基于流感病毒骨架的SARS-CoV-2嵌合病毒样颗粒及构建方法技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及基于流感病毒骨架的SARS‑CoV‑2嵌合病毒样颗粒及构建方法。该方法中S蛋白融合基因序列包括用于编码SARS‑CoV‑2S蛋白胞外域的基因序列，以及在其后依次连接的用于编码T4噬菌体纤维蛋白的基因序列和用于编码流感病毒的HA蛋白TM/CT区的基因序列。该方法采用构建的融合S蛋白与流感病毒M1片段构建重组载体，利用昆虫细胞‑杆状病毒表达系统构建以流感病毒M1蛋白为骨架、表面可呈现稳定S蛋白三聚体的，与ACE2受体蛋白高效结合的SARS‑CoV‑2嵌合病毒样颗粒，为研发安全、有效的SARS‑CoV‑2VLPs疫苗奠定理论和实践基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，具体而言，涉及基于流感病毒骨架的sars-cov-2嵌合病毒样颗粒及构建方法。

技术介绍

1、sars-cov-2有可能成为一种季节性流行疾病，与人类相伴共生。因此，研发安全性、有效、易更新的sars-cov-2疫苗至关重要。

2、病毒样颗粒(virus-like particles，vlps)疫苗是一种由载体骨架和病毒表面蛋白自组装而成的特殊亚单位疫苗，其具有类似于活病毒颗粒的空间构象和表面抗原，且不含病毒核酸，因此具有安全性高和免疫原性强的特点，是一种非常有前景的sars-cov-2候选疫苗。尽管既往研究已表明冠状病毒可利用自身结构蛋白进行自组装成vlps并能诱导一定的保护性免疫，但这种基于自身骨架构建的vlps疫苗的稳定性和免疫效力均欠佳，且在多种真核表达系统中的蛋白表达和vlps组装效率均不高，导致制备的vlps疫苗需以较大剂量(100μg以上)免疫动物，诱导的中和抗体效价均较低。

3、另外，sars-cov-2表面暴露的刺突糖蛋白(spike，s)，含有病毒受体结合位点，是疫苗设计的关键抗原靶点，常本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于构建SARS-CoV-2嵌合病毒样颗粒的S蛋白融合基因序列，其特征在于，所述S蛋白融合基因序列包括用于编码SARS-CoV-2S蛋白胞外域的基因序列，以及在其后依次连接的用于编码T4噬菌体纤维蛋白的基因序列和用于编码流感病毒的HA蛋白TM/CT区的基因序列。

2.根据权利要求1所述的S蛋白融合基因序列，其特征在于，所述S蛋白融合基因序列包括用于编码SARS-CoV-2S蛋白胞外域第1-1212位氨基酸的基因序列、用于编码T4噬菌体纤维蛋白第458-484位氨基酸的基因序列、用于编码流感病毒H5N1的HA蛋白TM/CT区第531-568位氨基酸的基因序列。

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【技术特征摘要】

1.一种用于构建sars-cov-2嵌合病毒样颗粒的s蛋白融合基因序列，其特征在于，所述s蛋白融合基因序列包括用于编码sars-cov-2s蛋白胞外域的基因序列，以及在其后依次连接的用于编码t4噬菌体纤维蛋白的基因序列和用于编码流感病毒的ha蛋白tm/ct区的基因序列。

2.根据权利要求1所述的s蛋白融合基因序列，其特征在于，所述s蛋白融合基因序列包括用于编码sars-cov-2s蛋白胞外域第1-1212位氨基酸的基因序列、用于编码t4噬菌体纤维蛋白第458-484位氨基酸的基因序列、用于编码流感病毒h5n1的ha蛋白tm/ct区第531-568位氨基酸的基因序列。

3.一种用于构建sars-cov-2嵌合病毒样颗粒的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒包括如权利要求1或2所述的s蛋白融合基因序列，以及用于编码流感病毒m1蛋白的基因序列。

4.根据权利要求3所述的重组质粒，其特征在于，所述用于编码流感病毒m1蛋白的基因序列为用于编码流感病毒m1蛋白第1-252位氨基酸的基因序列。

5.一种用于构建sars-cov-2嵌合病毒样颗粒的重组杆状病毒，其特征在于，所述重组杆状病毒通过将权利要求3或4所述的重组质粒与杆状病毒dna共转染至sf9昆虫细胞中构建得到。

【专利技术属性】
技术研发人员：刘洪波，何韵怡，刘启亮，甘燕媚，王婧，瞿颖，马俊奇，
申请(专利权)人：桂林医学院附属医院，
类型：发明
国别省市：