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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物,具体涉及一种抗sars-cov-2中和活性纳米抗体及应用。
技术介绍
1、新冠病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,sars-cov-2)是目前能引起导致人类出现严重呼吸道综合征三种人类冠状病毒之一。sars-cov-2突变株的不断出现使得病毒在传染性、疾病严重程度和疫苗抵抗能力等方面均表现出不同的特征,限制了目前已有疫苗和抗体的保护效力。
2、骆驼科动物体内含有一种天然缺失轻链和重链第一恒定区的抗体称为重链抗体,扩增重链抗体可变区得到的vhh片段,称为纳米抗体。纳米抗体因其较小体积和稳定的结构使其相对于传统抗体分子拥有更好的穿透性,更高的稳定性和更低的免疫原性、更高的靶标亲和力且易于改造,是目前已知最小的抗原结合片段。纳米抗体在临床影像示踪、肿瘤靶向药物、抗病毒药物研发或诊断中表现出优异的生物学活性。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术的不足,提供一种抗sars-cov-2中和活性纳米抗体及应用,本专利技术的纳米抗体能够高效特异性的结合sars-cov-2rbd结构域,且对多个不同毒株的sars-cov-2及其突变株具有良好中和活性,该纳米抗体在抗sars-cov-2方面具有良好的发展前景。
2、为实现上述目的,本专利技术采取的技术方案为:一种抗sars-cov-2中和活性纳米抗体,所述纳米抗体具有如seq id no.1所示的氨基酸序列;所述纳米抗体能够识
3、作为本专利技术所述抗sars-cov-2中和活性纳米抗体的优选实施方式,所述纳米抗体还包括seq id no.1所示氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个氨基酸得到的具有相同活性的抗体。
4、作为本专利技术所述抗sars-cov-2中和活性纳米抗体的优选实施方式,所述纳米抗体还包括seq id no.1所示氨基酸序列进行人源化或长效化改造的抗体。
5、优选地,为了使所述的抗sars-cov-2中和活性纳米抗体便于纯化,可在其n末端或c末端连接如下任一标签:poly-arg(序列:rrrrr)、poly-his(序列:hhhhhh)、flag(序列:dykddddk)、strep-tag ii(序列:wshpqfek)、c-myc(序列:eqkliseedl)。
6、优选地,为了便于所述的抗sars-cov-2中和活性纳米抗体分泌表达,可在所述抗体的氨基添加上信号肽序列。
7、优选地,为了使所述的抗sars-cov-2中和活性纳米抗体半衰期更长,可将所述抗体与igg fc(氨基酸序列为seq id no.3)或人血清白蛋白(human serum albumin,hsa)(氨基酸序列为seq id no.4)融合或者进行peg修饰。
8、本专利技术还提供一种核酸分子,所述核酸分子编码所述的纳米抗体。
9、作为本专利技术所述核酸分子的优选实施方式,所述核酸分子的核苷酸序列如seq idno.2所示。
10、优选地,所述核酸分子还包括在严格条件下与seq id no.2所示dna序列杂交且编码具有相同功能蛋白质的dna分子。
11、优选地,所述核酸分子还包括与seq id no.2所示dna序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且编码具有相同功能蛋白质的dna分子。
12、本专利技术还提供一种含有所述核酸分子的生物材料,所述生物材料包括重组载体、转基因细胞系、表达盒或工程菌。
13、本专利技术还提供一种重组抗体,所述重组抗体由所述的纳米抗体与igg fc组成。
14、本专利技术还提供所述的纳米抗体、所述的核酸分子、所述的生物材料或所述的重组抗体在制备抗sars-cov-2的产品中的应用。
15、本专利技术还提供所述的纳米抗体、所述的核酸分子、所述的生物材料或所述的重组抗体在制备检测sars-cov-2的试剂或试剂盒中的应用。
16、本专利技术还提供一种用于检测sars-cov-2的试剂或试剂盒,包括所述的纳米抗体、所述的核酸分子、所述的生物材料或所述的重组抗体。
17、本专利技术的有益效果:本专利技术通过分子生物学的方法构建了一种抗sars-cov-2中和活性纳米抗体nb1,并经过实验证明nb1与sars-cov-2的受体结合区(rbd)具有很强的反应性,对个不同毒株的sars-cov-2具有良好的中和活性,具有应用于防治sars-cov-2的潜力。
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1.一种抗SARS-CoV-2中和活性纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体具有如SEQ IDNO.1所示的氨基酸序列;所述纳米抗体能够识别SARS-CoV-2的受体结合结构域。
2.根据权利要求1所述的抗SARS-CoV-2中和活性纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体还包括SEQ ID NO.1所示氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个氨基酸得到的具有相同活性的抗体。
3.根据权利要求1所述的抗SARS-CoV-2中和活性纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体还包括SEQ ID NO.1所示氨基酸序列进行人源化或长效化改造的抗体。
4.一种核酸分子,其特征在于,所述核酸分子编码权利要求1~4任一项所述的纳米抗体。
5.根据权利要求4所述的核酸分子,其特征在于,所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。
6.一种含有权利要求4-5任一项所述核酸分子的生物材料,其特征在于,所述生物材料包括重组载体、转基因细胞系、表达盒或工程菌。
7.一种重组抗体,其特征在于,所述重组抗体由权利要求1~4任一项所述的纳米抗体
8.权利要求1~3任一项所述的纳米抗体、权利要求4所述的核酸分子、权利要求6所述的生物材料或权利要求7所述的重组抗体在制备抗SARS-CoV-2的产品中的应用。
9.权利要求1~3任一项所述的纳米抗体、权利要求4所述的核酸分子、权利要求6所述的生物材料或权利要求7所述的重组抗体在制备检测SARS-CoV-2的试剂或试剂盒中的应用。
10.一种用于检测SARS-CoV-2的试剂或试剂盒,其特征在于,包括权利要求1~3任一项所述的纳米抗体、权利要求4所述的核酸分子、权利要求6所述的生物材料或权利要求7所述的重组抗体。
...【技术特征摘要】
1.一种抗sars-cov-2中和活性纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体具有如seq idno.1所示的氨基酸序列;所述纳米抗体能够识别sars-cov-2的受体结合结构域。
2.根据权利要求1所述的抗sars-cov-2中和活性纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体还包括seq id no.1所示氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或几个氨基酸得到的具有相同活性的抗体。
3.根据权利要求1所述的抗sars-cov-2中和活性纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体还包括seq id no.1所示氨基酸序列进行人源化或长效化改造的抗体。
4.一种核酸分子,其特征在于,所述核酸分子编码权利要求1~4任一项所述的纳米抗体。
5.根据权利要求4所述的核酸分子,其特征在于,所述核酸分子的核苷酸序列如seq idno.2所示。
6.一种...
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