除草剂的新靶标和对所述的除草剂有抗性的转基因植物制造技术

本发明专利技术涉及除草剂的新靶标和对所述的除草剂有抗性的转基因植物。本发明专利技术涉及具有ａｒｏｇｅｎａｔｅ脱氢酶活性的新酶，特别是植物的ａｒｏｇｅｎａｔｅ脱氢酶以及编码所述酶的基因。本发明专利技术的ａｒｏｇｅｎａｔｅ脱氢酶催化酪氨酸生物合成代谢途径的最后一步并因此构成除草剂的潜在靶标。因此本发明专利技术也涉及鉴定以所述的酶为靶酶的除草剂的方法，所述的除草剂化合物通过与所述的酶结合而防止酪氨酸的生物合成。本发明专利技术还涉及对以参与酪氨酸生物合成途径的酶为靶酶，特别是以参与转化Ｌ－酪氨酸为预苯酸的酶，具体是ａｒｏｇｅｎａｔｅ脱氢酶为靶酶的除草剂，有耐受性的转基因植物。这些植物成为耐受性是由于在植物组织中表达了预苯酸脱氢酶，此酶对所述的除草剂不敏感并使植物即使在用所述的除草剂处理后仍能合成酪氨酸。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及具有arogenate脱氢酶活性的新酶，具体是植物arogenate脱氢 酶，还涉及编码这些酶的基因。本专利技术的arogenate脱氢酶催化酪氨酸生物合成 代谢途径的最后一步，由于这一点，构成除草剂的潜在靶标。因此，本专利技术还涉 及鉴定以这些酶为靶酶的除草剂化合物的方法，所述的除草剂化合物通过附着所 述的酶而防止酪氨酸的生物合成。本专利技术也涉及以参与酪氨酸生物合成途径的酶 为靶酶，特别是以参与预苯酸转变成L-酪氨酸的酶为靶酶，具体是以arogenate 脱氢酶为靶酶的除草剂化合物具有耐受性的转基因植物。这些植物成为耐受性是 由于在植物组织中表达了预苯酸脱氢酶，此酶对所述的除草剂不敏感并使植物即 使在用所述除草剂化合物处理后仍能合成酪氨酸。
技术介绍
芳香族氨基酸的生物合成途径桅了植物、细菌和真菌必需的代谢途径。除了 生物合成酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸外，这个代谢途径在产生许多次级芳香代谢 产物的过程中，包括诸如植物-微生物相互作用，结构性生物高聚物如木质素和软 木脂生物合成、激素合成、或苯醌合成中都起着非常重要的作用。在具有此代谢 途径的所有生物中，已鉴定到两条预本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种能耐受以参与预苯酸转变为Ｌ－酪氨酸的代谢步骤中任一步骤的酶为靶酶的除草化合物的植物细胞，其特征在于，它包括了一个编码预苯酸脱氢酶的基因并在它的组织中表达所述的酶。

【技术特征摘要】
FR 2000-12-5 00/157231.一种能耐受以参与预苯酸转变为L-酪氨酸的代谢步骤中任一步骤的酶为靶酶的除草化合物的植物细胞，其特征在于，它包括了一个编码预苯酸脱氢酶的基因并在它的组织中表达所述的酶。2. 如权利要求1所述的植物细胞，其特征在于，它能耐受以arogenate脱氢 酶为耙酶的除草剂化合物。3. 如权利要求2所述的植物细胞，其特征在于，它能耐受除草剂化合物，所 述除草剂化合物以arogenate脱氢酶为耙酶。4. 如权利要求3所述的植物细胞，其特征在于，所述arogenate脱氢酶是以 多核苷酸编码的。5. 如权利要求4所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸包含以下的多 核苷酸.-(a) 编码由序列标示符SEQ ID N0: 3 ， SEQ ID NO: 5 ， SEQ ID NO: 7或SEQ ID N0:13所描述的多肽的分离的多核苷酸；(b) 与(a)的多聚核苷酸杂交的分离的多核苷酸。(c )与(a )或(b )的多聚核苷酸有同源性的分离的多核苷酸； (d) (a)， (b)或(c)所述的多核苷酸的片段。6. 如权利要求5所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸包含选自序列 标示符SEQ ID NO:l， SEQ ID N0:2， SEQ ID N0:4， SEQ ID N0:6或SEQ ID N0:8的多核苷酸。7. 如权利要求4所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸包含选自以下 的多核苷酸(a) 编码由序列标示符SEQ ID N0:11所描述的多肽的分离的多核苷酸；(b) 与(a)所述的多核苷酸杂交的分离的多核苷酸；(c) 与(a)或(b)所述多核苷酸同源的分离的多核苷酸；(d) (a)， (b)或(c)所述的多核苷酸的片段。8. 如权利要求7所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸包含选自序列 标示符SEQ ID NO:IO的多核苷酸。9. 如权利要求4-8任一所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸来源于植物。10. 如权利要求6所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸来源于拟南芥11. 如权利要求8所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸来源于灰绿云 衫(尸j'ces ^卵cs)。12. 如权利要求11所述的植物细胞，其特征在于，所述酶来源于植物。13. 如权利要求10所述的植物细胞，其特征在于，所述arogenate脱氢酶是 以多核苷酸编码的，所述多核苷酸选自以下的一个多聚核苷酸(a) 编码由序列标示符SEQ ID N0:13所描述的多肽的分离的多核苷酸；(b) 与(a)所述多核苷酸杂交的分离的多核苷酸。(c) 与(a )或(b )所述多核苷酸同源的分离的多核苷酸；(d) (a)、 (b)或(c)所述多核苷酸的片段。14. 如权利要求13所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸包括选自序 列标示符SEQ ID NO: 11的多核苷酸。15. 如权利要求13或14所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸来源于 细菌。16. 如权利要求15所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸来源于集胞 藻属的细菌。17. 如权利要求16所述的植物细胞，其特征在于，所述酶来源于细菌。18. 如权利要求13-17任一所述的植物细胞，其特征在于，所述除草剂化合物 是用鉴定以具有arogenate脱氢酶活性的酶为靶酶的除草化合物的方法得到的， 该方法包括步骤(a) 至少准备两个样品，每一个在溶液中含有等量的arogenate脱氢酶；(b) 其中的一个样品用一种化合物处理；(c) 测定所述的每一样品的arogenate脱氢酶活性；(d) 当(c)步骤测定的经处理样品的酶活性比未处理样品的酶活性明显低 时，则可以认定步骤(b)中所用的化合物是一种除草化合物；(e) 将步骤(d)中所鉴定的化合物的除草活性通过用所述的化合物处理植物 予以验证。19. 如权利要求18所述的方法，其特征在于，步骤(a)中所用的具有arogenate 脱氢酶活性的酶是由多核苷酸编码的。20. 如权利要求19所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸包含以下的多核苷酸(a) 编码由序列标示符SEQ ID NO: 3 ， SEQ ID NO: 5 ， SEQ ID NO: 7或SEQ ID NO: 13所描述的多肽的分离的多核苷酸；(b) 与(a)的多聚核苷酸杂交的分离的多核苷酸。(c )与(a )或(b )的多聚核苷酸有同源性的分离的多核苷酸； (d) (a)， (b)或(c)所述的多核苷酸的片段。21. 如权利要求20所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸包含选自序 列标示符SEQ ID NO:l， SEQ ID N0:2， SEQ ID N0:4， SEQ ID N0:6或SEQ ID N0:8的多核苷酸。22. 如权利要求19所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸包含选自以 下的多核苷酸(a) 编码由序列标示符SEQ ID N0:11所描述的多肽的分离的多核苷酸；(b) 与(a)所述的多核苷酸杂交的分离的多核苷酸；(c )与(a )或(b )所述多核苷酸同源的分离的多核苷酸； (d) (a)， (b)或(c)所述的多核苷酸的片段。23. 如权利要求22所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸包含选自序 列标示符SEQ ID N0:10的多核苷酸。24. 如权利要求19-23任一所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸来源 于植物。25. 如权利要求21所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸来源于拟南26. 如权利要求23所述的植物细胞，其特征在于，所述多核苷酸来源于灰绿 云衫(尸ices W卵C3)。27. 如权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：M马特林格，P里珀特，
申请(专利权)人：阿方蒂农科股份有限公司，
类型：发明
国别省市：FR[法国]