【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程领域,尤其涉及高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌及其构建方法和应用。
技术介绍
1、γ-癸内酯(γ-decalactone),又名丙位癸内酯,是一种含有五元内酯环的芳香化合物,分子式为c10h18o2,分子量为170.25,其常压下沸点为281℃。它具有浓郁的桃香和椰子香,存在于多种水果和乳制品中,是国际公认安全的食品添加剂和药品添加剂。因其具有诱人香味和低香气阈值的特性,在香料工业得到了广泛的应用,每年都有数百吨的市场销量。
2、最初,γ-癸内酯是直接来源于植物或采用化学方法合成的。植物中γ-癸内酯含量很少,而且大多以结合态存在,因此,通过植物法提取天然γ-癸内酯产量很低且价格昂贵;而化学方法合成的γ-癸内酯作为添加剂在食品和药品中安全性较低。采用生物法生产的γ-癸内酯,安全性高,但是,现有技术中缺乏高产γ-癸内酯的微生物。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种能够高效合成γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌。
2、本专利技术再一目的是提供
...【技术保护点】
1.一株高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于是在解脂耶氏酵母基因组中敲除酰基辅酶A氧化酶3、酰基辅酶A氧化酶4、酰基辅酶A氧化酶5,插入细胞外脂肪酶2表达盒、多拷贝酰基辅酶A氧化酶2表达盒、长链脂肪酰辅酶A合成酶1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白2表达盒和异源醇酰基转移酶1表达盒后得到的。
2.根据权利要求1所述高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于所述酰基辅酶A氧化酶2、细胞外脂肪酶2、长链脂肪酰辅酶A合成酶1、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白1、过氧化物酶体酰基辅酶A转运蛋白2编码基因来源于
...【技术特征摘要】
1.一株高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于是在解脂耶氏酵母基因组中敲除酰基辅酶a氧化酶3、酰基辅酶a氧化酶4、酰基辅酶a氧化酶5,插入细胞外脂肪酶2表达盒、多拷贝酰基辅酶a氧化酶2表达盒、长链脂肪酰辅酶a合成酶1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶a转运蛋白1表达盒、过氧化物酶体酰基辅酶a转运蛋白2表达盒和异源醇酰基转移酶1表达盒后得到的。
2.根据权利要求1所述高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于所述酰基辅酶a氧化酶2、细胞外脂肪酶2、长链脂肪酰辅酶a合成酶1、过氧化物酶体酰基辅酶a转运蛋白1、过氧化物酶体酰基辅酶a转运蛋白2编码基因来源于解脂耶氏酵母(yarrowialipolytica);异源醇酰基转移酶1编码基因是将来源于桃子(prunuspersica)的醇酰基转移酶1编码基因经密码子优化后所得。
3.根据权利要求2所述高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于所述各表达盒的启动子为解脂耶氏酵母的启动子ptef、php4d、ptefin、pyat1、pfba、pfbain、ppox2、ppot1或pgpdin中的任意一种;所述终止子为解脂耶氏酵母的终止子txpr2t、tmig1t、tlip2t、tcyc1t、tpex3t、tpex10t或tpex20t中的任意一种。
4.根据权利要求3所述高产γ-癸内酯的重组解脂耶氏酵母菌,其特征在于所述表达盒的整合位点为解脂耶氏酵母的a08位点、26s rdna位点、int...
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