一种生产G-7-ADCA的表达载体、菌株及方法和应用技术

本发明专利技术属于发酵工程和酶工程技术领域，涉及一种生产G‑7‑ADCA的表达载体、菌株及方法和应用。本发明专利技术提供了一种用于生产G‑7‑ADCA的表达载体，所述表达载体含有编码扩环酶scDAOCS7的核苷酸序列，所述表达载体还含有T7启动子和编码核糖体结合位点的核苷酸序列。利用本发明专利技术所述表达载体构建重组菌株，进行扩环酶的表达，能够取得较高的扩环酶活性，且生产G‑7‑ADCA的产量高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于发酵工程和酶工程，具体涉及一种生产g-7-adca的表达载体、菌株及方法和应用。

技术介绍

1、7-苯乙酰基-3-脱乙酰氧基头孢烷酸(g-7-adca)，是一种白色或淡黄色的粉末，能够在强酸或者强碱溶液中溶解。g-7-adca是生产重要β-内酰胺类抗生素母核7-adca的前体物质。目前采用7-adca合成的药物包括头孢羟氨、头孢拉定、头孢克罗等都是国内外抗生素市场用量较大的抗生素药物。但是合成7-adca的技术有待提高，产量较低，同时在质量上也无法满足市场需求。目前，7-adca的合成方法有四种：化学法、化学酶法、酶法与生物酶法。

2、目前我国仍然会使用化学法合成7-adca。该工艺是以青霉素g钾盐为原料，首先选用合适的氧化剂将底物氧化为青霉素亚砜。其次利用酯化剂将青霉素亚砜的羧基保护起来，然后在无水无氧的有机溶剂中利用酸作为催化剂进行扩环重排合成头孢g酸酯，之后利用稀硫酸去水解头孢g酸酯获得头孢g酸。最后与pcl5和meoh进行反应合成胺酯，胺酯水解后获得7-adca。由于酶法合成7-adca具有低成本和低污染的优势，正逐渐受到本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于生产G-7-ADCA的表达载体，其特征在于，所述表达载体含有编码扩环酶scDAOCS7的核苷酸序列，所述表达载体还含有T7启动子和编码核糖体结合位点的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述编码扩环酶scDAOCS7的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述T7启动子的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示；所述编码核糖体结合位点的核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示。

4.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体的基础载体包括pET24a。

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【技术特征摘要】

1.一种用于生产g-7-adca的表达载体，其特征在于，所述表达载体含有编码扩环酶scdaocs7的核苷酸序列，所述表达载体还含有t7启动子和编码核糖体结合位点的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述编码扩环酶scdaocs7的核苷酸序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述t7启动子的核苷酸序列如seq idno.2所示；所述编码核糖体结合位点的核苷酸序列如seq idno.3所示。

4.根据权利要求1所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体的基础载体包括pet24a。

5.一种g-7-adca的生产菌株，其特征在于，所述生产菌株含有权利要求1～4任一项所述的表达载体。

6.根据权利要求5所述的生产菌株，其特征在于，用于构建所述生产菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲戈，孙周通，苏文成，李金成，袁波，黄曙光，高鹏，马小弟，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：

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