一种磁性纳米颗粒固定化磷脂酶的制备方法技术

本发明专利技术一种磁性纳米颗粒固定化磷脂酶的制备方法，属于磁性材料固定化酶技术领域；该方法包括以下步骤：(1)Fe<subgt;3</subgt;O<subgt;4</subgt;@SiO<subgt;2</subgt;@CS‑COOH磁性纳米颗粒的制备；(2)活化Fe<subgt;3</subgt;O<subgt;4</subgt;@SiO<subgt;2</subgt;@CS‑COOH磁性纳米颗粒；(3)将磷脂酶酶液加入已活化的磁性纳米颗粒悬浮液中；(4)将悬浮液置于恒温水浴摇床中进行固定化反应；(5)将悬浮液磁分离，得到磁性固定化酶。本发明专利技术利用磁性纳米载体表面修饰方法，对酶分子进行固定化处理和分子化修饰，得到磁性固定化酶，可提高酶的重复利用次数，实现酶的高效利用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于磁性材料固定化酶，主要涉及一种磁性纳米颗粒固定化磷脂酶的制备方法。

技术介绍

1、酶具有高效、专一以及生物相容等特性，是食品生产、生物医药以及化学催化的首选材料。磷脂酶是一种脂解酶，可在特定的酯键上水解磷脂底物，在许多生理过程中发挥重要作用，包括磷脂代谢、信号转导、细胞周期进展和炎症反应。磷脂酶lm是磷脂酶a2的改性酶，具有较高的热稳定性，可以催化磷脂中sn-2酯键的水解，产生溶血磷脂酰胆碱酸和游离脂肪酸。磷脂酶3g是磷脂酶c、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶c以及极少量磷脂酶a2的混合酶，主要应用于油脂精炼、改性等领域。然而，酶经常因成本高、操作稳定性差和难以回收再利用而在工业应用中受到限制。为了克服这些缺点，开发了酶固定化技术，既能保留酶的生物化学催化特性，又能实现重复利用，降低成本，提高工业适用性。

2、酶固定化处理是提高酶蛋白稳定性的有效方法。酶固定化效率决定了固定化酶的有效性，例如稳定性、酶活性和可重复使用性等，主要取决于载体的设计、功能和性质等因素。目前，已有各种有机/无机材料用于酶的固定化。但是，回收困难的问题仍然存在。基于传本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种磁性纳米颗粒固定化磷脂酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中磁性纳米颗粒活化时间为30min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(3)中磷脂酶LM酶液的添加量为60μL，pH值为2.5。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(3)中磷脂酶3G酶液的添加量为100μL，pH值为5.5。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(4)中磁性纳米颗粒与磷脂酶LM酶液反应温度为30℃，反应时间为3h。

6.根据权利要求1所述的方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种磁性纳米颗粒固定化磷脂酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中磁性纳米颗粒活化时间为30min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(3)中磷脂酶lm酶液的添加量为60μl，ph值为2.5。

4.根据权利要求1所述的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：滕飞，陈乐，谭湘芸，刘悦，尚柏余，
申请(专利权)人：东北农业大学，
类型：发明
国别省市：