塔玛亚历山大藻RPA检测试剂盒和RPA-LFD检测系统及检测方法技术方案

本发明专利技术提供了塔玛亚历山大藻RPA检测试剂盒和RPA‑LFD检测系统及检测方法。检测中所用的上游引物和下游引物的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；探针序列如SEQ ID NO.3所示，其中插入有四氢呋喃。本发明专利技术进一步提供了一种塔玛亚历山大藻RPA检测试剂盒以及含有该检测试剂盒的塔玛亚历山大藻RPA‑LFD检测系统，还提供了相应的检测方法。本发明专利技术检测方法可用于快速、特异性检测环境中的塔玛亚历山大藻，该方法操作简便，灵敏度和特异性高，反应时间短，配套设备小巧且易于携带，检测方法的灵敏度高，是现场快速检测塔玛亚历山大藻的理想选择。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，涉及入侵生物检测，具体涉及入侵生物的快速检测，尤其涉及一种基于rpa-lfd技术的用于快速检测塔玛亚历山大藻(alexandrium tamarense)的引物对、探针、试剂盒及检测方法。

技术介绍

1、塔玛亚历山大藻(alexandrium tamarense)隶属甲藻门，横裂甲藻纲，屋甲藻科，亚历山大藻属。该种是引发世界沿海水域有害藻华(harmful algal bloom,hab)的主要优势甲藻之一，也是有毒亚历山大藻属中麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish toxins,pst)的主要产毒种，毒素通过食物链传递后在贝类、鱼类等生物体内大量蓄积，对海洋环境、经济社会和人类健康造成严重损害。世界范围内，有害藻华的分布区域、发生频率和暴发规模等表现出明显上升趋势，其主要原因之一在于船舶压舱水等造成的有害藻华种扩散，巨量的压舱水及其沉积物的排放给外来微藻的入侵提供了极大的便利。大量研究表明，船舶压舱水中亚历山大藻属中如塔玛亚历山大藻等有毒种分布广泛，为其入侵传播带来极大风险。因此，急需建立一种在航运等野外场景中，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种塔玛亚历山大藻RPA检测用探针引物组合物，其特征在于，上游引物和下游引物的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示；探针序列如SEQ ID NO.3所示，其中插入有四氢呋喃THF，且探针的5’端距离THF≥27-30bp，探针的3’端距离THF≥15bp。

2.根据权利要求1所述的塔玛亚历山大藻RPA检测用探针引物组合物，其特征在于，探针序列中第30位和第31位碱基之间插入设置四氢呋喃。

3.根据权利要求1所述的塔玛亚历山大藻RPA检测用探针引物组合物，其特征在于，所述探针的5'端设置生物素标签，3'端设置C3阻滞位点。

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【技术特征摘要】

1.一种塔玛亚历山大藻rpa检测用探针引物组合物，其特征在于，上游引物和下游引物的序列分别如seq id no.1和seq id no.2所示；探针序列如seq id no.3所示，其中插入有四氢呋喃thf，且探针的5’端距离thf≥27-30bp，探针的3’端距离thf≥15bp。

2.根据权利要求1所述的塔玛亚历山大藻rpa检测用探针引物组合物，其特征在于，探针序列中第30位和第31位碱基之间插入设置四氢呋喃。

3.根据权利要求1所述的塔玛亚历山大藻rpa检测用探针引物组合物，其特征在于，所述探针的5'端设置生物素标签，3'端设置c3阻滞位点。

4.一种塔玛亚历山大藻rpa检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1～3任一项所述的探针引物组合物。

5.根据权利要求4所述的塔玛亚历山大藻rpa检测试剂盒，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：康伟，李楠楠，高倩，张海燕，李新苍，王翠华，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院东海水产研究所，
类型：发明
国别省市：