研究Nrf2/ARE信号通路在白藜芦醇保护多巴胺能神经细胞的作用机制的方法技术

本发明专利技术公开了一种研究Nrf2/ARE信号通路在白藜芦醇保护多巴胺能神经细胞的作用机制的方法，其步骤为：步骤a、细胞培养；步骤b、药物分组及处理；步骤c、检测MES23.5细胞存活率；步骤d、后续实验；步骤e、观察细胞数量和形态；步骤f、检测细胞凋亡率；步骤g、进行线粒体膜电位检测；步骤h、检测抗氧化作用的Nrf2信号通路，以确定白藜芦醇联合L‑Dopa对MES23.5细胞发挥抗氧化作用的机制；步骤i、数据分析。本发明专利技术的方法能确定白藜芦醇联合L‑Dopa发挥作用时的通路机制，进而可为PD症状性治疗及神经保护性治疗提供理论依据，并为白藜芦醇协同L‑Dopa通过抗氧化机制对PD修饰治疗提供新的思路。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药理研究，尤其涉及研究nrf2/are信号通路在白藜芦醇保护多巴胺能神经细胞的作用机制的方法。

技术介绍

1、白藜芦醇（resveratrol，rsv），又名芪三酚，其化学名称为3，4，5-三羟基苯二烯；由于容易进入血-脑屏障，即白藜芦醇在缓解多巴胺能神经元变性损伤方面具备独特的优势。根据帕金森病（pd）模型小鼠实验显示，白藜芦醇通过激活p-akt和caspase-3途径，能够对黑质纹状体发挥抗氧化保护作用。

2、激活核因子-e2相关因子-2（nuclear factor e2-related factor2， nrf2）/抗氧化反应元件（antioxidant response element，are）细胞内源性抗氧化通路，可对pd神经元细胞起到保护作用。白藜芦醇通过调节pi3k-akt/ -nrf2/nf-κb信号通路激活小胶质细胞，防止脂多糖诱导的多巴胺能神经元变性。

3、在现有技术中，关于白藜芦醇联合左旋多巴（l-dopa）通过nrf2/are信号通路保护多巴胺能神经元细胞（mes23.5）的作用机制的研究较少本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.研究Nrf2/ARE信号通路在白藜芦醇保护多巴胺能神经细胞的作用机制的方法，其特征在于，包括有以下步骤，具体的：

2.根据权利要求1所述的研究Nrf2/ARE信号通路在白藜芦醇保护多巴胺能神经细胞的作用机制的方法，其特征在于：于所述步骤a中，DMEM/F12培养基中含5%体积百分比的胎牛血清FBS。

3.根据权利要求1所述的研究Nrf2/ARE信号通路在白藜芦醇保护多巴胺能神经细胞的作用机制的方法，其特征在于：于所述步骤c中，先用2ml胰蛋白酶-EDTA混合消化液消化培养细胞，胰蛋白酶-EDTA混合消化液中胰蛋白酶浓度为0.25%、EDTA浓度为0.02%，完...

【技术特征摘要】

1.研究nrf2/are信号通路在白藜芦醇保护多巴胺能神经细胞的作用机制的方法，其特征在于，包括有以下步骤，具体的：

2.根据权利要求1所述的研究nrf2/are信号通路在白藜芦醇保护多巴胺能神经细胞的作用机制的方法，其特征在于：于所述步骤a中，dmem/f12培养基中含5%体积百分比的胎牛血清fbs。

3.根据权利要求1所述的研究nrf2/are信号通路在白藜芦醇保护多巴胺能神经细胞的作用机制的方法，其特征在于：于所述步骤c中，先用2ml胰蛋白酶-edta混合消化液消化培养细胞，胰蛋白酶-edta混合消化液中胰蛋白酶浓度为0.25%、edta浓度为0.02%，完全培养液调整mes23.5细胞悬液浓度为1×105/ml，而后接种至96孔板上；待细胞贴壁后，按分组要求处理细胞，并于22 h后向96孔板中加入10ul浓度为10 mg/ml的cck8试剂，随后在温度为37°c、co2含量为5%的细胞培养箱中孵育2h；待通过细胞培养箱...

【专利技术属性】
技术研发人员：张峪涵，郭洪胜，
申请(专利权)人：东莞市松山湖中心医院东莞市石龙人民医院，东莞市第三人民医院，东莞市心血管病研究所，
类型：发明
国别省市：