一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法和应用技术

本发明专利技术提出了一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法和应用，制备方法包括以下步骤：S1，将各群脑膜炎奈瑟菌诊断血清纯化得到相应的抗脑膜炎IgG抗体，每种IgG抗体均用稀释液稀释40‑320倍，离心取上清并过滤；所述稀释液的组分包括甘氨酸、氨基磺酸、氯化钠、蔗糖和蒸馏水，pH值为7.8‑8.2；S2，取羊抗兔IgG包被的聚苯乙烯乳胶微球，清洗后用生理盐水稀释10‑20倍，重悬沉淀，旋涡振荡1‑3min；S3，将步骤S2稀释后的聚苯乙烯乳胶微球溶液与步骤S1的抗体偶联，偶联结束后清洗聚苯乙烯乳胶微球，加入步骤S1的稀释液重悬沉淀；S4，加入封闭剂，封闭聚苯乙烯乳胶微球上未结合的表面基团，然后加入保存剂，于4‑8℃条件下保存。本发明专利技术在稀释液中引入甘氨酸可与凝集物质形成氢键或疏水相互作用，增强凝集物质的稳定性，从而提高检测的稳定性和灵敏度；引入氨基磺酸有助于改变血清中的氧化还原环境，促进抗原与抗体的结合，从而加快阳性反应的发生时间。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及乳胶凝聚检测，尤其涉及一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法和应用。

技术介绍

1、脑膜炎奈瑟菌(neisseria meningitidis,nm)是引起流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)的病原体，根据荚膜多糖可将脑膜炎奈瑟氏菌分为a、b、c、d、x、y、z、29e、w135、l、h、i、k等13个血清群，其中a、b、c群最为多见，约占90％。儿童的流脑计划免疫率低等因素的影响，流脑有所上升，由脑膜炎奈瑟菌引起的流脑起病急、进展快、死亡率高，早期诊断和合理的抗生素治疗是抢救患者生命的关键，因此快速诊断脑膜炎奈瑟菌感染成为临床及疾病控制探索的重要课题。

2、现有诊断脑膜炎奈瑟菌感染的方法有血清(玻片)凝聚法，该方法不依赖特殊仪器，操作简捷，既适用于实验室操作，也可用于临床样品的现场检测，但是存在检测灵敏度低，阳性反应时间慢的缺点。

技术实现思路

1、有鉴于此，本专利技术提出了一种检测灵敏度高，阳性反应时间快的脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法和应用。

2、本专利技术的技术方案是本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法，其特征在于：按照重量份数计算，所述稀释液的组分包括甘氨酸6-8份、氨基磺酸5-7份、氯化钠25-30份、蔗糖8-15份和蒸馏水400-500份。

3.如权利要求2所述的一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法，其特征在于：所述稀释液还包括3-5重量份的盐酸左旋咪唑。

4.如权利要求3所述的一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法，其特征在于：步骤S2所用聚苯乙烯乳胶微球经三乙胺改性处理，所述改性方法为：将聚苯乙烯乳胶微球与三...

【技术特征摘要】

1.一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法，其特征在于：按照重量份数计算，所述稀释液的组分包括甘氨酸6-8份、氨基磺酸5-7份、氯化钠25-30份、蔗糖8-15份和蒸馏水400-500份。

3.如权利要求2所述的一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法，其特征在于：所述稀释液还包括3-5重量份的盐酸左旋咪唑。

4.如权利要求3所述的一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法，其特征在于：步骤s2所用聚苯乙烯乳胶微球经三乙胺改性处理，所述改性方法为：将聚苯乙烯乳胶微球与三乙胺溶液混合，在30-60℃条件下超声处理5-10min，反应结束后清洗去除残留的三乙胺得到改性聚苯乙烯乳胶微球。

5.如权利要求4所述的一种脑膜炎奈瑟菌乳胶凝集血清的制备方法，其特征在于：所述三乙胺溶液为体积浓度为30％-50％三乙胺水溶液，聚苯乙烯乳胶微球：三乙胺溶液的质量比为1...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾竑，刘宽，
申请(专利权)人：武汉奕清生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：