制备富含羟基积雪草苷和特米诺苷的积雪草酸提取物的方法技术

一种制备包含羟基积雪草苷、特米诺苷和积雪草皂苷的混和物的积雪草酸提取物的方法，其特征在于包括以下步骤：　　　　ａ）．通过醇性溶剂提取积雪草酸的地上部分；　　　　ｂ）．将步骤ａ）得到的醇溶液通过阴离子树脂；　　　　ｃ）．将步骤ｂ）得到的洗脱液通过液／液提取进行选择性脱脂；　　　　ｄ）．浓缩脱脂的水－醇相，并连续过滤得到水相；　　　　ｅ）．步骤ｄ）得到的水相连续通过阳离子树脂，并随后通过阴离子树脂；　　　　ｆ）．通过加入醇稳定步骤ｅ）得到的水相，并得到包含羟基积雪草苷、特米诺苷和积雪草皂苷的混和物。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种制备包含羟基积雪草苷(madecassoside)和特米诺苷(terminoloside)的混和物的提取物，并在适当的情况下还含有积雪草皂苷(asiaticoside)，还涉及制备包含超过相对于提取物总重量的75wt％的羟基积雪草苷、特米诺苷和积雪草皂苷的混和物的积雪草酸提取物的方法，以及制备包含超过相对于提取物总重量的95wt％的羟基积雪草苷、特米诺苷的混和物的积雪草酸提取物的方法，本专利技术还涉及它们在调节炎性机制方面的应用。积雪草酸(centella asiatical)，又称作紫箩(Violette marronne)(联合岛)，购土可乐(Gotu Kola)，或者印度石莲花(印度)，或者积雪草R.(Centella repanda)(北美)，以及他乐婆(Talapetraka)(马达加斯加)，是一种多形态的草药，生长在海拔600米的潮湿阴暗的野外地区。积雪草酸属于伞形科族(Apiaceae)，特别属于天胡妥(Hydrocotyle)亚科。积雪草相当于植物属的名称，积雪草酸则相当于种的名称。积雪草酸包括三个种，分别为典型，阿比氏型和弗罗里达型(Typica、Abyssinica和Flolidana)。积雪草酸已是公知的物质，并在马达加斯加、印度、中国、北美印第安和印尼作为药用已有3000年的历史。其在不同的国家，药用也不尽相同。其特别在伤口愈合、镇静、止痛、抗抑郁、抗病毒和抗微生物方面有益处。其通常可以局部应用或口服。奇怪的是，积雪草酸在现代西药中的应用较晚，直至1884年方有记载，在1941年才生产出第一种干提取物。积雪草酸的活性成分是五环三萜物质，以苷的形式存在；它们是积雪草酸(通式I)和羟基积雪草酸(通式II)，以及葡萄糖苷形式；它们是积雪草皂苷(通式III)和羟基积雪草苷(通式IV)。 积雪草皂苷、羟基积雪草苷、积雪草酸和羟基积雪草酸分子形成植物的天然防御。为了能够更好地工业利用积雪草的活性成分，有必要收集天然状态的植物，并需要一定的自然压力，以获得较高的三萜含量。积雪草酸葡萄糖苷，羟基积雪草苷，以及积雪草皂苷，都是含糖的复合物，其构成植物的羟基积雪草酸和积雪草酸的贮存形式，需在潮湿的季节才能生成。细菌、酵母或真菌等侵袭植物，激活配体释放水解酶。三萜分子由于能够调节及活化胶原的合成而特别有用。从积雪草酸中提取的苷及糖苷特别能够促进胶原1和3的合成。这些活性剂可用于医药领域，主要是促进伤口愈合及治疗静脉机能不全。它们还可以用于化妆品领域，主要是作为抗皱和抗蜂窝组织剂应用。在先前技术中通常使用的积雪草酸的活性剂是积雪草酸和羟基积雪草酸，还可以是积雪草皂苷。由于羟基积雪草苷具有高水溶性，其通常在常规的提取脂溶性活性剂的方法中随水洗液流出。先前技术的方法可以得到羟基积雪草苷和积雪草皂苷的混和物。该混和物包括相对于混和物总重量的大约25wt％的积雪草皂苷，60wt％的羟基积雪草苷和15wt％的副产物，主要由脂肪酸和糖苷组成。先前技术的其它方法也可以得到纯度为相对于混和物总重量的81wt％的羟基积雪草苷，所述提取物还包括羟基积雪草苷的异构体，脂肪酸，主要是亚油酸、亚麻酸、棕榈酸或油酸，以及糖，例如糖苷。令人惊奇的是，本申请人开发出了一种新的提取方法，可以得到羟基积雪草苷、积雪草皂苷和一种新的分子的混和物，该分子称为特米诺苷，所述混和物具有超过相对于混和物总重量的75wt％的纯度，并可得到超过相对混合物种总重量95wt％的羟基积雪草苷和特米诺苷的混和物。类似地，申请人还发现了包含羟基积雪草苷、特米诺苷和适当的积雪草皂苷混和物的积雪草酸提取物。令人惊奇的是，本申请人还发现从积雪草酸地面部分提取的羟基积雪草苷和特米诺苷混和物可以用于调节炎症机制的药物中。另外，从积雪草酸地面部分提取的羟基积雪苷、特米诺苷和积雪草皂苷的混和物还可以用于预防和延迟皮肤过早老化的化妆品组合物中。在本专利技术中，术语“特米诺苷”是指化学结构分子命名为1--O-β-D-吡喃葡萄糖2α，3β，6β，23-四羟基油酰-12-基-28-酸酯，结构式如通式V所述 该分子拥有与羟基积雪草苷相同的糖的部分，也就是说，拥有葡萄糖-葡萄糖-鼠李糖。特米诺苷萜环的结构相当于特米诺酸(terminolicacid)的萜环，其结构如下式的VI 特米诺苷是羟基积雪草苷的位置异构体。先前技术中从未分离出该分子。另外，也从来没有提到过特米诺苷能够从积雪草酸中提取，并且，也没有抑制的从积雪草酸中提取特米诺苷的方法。还可以设想存在有检测不到的积雪草皂苷的异构体。因此，在本专利技术中，术语“积雪草皂苷”指的是如通式III所述的分子，如果存在的话，可能有包括一种异构体的混和物。在本专利技术中，术语“二元混和物”指的是主要包括羟基积雪草苷和特米诺苷的混和物，此混合物实际上不含有积雪草皂苷，术语“三元混和物”指的是主要包括羟基积雪草苷、特米诺苷和积雪草皂苷的混和物。本专利技术的主旨是涉及一种制备包含羟基积雪草苷、特米诺苷和积雪草皂苷的混和物的提取物的方法，其特征在于包括如下步骤a).通过醇性溶剂提取地上部分的积雪草酸；b).将步骤a)得到的醇溶液通过阴离子树脂；c).步骤b)的洗脱液通过液/液提取进行选择性脱脂；d).浓缩脱脂的水-醇相，并连续过滤得到水相；e).步骤d)得到的水相连续通过阳离子树脂，并随后通过阴离子树脂；f).通过加入醇稳定步骤e)得到的水相，并得到包含羟基积雪草苷、特米诺苷和积雪草皂苷的混和物。本专利技术的主旨还涉及一种制备包含羟基积雪草苷和特米诺苷的混和物的提取物的方法，其特征在于包括如下步骤a).通过醇性溶剂提取地上部分的积雪草酸；b).将步骤a)得到的醇溶液通过阴离子树脂；c).步骤b)的洗脱液通过液/液提取进行选择性脱脂；d).浓缩脱脂的水-醇相，并连续过滤得到水相；e).步骤d)得到的水相连续通过阳离子树脂，并随后通过阴离子树脂；f).通过加入醇稳定步骤e)得到的水相；g).预纯化的步骤f)得到的水-醇相进行选择性色谱分离；并h).回收包含羟基积雪草苷和特米诺苷的混和物，得到其最终形式。积雪草酸植物的活性成分的提取优选用其植物的地上部分进行，目的主要是不破坏植物的根部，是保持此种植物可自然更新。根据本专利技术的一个优选可变化的方法为，植物的地上部分在提取步骤前浸渍于醇性溶剂中。能够用于本专利技术的醇性溶剂是那些本领域技术人员所使用的常规的溶剂，如乙醇，特别是70％的乙醇。所得的醇性溶液随即通过阴离子树脂纯化(步骤b)。本专利技术所用的阴离子树脂优选是具有季铵型官能基团的强阴离子树脂。醇溶液通过阴离子树脂可捕获阴离子型的副产物，特别是酚类物质。根据本专利技术一个优选可变化的方法，步骤a)得到的醇性溶液在通过阴离子树脂前进行澄清处理。优选的澄清步骤包括在所述溶液中加入强碱溶液，如氢氧化钠溶液及活性炭。加入强碱形成沉啶，过滤除去可与强碱反应的金属和一些其它物质。而活性炭通过纯化可以使醇溶液脱色，并可固着脂肪酸或氧化产物。继由通过树脂组成的步骤b)之后，优选是在此之前进行澄清步骤，得到的洗脱液纯化去除脂肪部分。为此，需经液/液提取过程。所用的提取溶剂是非极性溶剂，优选是链烷烃，如庚烷。任何本领域技术人员已知的液/液提取方法都可以用于本专利技术的方法之本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：A·卢瓦索，G·塞内，E·特龙，
申请(专利权)人：拜尔消费者保健股份公司，
类型：发明
国别省市：