System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种用于检测潜伏感染并可复活的鲤疱疹病毒Ⅱ型的引物制造技术_技高网
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一种用于检测潜伏感染并可复活的鲤疱疹病毒Ⅱ型的引物制造技术

技术编号:42632166 阅读:38 留言:0更新日期:2024-09-06 01:32
本发明专利技术公开一种用于检测潜伏感染并可复活的鲤疱疹病毒Ⅱ型的引物,由1‑2号引物对构成,所述1号引物对的上游引物F1、下游引物R1及2号引物对的上游引物F2、下游引物R2的DNA序列分别如SEQ ID NO.1‑4所示。两组引物对分别是基于鲤疱疹病毒Ⅱ型极早期基因(ORF147)和晚期基因(ORF72)而设计,采用两组引物对无临床症状的鲫鱼肾脏组织进行PCR检测,可准确检测无临床症状的鲫鱼肾脏组织鲤疱疹病毒Ⅱ型的极早期和晚期基因的表达状态,进而准确的判断出处于潜伏感染的鲤疱疹病毒Ⅱ型是否可复活,从而对存在有可复活鲤疱疹病毒II型的无症状鱼类提出可靠的预警,以便在恰当的时机采取控制发病的有效措施。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物基因检测领域,尤其涉及一种用于检测潜伏感染并可复活的鲤疱疹病毒ⅱ型的引物。


技术介绍

1、鲤疱疹病毒ii型(cyhv-2)是引起鲫鱼和金鱼造血器官坏死的高致病性病毒,其首次分离自患病金鱼。2012年在我国首次报道该病毒感染鲫鱼,引起的鲫鱼造血器官坏死病,其致死率高达90~100%。

2、cyhv-2与鲤痘疮病毒(cyhv-1)、锦鲤疱疹病毒(cyhv-3)同属于疱疹病毒目,异样疱疹病毒科,鲤科疱疹病毒属;遗传物质为双链dna,具有囊膜。有研究表明鲤疱疹病毒ⅱ型与多数疱疹病毒在复制过程中有着共同的特征,即按照病毒基因表达的顺序可分为极早期基因(ie)、早期(e)、晚期(l)。ie基因多表达病毒的转录因子,发生在病毒dna复制之前,以调节宿主细胞从而启动病毒的复制过程;e基因编码病毒dna复制所需要的蛋白;一旦病毒dna复制开始,l基因表达增加,从而合成病毒的结构蛋白。研究发现cyhv-2 的orf147基因为极早期基因,orf72基因为晚期基因。

3、疱疹病毒在与宿主长期共存的过程中,进化出调控宿主免疫应答的机制,从而逃避宿主对自身的识别与清除,治愈后会呈现持续性或潜伏感染状态。潜伏病毒的部分遗传物质存留在宿主组织细胞中不复制病毒粒子,仅少数潜伏相关的基因表达。研究表明,cyhv-2也可在无症状的鲫鱼体内建立潜伏感染,其主要潜伏靶器官为肾脏和脾脏,且随着病情的逐渐减弱,病毒在存活鱼体内逐渐建立持续性感染、潜伏感染,在此过程中病毒相关基因的表达也逐渐沉默,仅保留与病毒潜伏感染相关基因。然而,处于潜伏感染状态的病毒可在应激条件(如水温变化、性腺成熟等)下,被诱发复活并释放病毒粒子,从而引起发病。由于cyhv-2的潜伏及复活机制目前尚不明确,因而在养殖生产中,无症状鱼携带病毒情况的检测,成为控制该病发生的重要环节之一。

4、目前关于cyhv-2的检测方法包括taqman荧光定量pcr检测技术、基于胶体金免疫层析试纸条检测技术、特异性引物和探针组合检测试剂盒等,但均是基于病毒的dna或病毒特定蛋白的检测。基于cyhv-2具有潜伏感染特性,在无症状鱼中检测到病毒dna阳性或病毒特定蛋白为普遍现象,但是却无法准确判断病毒是否可能复活,以至于不能在恰当的时机采取控制发病的有效措施。


技术实现思路

1、本专利技术是为了解决现有技术所存在的上述技术问题,提供一种用于检测潜伏感染并可复活的鲤疱疹病毒ⅱ型的引物。

2、本专利技术的技术解决方案是:一种用于检测潜伏感染并可复活的鲤疱疹病毒ⅱ型的引物,由1-2号引物对构成,所述1号引物对的上游引物f1、下游引物r1及2号引物对的上游引物f2、下游引物r2的dna序列分别如下:

3、1号引物对:

4、f1:5'- ggtcgatccgtctaacttgtac-3';

5、r1:5'-gctgctaccagactgtactagg-3';

6、2号引物对:

7、f2:5'-atccgcttcaagtggctaa-3';

8、r2:5'-gcgttgaagatgcgaagg-3'。

9、本专利技术的两组引物对分别是基于鲤疱疹病毒ⅱ型极早期基因(orf147)和晚期基因(orf72)而设计,采用两组引物对无临床症状的鲫鱼肾脏组织进行pcr检测,可准确检测无临床症状的鲫鱼肾脏组织鲤疱疹病毒ⅱ型的极早期和晚期基因的表达状态,进而准确的判断出处于潜伏感染的鲤疱疹病毒ⅱ型是否可复活,从而对存在有可复活鲤疱疹病毒ii型的无症状鱼类提出可靠的预警,以便在恰当的时机采取控制发病的有效措施。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测潜伏感染并可复活的鲤疱疹病毒Ⅱ型的引物,其特征在于:由1-2号引物对构成,所述1号引物对的上游引物F1、下游引物R1及2号引物对的上游引物F2、下游引物R2的DNA序列分别如下:

【技术特征摘要】

1.一种用于检测潜伏感染并可复活的鲤疱疹病毒ⅱ型的引物,其特征在于:由1-2号引物对构成,所述1号...

【专利技术属性】
技术研发人员:魏畅李强刘云宇
申请(专利权)人:盐城工学院
类型:发明
国别省市:

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