用于检测前列腺癌EV DNA中GSTP1启动子甲基化状态的试剂组合、试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及通过PCR检测GSTP1启动子甲基化程度，具体涉及一种用于检测前列腺癌EV DNA中GSTP1启动子甲基化程度的试剂组合、试剂盒，用于解决用于前列腺癌检测的PSA对前列腺癌组织特异性差，难以鉴别良性病变和肿瘤病变，采用cfDNA为靶标进行液体活检，存在含量低、临床操作不便、无法反映活细胞的状态，而EV虽是一种非常有潜力的肿瘤标志物，但目前的研究大多集中在基因突变检测的不足之处。该用于检测前列腺癌EV DNA中GSTPl启动子甲基化状态的试剂组合包括引物和一对TaqMan探针，本方法以EV DNA中GSTP1启动子为靶标，相比传统的cfDNA甲基化的检测具有更高的灵敏度和特异性，实现对前列腺癌的精准辅助诊断。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及通过pcr检测gstp1启动子甲基化程度，具体涉及一种用于检测前列腺癌ev dna中gstp1启动子甲基化程度的试剂组合、试剂盒。

技术介绍

1、前列腺癌(prostate cancer，pca)是男性最常见的恶性肿瘤之一，目前前列腺特异性抗原(prostate specific antigen，psa)由于价格低廉，检测方便，是高危人群中检测前列腺癌最常用的血清生物标志物，正常范围为0-4ng/ml，但它虽具有前列腺组织特异性，但对前列腺癌组织并无特异性，难以鉴别良性病变和肿瘤病变，前列腺炎症、感染、创伤和良性增生均能引起psa的升高，尤其在4-10ng/ml的“灰区”，其特异性仅为25％左右，这些非肿瘤特异性的psa升高往往导致过度诊疗，临床急需探索新的标志物进行前列腺癌的个体化诊断。

2、液体活检是肿瘤检验领域极具发展前景的新技术，因其可以克服组织活检取样难和异质性的问题，公认其潜力巨大。传统液体活检中进行dna甲基化的检测多采用cfdna为靶标，但是采用cfdna进行检测还存在许多问题：一是cfdna含量很低(ng级)，测本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于检测前列腺癌EV DNA中GSTP1启动子甲基化状态的试剂组合，其特征在于：包括引物和一对TaqMan探针，所述引物包括上游引物GTGATTTAGTATTGGGGYG和下游引物CTAAAAACTCTAAACCCCATCC。

2.根据权利要求1所述的用于检测前列腺癌EV DNA中GSTP1启动子甲基化状态的试剂组合，其特征在于：所述一对TaqMan探针为甲基化探针和非甲基化探针，所述甲基化探针包括DNA序列AACGCGAACCGCGCGTA，所述非甲基化探针包括DNA序列CACAAACCA+C+A+C+ATACTCAC，其中+C、+A代表锁核酸修饰。

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【技术特征摘要】

1.一种用于检测前列腺癌ev dna中gstp1启动子甲基化状态的试剂组合，其特征在于：包括引物和一对taqman探针，所述引物包括上游引物gtgatttagtattggggyg和下游引物ctaaaaactctaaaccccatcc。

2.根据权利要求1所述的用于检测前列腺癌ev dna中gstp1启动子甲基化状态的试剂组合，其特征在于：所述一对taqman探针为甲基化探针和非甲基化探针，所述甲基化探针包括dna序列aacgcgaaccgcgcgta，所述非甲基化探针包括dna序列cacaaacca+c+a+c+atactcac，其中+c、+a代表锁核酸修饰。

3.根据权利要求2所述的用于检测前列腺癌ev dna中gstp1启动子甲基化状态的试剂组合，...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁汀，刁艳君，郝晓柯，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：