本专利技术建立的小鼠头颈部鳞癌侵犯颅顶骨的模型，具有稳定性和均一性，造模成功率约为100％，为头颈部鳞癌侵犯颅颌面骨的基础研究和临床诊治提供新的实验工具。有利于探究头颈部鳞癌骨侵犯的分子机制、头颈部鳞癌骨侵犯新药的研发以及肿瘤学、骨科学或口腔科学的教学。
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1.一种头颈鳞癌骨侵犯鼠模型的建造方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述建造方法，其特征在于，所述头颈鳞癌SCC-VII-GFP肿瘤细胞悬液由SCC-VII-GFP单细胞悬液与基质胶按照体积比2～7:3～8组成。
3.如权利要求2所述建造方法，其特征在于，所述头颈鳞癌SCC-VII-GFP肿瘤细胞悬液由SCC-VII-GFP单细胞悬液与基质胶按照体积比1:1组成。
4.如权利要求3所述建造方法，其特征在于，所述SCC-VII-GFP单细胞悬液的制备方法为：将小鼠鳞癌SSC-VII细胞株稳转绿色荧光蛋白GFP得到稳定表达GFP的SSC-VII单克隆株SCC-VII-GFP，将SCC-VII-GFP置于PBS液中，调整细胞浓度为(0.8～1.2)×107/mL得到单细胞悬液。
5.如权利要求4所述建造方法，其特征在于，所述头颈鳞癌SCC-VII-GFP肿瘤细胞悬液的注入量为150～250μL/只小鼠。
6.如权利要求5所述建造方法，其特征在于，所述小鼠为C3H品系小鼠。
7.如权利要求6所述建造方
8.权利要求1～7任一项所述的建造方法构建的头颈鳞癌骨侵犯鼠模型在研究头颈部鳞癌侵犯颅骨或颌骨中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种头颈鳞癌骨侵犯鼠模型的建造方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.如权利要求1所述建造方法，其特征在于，所述头颈鳞癌scc-vii-gfp肿瘤细胞悬液由scc-vii-gfp单细胞悬液与基质胶按照体积比2～7:3～8组成。
3.如权利要求2所述建造方法，其特征在于，所述头颈鳞癌scc-vii-gfp肿瘤细胞悬液由scc-vii-gfp单细胞悬液与基质胶按照体积比1:1组成。
4.如权利要求3所述建造方法，其特征在于，所述scc-vii-gfp单细胞悬液的制备方法为：将小鼠鳞癌ssc-vii细胞株稳转绿色荧光蛋白gfp得到稳定表达gfp的ssc...
【专利技术属性】
技术研发人员：汉镇源，郭传瑸，赵凌云，王琳，谢文升，田臻，王逸飞，
申请(专利权)人：北京大学口腔医学院，
类型：发明
国别省市：
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