枯草芽孢杆菌漆酶突变体、编码基因、重组载体、重组菌及制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及枯草芽孢杆菌漆酶突变体、编码基因、重组载体、重组菌及制备方法和应用，涉及基因工程和生物工程技术领域，枯草芽孢杆菌漆酶突变体具有SEQ ID NO:1所示序列发生突变的序列，所述发生突变的位点为D113P、T196M、A469V中的任一突变的位点或至少两种突变的位点的组合。本发明专利技术通过定点突变获得一系列突变体，并进行相对酶活和热稳定性分析，对序列SEQ ID NO:1进行改造，D113P、T196M、A469V中的任一突变的位点或至少两种突变的位点的组合，得到枯草芽孢杆菌漆酶突变体(包括单点突变体和组合突变体)，达到高比活性或/和高热稳定性，具有重要应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程和生物工程，具体涉及枯草芽孢杆菌漆酶突变体、编码基因、重组载体、重组菌及制备方法和应用。

技术介绍

1、漆酶(benzenediol:oxygen oxidoreductases,ec 1.10.3.2)是一种含铜的多酚氧化酶，是单体、二聚体或四聚体糖蛋白。漆酶具有广泛的底物谱，可以氧化多种酚类化合物以及其衍生物，在介体的协同作用下也可氧化非酚类化合物和木质素等。漆酶催化反应过程产生的唯一副产物是水，所以是一种很有前途的生物绿色工具，在纸浆漂白、印刷和染料工业，水质处理和废水处理中污染物降解去除等领域具有重要的应用价值。典型的漆酶分子结构包含四个离子，根据磁性和光谱特性可以分为类型一(t1)、类型二(t2)和两个类型三(t3)铜离子。t1铜在610nm左右表现出较强的电子吸光，负责电子转移和底物结合口袋处的氧化，t2位点是由t2铜形成的单核中心。t2铜和两个t3铜组成三核铜簇，其位于第一和第三结构域结合处，对漆酶氧化还原中质子化过程起重要作用。漆酶在自然界分布广泛。真菌漆酶因其氧化还原电势较高，催化活性较强，在多个领域被广泛应用。但真本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.枯草芽孢杆菌漆酶突变体，其特征在于，枯草芽孢杆菌漆酶突变体具有SEQ ID NO:1所示序列发生突变的序列，所述发生突变的位点为D113P、T196M、A469V中的任一突变的位点或至少两种突变的位点的组合。

2.根据权利要求1所述枯草芽孢杆菌漆酶突变体，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌漆酶突变体为D113P、T196M、A469V、D113P/T196M、D113P/A469V、T196M/A469V、D113P/T196M/A469V中的任意一种。

3.根据权利要求1所述枯草芽孢杆菌漆酶突变体，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌漆酶突变体为D113P/T196M...

【技术特征摘要】

1.枯草芽孢杆菌漆酶突变体，其特征在于，枯草芽孢杆菌漆酶突变体具有seq id no:1所示序列发生突变的序列，所述发生突变的位点为d113p、t196m、a469v中的任一突变的位点或至少两种突变的位点的组合。

2.根据权利要求1所述枯草芽孢杆菌漆酶突变体，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌漆酶突变体为d113p、t196m、a469v、d113p/t196m、d113p/a469v、t196m/a469v、d113p/t196m/a469v中的任意一种。

3.根据权利要求1所述枯草芽孢杆菌漆酶突变体，其特征在于，所述的枯草芽孢杆菌漆酶突变体为d113p/t196m/a469v。

4.一种编码基因，其特征在于，所述编码基因编码如权利要求1至3任一项所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：张桂敏，孙旭庭，张发英，王文雅，
申请(专利权)人：北京化工大学，
类型：发明
国别省市：