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植物促生菌、含有植物促生菌的微生物制剂及其制备方法技术

技术编号:4264638 阅读:226 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供了一种植物促生菌和含有该植物促生菌的生物制剂,以及上述菌种和生物制剂的制备方法;该生物制剂含有复合载体材料和菌液,复合载体材料包括有机质、腐殖酸、腐熟有机质、络合置换剂、包埋材料,菌液为含有植物促生菌UW4的溶液,复合载体材料加菌液使植物促生菌的菌数达到至少1亿/每克复合载体材料,得到该生物制剂;该生物制剂用于农业生产可以促进植物生长,提高产量,提高肥效和提高植物的抗逆能力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术关于一种微生物肥料,具体地说是一种植物促生菌以及微生物制剂, 尤其是含有多功能植物促生菌成分的生物制剂。體絲微生物肥料是指一类含有活微生物的特定制剂,应用于农业生产中能够获 得特定的肥料效应。微生物肥料可分为两类, 一类是通过其中所含微生物的生命 活动,增加了植物营养元素的供应量,改善植物的营养状况,进而增加产量,代表品种是菌肥;另一类是广义的微生物肥料,其制品虽然也是通过其中所含的 微生物生命活动作用使作物增产,但它不仅仅限于提高植物营养元素的供应水 平,还包括了它们所产生的次生代谢物质,如激素类物质对植物的刺激作用, 促进植物对营养元素的吸收利用,或者能够拮抗某些病原微生物的致病作用, 减轻病虫害而使作物的产量增加。微生物肥料的种类很多,如果按其制品中特定的微生物种类可分为细菌肥 料(如根瘤菌肥、固氮菌肥)、放线菌肥(如抗生菌类、5406)、真菌类肥料(如菌根 真菌)等;按其作用机理又可分为根瘤菌肥料、固氮菌肥料、解磷菌类肥料、解 钾菌类肥料等;按其制品中微生物的种类又可分为单纯的微生物肥料和复合微 生物肥料。微生物肥料的功效主要是与营养元素的来源和有效性有关,或与作物吸收 营养、水分和抗病有关,概括起来有以下几个方面l.增加土壤肥力,这是微生 物肥料的主要功效之一如各种自生、联合、共生的固氮微生物肥料,可以增加土壤中的氮素来源,多种解磷、解钾微生物的应用,可以将土壤中难溶的磷、钾分 解出来,从而能为作物吸收利用。2.产生植物激素类物质刺激作物生长,许多用 作微生物肥料的微生物可产生植物激素类物质,能刺激和调节作物生长,使植 物生长健壮,营养状况得到改善。3.对有害微生物的生物防治作用由于在作物根 部接种微生物肥料,微生物在作物根部大量生长繁殖,作为作物根际的优势菌, 限制了其它病原微生物的繁殖机会。同时有的微生物对病原微生物还具有拮抗 作用,起到了减轻作物病害的功效。我国微生物肥料的研究、应用和国际上一样,是从豆科植物上应用根瘤菌接种剂开始的,起初只有大豆和花生根瘤菌剂。2 0世纪50年代,从原苏联引 进自生固氮菌、磷细菌和硅酸盐细菌剂,称为细菌肥料;20世纪6 0年代又推广 使用放线菌制成的5406抗生菌肥料和固氮蓝绿藻肥;20世纪70 80年代中期, 又开始研究VA菌根,以改善植物磷素营养条件和提高水分利用率;20世纪80 年代中期至90年代,农业生产中又相继应用联合固氮菌和生物钾肥作为拌种剂; 近几年来又推广应用由固氮菌、磷细菌、钾细菌和有机肥复合制成的生物肥料 做基肥施用。由此可见,我国微生物肥料种类很多,主要有以下种类根瘤菌 肥料、固氮菌肥料、解磷细菌肥料、硅酸盐细菌肥料、增产菌肥料、复合微生 物肥料。综上所述,在农业生产中,仍然需要开发出同时可以促进植物生长,提高 肥效和提高植物的抗逆能力如抗干旱、盐碱、药残(主要针对土壤沙漠化、盐碱 化以及农药残留污染的生物治理和生态修复)能力的优质高效的微生物制剂。
技术实现思路
本专利技术以植物促生菌为主要功能成分,研发出一种植物促生菌和含有该植 物促生菌的微生物制剂(也可称为生物制剂),该植物促生菌为尸wAmoww p幼'^ UW4,该生物制剂为一种利用优筛训化多功能植物促生菌UW4生产的生 物制剂,用于农业生产可以促进植物生长,提高产量,提高肥效,提高植物的抗逆能力。本专利技术的目的在于提供了植物促生菌尸sefifowow UW4,该促生菌可以促进植物吸收营养、调节植物生长以及增强植物根系对营养及空间的竞争。本专利技术的目的还在于提供一种含有植物促生菌的生物制剂,该生物制剂主 要用于农业,可以达到促进植物生长,提高产量,提高肥效,节省肥料和提高 植物的抗逆能力的效果。本专利技术的目的还在于提供一种植物促生菌UW4的获得方法,通过该方法可以得到促进植物吸收营养的植物促生菌。本专利技术的目的还在于提供一种制备含有植物促生菌的生物制剂的方法,采 用该方法生产的生物制剂可以达到促进植物生长,提高产量,提高肥效,节省 肥料和提高植物的抗逆能力的效果。本专利技术的目的还在于提供一种含有植物促生菌的生物制剂在农业上促进植 物生长方面的应用。为了达到上述目的和效果,本专利技术提供了一种植物促生菌/^eAmom /^^foUW4,在美国农业研究菌种保藏中心保藏,保藏编号为NRRLB-50193, 保藏日为2008年6月9曰。该促生菌具有促进作物生长,提高作物营养,增加肥料效果,可以提高抗 旱、涝,抗盐碱能力,是促进作物根际解毒微生物生长的多功能菌菌种。美国农业研究菌种保藏中心位于伊利诺伊州皮契里亚,是由美国农业部农 业研究中心支持的政府性质的菌种保藏中心。主要从事农业、应用微生物、基 因工程、工业微生物、菌种保藏方法、环境保护、分子生物学、食品安全、普 通微生物、分类学的研究。该中心保藏有细菌10500株,真菌45000株,酵母 14500株,放线菌9500株。另外,该中心还提供细菌、真菌、酵母的鉴定服务。 美国农业研究菌种保藏中心英文全称Agricultural Research Service Culture Collection,简称NRRL。本专利技术的提供的植物促生菌UW4已经保藏在美国农业硏究菌种保藏中心,8保藏编号为NRRL B-50193,保藏日为2008年6月9日;其拉丁名为尸sei^owoos / i^zWaUW4,为i^et^fowowos pwfz'c^菌种的小禾中UW4。本专利技术的植物促生菌UW4与植物根际土壤中其他菌的分离是基于UW4含 有ACC (l-氨基环丙烷-l-羧酸)脱氨酶,可利用ACC的氨基为氮源分离制备植 物促生菌UW4的选择性平板培养基。把含有土壤微生物的浸出液接种在选择性 平板培养基上,所生长的菌落,即为含有ACC脱氨酶的UW4,其具有对植物 的促生作用(Penrose & Glick, 2003 Physiologia Plantarum 118 pp 10-15)。该植物促生菌UW4的制备方法包括(1) .取l克植物根际土壤,浸入50mlPAF提取溶液中,再置入250ml容 器中;该PAF提取溶液为含有朊间质蛋白胨、干酪素水解物、MgS04 、 K2HP04 和甘油的组合物溶液;(2) .将上述含有50 ml PAF提取溶液的三角瓶在25 ^h2。C下震荡;(3) .取lml上述步骤(2)震荡后的PAF提取溶液,再溶入含有50ml PAF 提取溶液的250ml容器中,在25;fc2C下,震荡;(4) .取lml上述步骤(3)得到的PAF提取溶液,溶入含有50mlDF盐 溶液的250 ml容器中,在25;b2X:下震荡;该DF盐溶液为含有磷酸氢二钾、 磷酸氢二钠、硫酸镁、葡萄糖、葡糖酸、柠檬酸、硫酸亚铁、硼酸、硫酸锰、 硫酸铎、硫酸铜、三氧化钼和硫酸铵的溶液;(5) .取l ml上述步骤(4)得到的提取溶液,再溶入50ml不含硫酸铵但 含有3.0 mM l-氨基环丙烷-l-羧酸的上述DF盐溶液的容器中,在25力2C震荡;(6) .取0.01 ml上述步骤(5)得到的提取溶液,接入含有0.03mMACC的 DF盐的平板凝胶培养基上,在30去2'C培养2-4天;(7) .取步骤(6)的培养基上生长的菌落,其为植物促生菌/本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种植物促生菌,其为Pseudomonas putida UW4,在美国农业研究菌种保藏中心保藏,保藏编号为NRRLB-50193。

【技术特征摘要】
1. 一种植物促生菌,其为Pseudomonas putida UW4,在美国农业研究菌种保藏中心保藏,保藏编号为NRRLB-50193。2. 权利要求1所述的植物促生菌的制备方法,其中,该方法包括(1) .取l克植物根际土壤,浸入50mlPAF提取溶液中,再置入250ml容 器中;该PAF提取溶液为含有朊间质蛋白胨、干酪素水解物、MgS04 、 K2HP04 和甘油的组合物溶液;(2) .将上述含有50 ml PAF提取溶液的三角瓶在25玄2。C下震荡;(3) .取lml上述步骤(2)震荡后的PAF提取溶液,再溶入含有50ml PAF 提取溶液的250ml容器中,在25^fc2C下,震荡;(4) .取lml上述步骤(3)得到的PAF提取溶液,溶入含有50mlDF盐 溶液的250 ml容器中,在25f2'C下震荡;该DF盐溶液为含有磷酸氢二钾、 磷酸氢二钠、硫酸镁、葡萄糖、葡糖酸、柠檬酸、硫酸亚铁、硼酸、硫酸锰、 硫酸锌、硫酸铜、三氧化钼和硫酸铵的溶液;(5) .取l ml上述步骤(4)得到的提取溶液,再溶入50ml不含有硫酸铵 但含有3.0 mM l-氨基环丙烷-l-羧酸的上述DF盐溶液的容器中,在25 ;h2。C下 震荡;(6) .取0.01ml上述步骤(5)得到的提取溶液,接入含有0.03mMACC的 DF盐的平板凝胶培养基上,在30;fc2t:培养2-4天;(7) .取步骤(6)的培养基上生长的菌落,其为植物促生菌尸化Wo,w / m(^UW4的菌种;(8) .取上述步骤7得到的菌种,接种在胰蛋白胨大豆肉汤培养基中,在 25-C温度下培养震荡24小时,得到培养溶液;(9) .在4'C下离心步骤(8)的培养溶液;(10) .用DF液冲洗步骤(9)离心沉淀的细胞;该DF液的成分包括蔗糖、琥珀酸、EDTA 、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和氯化镁;(11) .在4。C下再离心步骤(10)得到的DF细胞溶液;(12) .用DF盐液溶解离心沉淀的细胞,加入3.0mM的ACC,得到含菌 细胞DF盐溶液;(13) .步骤(12)得到的含菌细胞DF盐溶液,在25去2C下培养、震荡;(14) .在4'C离心步骤(13)得到的DF培养溶液,得到离心沉淀的细胞;(15) .用10mlDF盐液溶解步骤(13)得到的离心沉淀的细胞得到含菌细 胞DF盐溶液;(16) .将步骤(15)得到的含菌细胞DF盐溶液于2坊2'C接种发酵,得到 工业发酵后的植物促生菌UW4的菌液;该植物促生菌UW4的菌液中UW4的 菌数达到20-30亿/ml。3. 权利要求l所述的植物促生菌在促进植物生长方面的应用。4. 一种含有权利要求1所述的植物促生菌的生物制剂,该生物制剂含有植 物促生菌的菌液和复合载体材料,其中,该植物促生菌的菌液为含有植物促生 菌尸化t^omowp^JaUW4的溶液,该复合载体材料包括有机质、腐殖酸、腐 熟有机质、络合置换剂、包埋材料,上述复合载体材料和菌液的比例为植物促 生菌UW4的菌数至少1亿/每克复合载体材料。5. 权利要求4所述的生物制剂,其中,所述的复合载体材料包括15 35% 的有机质、12...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄晓东
申请(专利权)人:黄晓东
类型:发明
国别省市:23[中国|黑龙江]

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