一种基于CRISPR-Dx技术的ROS1基因融合检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种基于CRISPR‑Dx技术的ROS1基因融合检测试剂盒。所示试剂盒包括RT‑RPA扩增体系和CRISPR‑Dx检测体系，具有反应时间短、设备要求简单和检测灵敏度高等优点。所述试剂盒整个反应过程只需要10~30分钟，相对于传统的检测手段需要数小时而言具有明显的检测优势。所述试剂盒只需要在35~45℃下恒温反应即可，对反应设备的要求低，适用范围更广泛。现有同类产品的检测灵敏度为25 copies/μL，所述试剂盒首先通过RT‑RPA扩增体系对待测样品进行扩增，再进一步使用CRISPR‑Dx检测体系对扩增产物进行检测，检测灵敏度可达10 copies/μL，远超现有同类产品。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及核酸检测，特别涉及一种基于crispr-dx技术的ros1基因融合检测试剂盒。

技术介绍

1、ros1基因突变引起的肺癌是一种较为少见的肺癌类型，主要为ros1基因与其他基因发生断裂融合，通常发生在非小细胞肺癌中，大约占肺癌总数的1~2%。其临床表现和治疗方法与其他类型的非小细胞肺癌相似，治疗手段包括手术、放疗、化疗和靶向治疗等，其中靶向治疗是一种针对肿瘤细胞特定基因突变的治疗方法，对ros1肺癌的治疗效果最好，因此需要针对ros1基因融合进行分型检测。

2、ros1现有的检测手段主要包含免疫组化（ihc）、荧光原位杂交（fish）、实时荧光定量pcr（pcr）及下一代测序（ngs）等。这些检测手段通常存在检测灵敏度和特异性较差，导致检测结果准确性及可靠性较低；其中最主要的缺点是检测时间长、成本高及操作繁琐，因此，亟需开发一种ros1基因融合肺癌更快速、更高效检测的方法。

3、核酸检测技术（crispr-based diagnostics，crispr-dx）是基于crispr-cas12和crispr-cas13家族本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种ROS1基因融合检测试剂盒，其特征在于，包括RT-RPA扩增体系，所述RT-RPA扩增体系包括至少14条正向引物和4条反向引物，所述正向引物选自如SEQ ID No:9至SEQ IDNo:46所示的核苷酸序列，反向引物选自如SEQ ID No:47至SEQ ID No:55所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述正向引物选自如SEQ ID No:9、SEQ IDNo:11、SEQ ID No:12、SEQ ID No:17、SEQ ID No:18、SEQ ID No:19、SEQ ID No:20、SEQ IDNo:21、SEQ ID No...

【技术特征摘要】

1.一种ros1基因融合检测试剂盒，其特征在于，包括rt-rpa扩增体系，所述rt-rpa扩增体系包括至少14条正向引物和4条反向引物，所述正向引物选自如seq id no:9至seq idno:46所示的核苷酸序列，反向引物选自如seq id no:47至seq id no:55所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述正向引物选自如seq id no:9、seq idno:11、seq id no:12、seq id no:17、seq id no:18、seq id no:19、seq id no:20、seq idno:21、seq id no:22、seq id no:23、seq id no:28、seq id no:30、seq id no:34、seq idno:35、seq id no:38、seq id no:42和seq id no:45所示的核苷酸序列，反向引物选自如seq id no:47、seq id no:49、seq id no:51和、seq id no:55所示的核苷酸序列。

3.根据权利要求1或2所述试剂盒，其特征在于，所述rt-rpa扩增体系还包括buffer a和buffer b。

4.根据权利要求3所述试剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：祝海宝，李嘉奇，刘家兴，黄智豪，王涛，李嘉慧，陈晓晴，魏炽炬，
申请(专利权)人：汕头大学，
类型：发明
国别省市：