高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用技术

技术编号:42676339 阅读:109 留言:0更新日期:2024-09-10 12:28
本发明专利技术提供高产γ‑癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用,属于生物工程领域。所述重组解脂耶氏酵母菌,在解脂耶氏酵母基因组中敲除酰基辅酶A氧化酶3、酰基辅酶A氧化酶4、酰基辅酶A氧化酶5,插入细胞外脂肪酶2表达盒、多拷贝酰基辅酶A氧化酶2表达盒、长链脂肪酰辅酶A合成酶1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白2表达盒和异源醇酰基转移酶1表达盒后得到的。本发明专利技术重组解脂耶氏酵母菌能够高效合成γ‑癸内酯。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程领域,尤其涉及高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用


技术介绍

1、γ-癸内酯(γ-decalactone),又名丙位癸内酯,是一种含有五元内酯环的芳香化合物,分子式为c10h18o2,分子量为170.25,其常压下沸点为281℃。它具有浓郁的桃香和椰子香,存在于多种水果和乳制品中,是国际公认安全的食品添加剂和药品添加剂。因其具有诱人香味和低香气阈值的特性,在香料工业得到了广泛的应用,每年都有数百吨的市场销量。

2、最初,γ-癸内酯是直接来源于植物或采用化学方法合成的。植物中γ-癸内酯含量很少,而且大多以结合态存在,因此,通过植物法提取天然γ-癸内酯产量很低且价格昂贵;而化学方法合成的γ-癸内酯作为添加剂在食品和药品中安全性较低。采用生物法生产的γ-癸内酯,安全性高,但是,现有技术中缺乏高产γ-癸内酯的微生物。


技术实现思路

1、本专利技术的目的是提供一种能够高效合成γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌。

2、本专利技术再一目的是提供所述重组解脂耶氏酵母本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一株高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于是在解脂耶氏酵母基因组中敲除酰基辅酶A氧化酶3、酰基辅酶A氧化酶4、酰基辅酶A氧化酶5,插入细胞外脂肪酶2表达盒、多拷贝酰基辅酶A氧化酶2表达盒、长链脂肪酰辅酶A合成酶1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白2表达盒和异源醇酰基转移酶1表达盒后得到的。

2.根据权利要求1所述高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于所述酰基辅酶A氧化酶2、细胞外脂肪酶2、长链脂肪酰辅酶A合成酶1、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白1、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白2编码基因来源于解脂耶氏酵母(Yar...

【技术特征摘要】

1.一株高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于是在解脂耶氏酵母基因组中敲除酰基辅酶a氧化酶3、酰基辅酶a氧化酶4、酰基辅酶a氧化酶5,插入细胞外脂肪酶2表达盒、多拷贝酰基辅酶a氧化酶2表达盒、长链脂肪酰辅酶a合成酶1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶a转运蛋白1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶a转运蛋白2表达盒和异源醇酰基转移酶1表达盒后得到的。

2.根据权利要求1所述高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于所述酰基辅酶a氧化酶2、细胞外脂肪酶2、长链脂肪酰辅酶a合成酶1、过氧化物酶体酰基辅酶a转运蛋白1、过氧化物酶体酰基辅酶a转运蛋白2编码基因来源于解脂耶氏酵母(yarrowialipolytica);异源醇酰基转移酶1编码基因是将来源于桃子(prunuspersica)的醇酰基转移酶1编码基因经密码子优化后所得。

3.根据权利要求2所述高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于所述各表达盒的启动子为解脂耶氏酵母的启动子ptef、php4d、ptefin、pyat1、pfba、pfbain、ppox2、ppot1或pgpdin中的任意一种;所述终止子为解脂耶氏酵母的终止子txpr2t、tmig1t、tlip2t、tcyc1t、tpex3t、tpex10t或tpex20t中的任意一种。

4.根据权利要求3所述高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于所述表达盒的整合位点为解脂耶氏酵母的a08位点、26s rdna位点、int...

【专利技术属性】
技术研发人员:纪晓俊余一梓林璐黄和
申请(专利权)人:南京工业大学
类型:发明
国别省市:

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