一种冷冻保护效果提升的细胞冻存液及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种冷冻保护效果提升的细胞冻存液。通过对冻存液组分的筛选实验，选择获得包含DMSO、羧甲基纤维素钠、脯氨酸的PlasmaLyte A溶液作为细胞冻存液。在此基础上，进一步优选添加抗凝剂华法林钠组分。本发明专利技术还提供了细胞冻存液的制备方法、应用等等。使用本发明专利技术的细胞冻存液，获得的复苏细胞复苏率高、细胞形态不变、细胞沉降比例低，且冻存液组分简单、明确、无动物/人源成分，适合工业大规模应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，具体涉及细胞冻存，尤其涉及一种冷冻保护效果提升的细胞冻存液。

技术介绍

1、细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存液是细胞冻存采用的常用试剂，通常含有dmso。对于含dmso的细胞冷冻液，按照其组分和功能，主要分为三类。第一类是载液，通常为生理盐水、缓冲液或细胞培养基，为冷冻液提供适宜细胞存活的基质环境。第二类是渗透性保护剂dmso，它是冷冻保护剂，避免细胞在低温状态下受到的冷冻损伤。第三类是非渗透性保护剂，例如助悬剂，它能制造粘度，让细胞不容易团聚，从而被dmso均匀地渗透。广泛使用的助悬剂是fbs（胎牛血清），它不仅有粘度，还含有生长因子、激素、蛋白/多肽和能量物质。最经典的细胞冷冻液的构成组分是：某细胞培养基、dmso和fbs。

2、对于载液，由于培养基的成分非常多（＞15种），不同种培养基成分各异，且不同生产商制造的同种培养基原料质量不可控。所以，尽管培养基含有维生素、能量、氨基酸等适宜细胞生存的成分，从质量可控方面来说，不是理想的组分。对于助悬剂，fbs来源于胎牛，且批次间本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种细胞冻存液，其特征在于，所述冻存液为包含DMSO，羧甲基纤维素钠，脯氨酸的PlasmaLyte A溶液。

2.根据权利要求1所述的细胞冻存液，其特征在于，所述冻存液为包含5-10%（v/v）DMSO，0.1-0.5%（w/v）羧甲基纤维素钠，0.025-0.2M脯氨酸的PlasmaLyte A溶液。

3. 根据权利要求2所述的细胞冻存液，其特征在于，所述冻存液为包含7.5%（v/v）DMSO，0.2%（w/v）羧甲基纤维素钠，0.1M脯氨酸的PlasmaLyte A溶液。

4.根据权利要求1或2所述的细胞冻存液，其特征在于，所述冻存液还包含华法...

【技术特征摘要】

1.一种细胞冻存液，其特征在于，所述冻存液为包含dmso，羧甲基纤维素钠，脯氨酸的plasmalyte a溶液。

2.根据权利要求1所述的细胞冻存液，其特征在于，所述冻存液为包含5-10%（v/v）dmso，0.1-0.5%（w/v）羧甲基纤维素钠，0.025-0.2m脯氨酸的plasmalyte a溶液。

3. 根据权利要求2所述的细胞冻存液，其特征在于，所述冻存液为包含7.5%（v/v）dmso，0.2%（w/v）羧甲基纤维素钠，0.1m脯氨酸的plasmalyte a溶液。

4.根据权利要求1或2所述的细胞冻存液，其特征在于，所述冻存液还包含华法林钠，任选地，所述华法林钠在所述冻存液中的浓度是50-200μg/l。

5.根据权利要求4所述的细胞冻存液，其特征在于，所述华法林钠在所述冻存液中的浓度是100μg/l。...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈迎春，李杰，贾志扬，
申请(专利权)人：上海智荃生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：