猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光PCR检测方法技术

技术编号:42494464 阅读:27 留言:0更新日期:2024-08-21 13:12
本发明专利技术公开一种猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光PCR检测方法。本发明专利技术的检测组合物是利用锁核酸的特点设计,对DNA有强大的识别能力和亲和力,能够有效提高猪流行性腹泻病毒的检测效率,降低漏检的概率。本发明专利技术为猪流行性腹泻病毒检测提供了一种新的检测方法和检测试剂,与现有的检测方法相比,具有特异性强、灵敏度高等优点,比常规TaqMan探针荧光定量PCR方法的灵敏度高10倍;可用于猪流行性腹泻病毒精准检测,特别适用于科研及临床应用,具有很好的商业应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学领域,涉及猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光pcr检测方法。


技术介绍

1、猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,ped)是一种急性、高度接触性传染病,由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,pedv)引起,以感染猪呕吐、腹泻甚至脱水而死为典型特征,各年龄段猪均易被感染[2],但仔猪感染后症状最为严重,致死率可以高达100%。

2、pedv属于冠状病毒科、冠状病毒属,为有囊膜的单股正链rna病毒,基因组全长约28kb,编码3个非结构蛋白(orf1a、orf1b和orf3)和4个结构蛋白(s、e、m和n)[10]。聚合酶链式反应(pcr)是扩增特定dna序列的强大工具[11],但由于常规pcr无法准确定量,随后研发出实时聚合酶链式反应[12],

3、可实时监测pcr反应进程,是核酸检测的首选经典方法。近年来研究发现,对常规taqman探针进行修饰可有效提高实时荧光定量pcr检测方法的特异性和敏感性。

4、锁核酸(lna)探针,是在t本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光PCR检测方法,其特征在于包括用于扩增猪流行性腹泻病毒的1组特异性引物对和1条LNA-Taqman探针:

2.根据权利要求1所述的一种猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光PCR检测方法检测组合物,其特征在于:所述的LNA-Taqman探针在5′端标记荧光物质,3′端标记淬灭物质。

3.一种猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光PCR检测方法检测组合物,其特征在于:所述的5′端标记荧光物质为标记FAM,3′端标记淬灭物质为标记BHQ1。

4.一种猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光PCR检测方法,其特征在于包括权利要求1-3任一项所述的...

【技术特征摘要】

1.一种猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光pcr检测方法,其特征在于包括用于扩增猪流行性腹泻病毒的1组特异性引物对和1条lna-taqman探针:

2.根据权利要求1所述的一种猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光pcr检测方法检测组合物,其特征在于:所述的lna-taqman探针在5′端标记荧光物质,3′端标记淬灭物质。

3.一种猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光pcr检测方法检测组合物,其特征在于:所述的5′端标记荧光物质为标记fam,3′端标记淬灭物质为标记bhq1。

4.一种猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光pcr检测方法,其特征在于包括权利要求1-3任一项所述的一种猪流行...

【专利技术属性】
技术研发人员:李艳李春玲翟少伦卞志标杨南玲
申请(专利权)人:广东省农业科学院动物卫生研究所
类型:发明
国别省市:

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