【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及鉴定在细胞中具有抑制寡核苷酸化合物的基因沉默活性的作用的蛋白质。更特别地，本专利技术涉及通过抑制这样的抑制蛋白(例如rab18、zw10、stx18、scfd2、napg、samd4b或vps37a)的表达或活性来增强配体缀合的寡核苷酸化合物在减少细胞中靶基因表达的功效的组合物和方法。所描述的方法对于增加用于治疗目的而施用的配体缀合的寡核苷酸化合物的效力特别有用。
技术介绍
1、基于核酸的疗法(例如小干扰rna(sirna)分子和反义寡核苷酸)近年来发展迅速，尽管存在与递送大的、高电荷核酸相关的挑战。与传统药物分子相比，sirna分子和反义寡核苷酸非常有效，并且能够作用于以前“不可成药”靶点(juliano,nucleic acids res[核酸研究],第44卷:6518-6548,2016；dowdy,nat biotechnol[自然生物技术],第35卷:222-229,2017；以及khvorova和watts,nat biotechnol[自然生物技术],第35卷:238-248,2017)。更令人印象深刻的是，...
【技术保护点】
1.一种用于增强细胞中第一寡核苷酸化合物的沉默活性的方法，该方法包括：
2.如权利要求1所述的方法，其中该抑制蛋白是RAB18、ZW10或STX18。
3.如权利要求1所述的方法，其中该抑制蛋白是RAB18。
4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中抑制抑制蛋白的表达或活性包括使该细胞与第二寡核苷酸化合物接触，该寡核苷酸化合物包含与编码该抑制蛋白的mRNA序列基本上互补的序列。
5.如权利要求4所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物是单链的。
6.如权利要求4所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物是双链的。<...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于增强细胞中第一寡核苷酸化合物的沉默活性的方法，该方法包括：
2.如权利要求1所述的方法，其中该抑制蛋白是rab18、zw10或stx18。
3.如权利要求1所述的方法，其中该抑制蛋白是rab18。
4.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中抑制抑制蛋白的表达或活性包括使该细胞与第二寡核苷酸化合物接触，该寡核苷酸化合物包含与编码该抑制蛋白的mrna序列基本上互补的序列。
5.如权利要求4所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物是单链的。
6.如权利要求4所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物是双链的。
7.如权利要求4至6中任一项所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物包含至少一个经修饰的核苷酸。
8.如权利要求7所述的方法，其中该经修饰的核苷酸是2′-修饰的核苷酸。
9.如权利要求7所述的方法，其中该经修饰的核苷酸是2′-氟修饰的核苷酸、2′-o-甲基修饰的核苷酸、2′-o-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2′-o-烷基修饰的核苷酸、2′-o-烯丙基修饰的核苷酸、双环核酸(bna)、脱氧核糖核苷酸、或其组合。
10.如权利要求7所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物中的所有核苷酸均是经修饰的核苷酸。
11.如权利要求4至10中任一项所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物包含一个或多个硫代磷酸酯核苷酸间键。
12.一种用于减少细胞中靶基因表达的方法，该方法包括：
13.如权利要求12所述的方法，其中该抑制蛋白是rab18、zw10或stx18。
14.如权利要求12所述的方法，其中该抑制蛋白是rab18。
15.如权利要求12至14中任一项所述的方法，其中该抑制蛋白的抑制剂是包含与编码该抑制蛋白的mrna序列基本上互补的序列的第二寡核苷酸化合物。
16.如权利要求15所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物是单链的。
17.如权利要求15所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物是双链的。
18.如权利要求15至17中任一项所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物包含至少一个经修饰的核苷酸。
19.如权利要求18所述的方法，其中该经修饰的核苷酸是2′-修饰的核苷酸。
20.如权利要求18所述的方法，其中该经修饰的核苷酸是2′-氟修饰的核苷酸、2′-o-甲基修饰的核苷酸、2′-o-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2′-o-烷基修饰的核苷酸、2′-o-烯丙基修饰的核苷酸、bna、脱氧核糖核苷酸、或其组合。
21.如权利要求18所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物中的所有核苷酸均是经修饰的核苷酸。
22.如权利要求15至21中任一项所述的方法，其中该第二寡核苷酸化合物包含一个或多个硫代磷酸酯核苷酸间键。
23.如权利要求1至22中任一项所述的方法，其中该靶基因是人基因。
24.如权利要求1至23中任一项所述的方法，其中该靶基因的表达与疾病或障碍相关。
25.如权利要求1至24中任一项所述的方法，其中该第一寡核苷酸化合物是包含与该靶基因的序列基本上互补的序列的单链反义寡核苷酸。
26.如权利要求25所述的方法，其中该反义寡核苷酸的长度为约15至约30个核苷酸。
27.如权利要求1至24中任一项所述的方法，其中该第一寡核苷酸化合物是包含有义链和反义链的sirna，并且其中该反义链包含与该靶基因的序列基本上互补的序列。
28.如权利要求27所述的方法，其中该有义链包含与该反义链的序列充分互补以形成长度为约15至约30个碱基对的双链体区的序列。
29.如权利要求27或28所述的方法，其中该有义链和该反义链的长度各自独立地为约19至约30个核苷酸。
30.如权利要求27至29中任一项所述的方法，其中该有义链和该反义链的长度各自独立地为约19至约23个核苷酸。
31.如权利要求1至30中任一项所述的方法，其中该第一寡核苷酸化合物包含至少一个经修饰的核苷酸。
32.如权利要求31所述的方法，其中该经修饰的核苷酸是2′-修饰的核苷酸。
33.如权利要求31所述的方法，其中该经修饰的核苷酸是2′-氟修饰的核苷酸、2′-o-甲基修饰的核苷酸、2′-o-甲氧基乙基修饰的核苷酸、2′-o-烷基修饰的核苷酸、2′-o-烯丙基修饰的核苷酸、bna、脱氧核糖核苷酸、或其组合。
34.如权利要求31所述的方法，其中该第一寡核苷酸化合物中的所有核苷酸均是经修饰的核苷酸。
35.如权利要求1至30中任一项所述的方法，其中该第一寡核苷酸化合物包含一个或多个硫代磷酸酯核苷酸间键。
36.如权利要求1至35中任一项所述的方法，其中该配体包含胆固醇部分、维生素、类固醇、胆汁酸、叶酸部分、脂肪酸、碳水化合物、糖苷、或者抗体或其抗原结合片段。
37.如权利要求1至35中任一项所...
【专利技术属性】
技术研发人员：鲁佳苗，M·奥尔曼，P·柯林斯，CM·李，S·王，
申请(专利权)人：美国安进公司，
类型：发明
国别省市：
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