一种鹅肾脏类器官及其培养方法、应用技术

本发明专利技术涉及类器官培养技术领域，公开了一种鹅肾脏类器官的培养方法，该方法先取鹅胚，分离原代肾脏组织，一次清洗、破碎、消化、过滤、二次清洗，得到原代细胞，随后将原代细胞与基质胶混合、凝固，得到胶体混合物，随后置于含有鹅血清的培养液中培养至少10天，得到鹅肾脏类器官；其中，按每10<supgt;4</supgt;个原代细胞与70μL的基质胶混合、凝固，得到胶体混合物，通过上述设计本申请得到的鹅肾脏类器官为3D细胞培养系统，与体内来源的组织或器官高度相似，可复制出已分化组织的复杂空间形态，并能够表现出细胞与细胞、细胞与基质之间的相互作用，此外本申请还公开了一种鹅肾脏类器官及其应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及类器官培养，尤其涉及一种鹅肾脏类器官及其培养方法、应用。

技术介绍

1、新型鹅星状病毒（goose astrovirus，gastv）是近年来新发现的一种致雏鹅痛风且高度致死的禽星状病毒，感染主要造成雏鹅内脏器官表面和关节腔内产生大量的尿酸盐沉积，与痛风等代谢疾病息息相关的肾脏是gastv的主要靶器官之一。阐明gastv导致雏鹅痛风的致病机理显得尤为重要，以为该病的科学防控提供理论参考。然而，目前尚无理想的鹅肾细胞系，且缺乏能模拟体内肾脏组织高度复杂的结构和功能的体外研究模型，导致gastv感染与宿主相互作用的研究受到了极大的限制。

2、lmh细胞系作为目前最常用于gastv体外研究的细胞平台，其来源于鸡，与gastv宿主的物种并不相同，且gastv无法在lmh细胞中充分高效复制，因此更加无法模拟gastv感染鹅后产生的相关免疫和代谢应答反应。

3、鹅胚原代肾细胞（gek）虽然能够高效增殖gastv，但要想获得纯度较高的gek细胞难度往往较大。在制备好的原代细胞中，随着培养时间的延长，纤维细胞往往会成为优势生长细胞并逐本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种鹅肾脏类器官的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的鹅肾脏类器官的培养方法，其特征在于，所述步骤1中，鹅胚为至少达到25日龄的鹅胚。

3.根据权利要求1所述的鹅肾脏类器官的培养方法，其特征在于，所述步骤1中，鹅胚为至少达到28日龄的鹅胚。

4.根据权利要求1所述的鹅肾脏类器官的培养方法，其特征在于，所述含有鹅血清的培养液中，鹅血清的质量分数为2～15%。

5.根据权利要求1所述的鹅肾脏类器官的培养方法，其特征在于，所述含有鹅血清的培养液中，鹅血清的质量分数为6～15%。

6.根据权利要求1所述的鹅...

【技术特征摘要】

1.一种鹅肾脏类器官的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的鹅肾脏类器官的培养方法，其特征在于，所述步骤1中，鹅胚为至少达到25日龄的鹅胚。

3.根据权利要求1所述的鹅肾脏类器官的培养方法，其特征在于，所述步骤1中，鹅胚为至少达到28日龄的鹅胚。

4.根据权利要求1所述的鹅肾脏类器官的培养方法，其特征在于，所述含有鹅血清的培养液中，鹅血清的质量分数为2～15%。

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【专利技术属性】
技术研发人员：向勇，孙敏华，廖明，李林林，董嘉文，张俊勤，黄允真，
申请(专利权)人：广东省农业科学院动物卫生研究所，
类型：发明
国别省市：