一种基于恒温自催化CDA-RCA扩增反应的Hg2+检测方法及应用技术

公开了一种基于恒温自催化CDA‑RCA扩增反应的Hg<supgt;2+</supgt;检测方法及应用，包括设计识别单元H<subgt;0</subgt;和S、DNA环状模板CDT以及DNA探针；在缓冲液中将待检测样品、DNA反应物、phi29DNA聚合酶和dNTPs混合，孵育后测量荧光强度，当Hg<supgt;2+</supgt;存在时，由于T‑Hg<supgt;2+</supgt;‑T的特异性结合与识别模块反应，使得I序列裸露激活CDA反应，生成稳定的H<subgt;1</subgt;‑H<subgt;2</subgt;双链体结构并触发RCA放大器，产生包含大量重复I序列的ssDNA纳米线，重复的I序列又可以跟H<subgt;1</subgt;杂交引发下一轮的CDA反应实现信号放大，由于CDA‑RCA可以不断地积累I序列，这种交叉催化放大反应可以持续反馈CDA‑RCA，产生指数放大的荧光共振能量转移信号，该CDA‑RCA放大器成功实现了Hg<supgt;2+</supgt;的超灵敏检测，检出限低至11pM，在食品安全检测中具有广阔的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食品安全检测领域，具体涉及一种基于恒温自催化cda-rca扩增反应的hg2+检测方法及应用。

技术介绍

1、食品中重金属污染对人体健康具有潜在的危险，其中，hg2+是毒性最强的重金属之一，是一种具有生物蓄积性和高毒性的重金属离子，可严重影响环境和人体健康。hg2+可通过食物链进入人体，即使是低剂量汞会严重影响人们的肾脏、中枢和周围神经系统以及免疫系统。因此，建立一种高效可靠的监测食品中hg2+的方法成为食品安全领域的一项紧迫任务。

2、检测hg2+的传统方法主要有原子吸收光谱法(aas)、冷蒸汽原子吸收光谱法(cvaas)、原子发射光谱法(aes)和电感耦合等离子体质谱法(icp-ms)，这些方法虽然可以高灵敏、高特异性地检测，但存在设备昂贵、预处理耗时久、对操作人员要求高的弊端。因此，恒温扩增核酸技术成为hg2+检测的一个研究热点。常见的恒温扩增核酸技术包括滚环扩增反应(rca)、杂交链式反应(hcr)、催化dna自组装反应(cda)、链置换反应(sda)和dnazyme催化反应，与其它恒温放大策略相比，cda具有背景信号低、操本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于恒温自催化CDA-RCA扩增反应的Hg2+检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于恒温自催化CDA-RCA扩增反应的Hg2+检测方法，其特征在于，所述识别单元H0序列如SEQ-ID-NO.1所示，具体为：5'-CTCTTTCAGTCTGATAAGCTACTCTTGTATTACTA TCTCTCGTGTGAGTAGCTTATCAGACTGT-3'，所述识别单元S序列如SEQ-ID-NO.2所示，具体为：5'-AGTAGCTTATCAGACTGTTTGAGA-3'。

3.根据权利要求1所述的一种基于恒温自催化CDA-RCA扩增...

【技术特征摘要】

1.一种基于恒温自催化cda-rca扩增反应的hg2+检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于恒温自催化cda-rca扩增反应的hg2+检测方法，其特征在于，所述识别单元h0序列如seq-id-no.1所示，具体为：5'-ctctttcagtctgataagctactcttgtattacta tctctcgtgtgagtagcttatcagactgt-3'，所述识别单元s序列如seq-id-no.2所示，具体为：5'-agtagcttatcagactgtttgaga-3'。

3.根据权利要求1所述的一种基于恒温自催化cda-rca扩增反应的hg2+检测方法，其特征在于，所述dna探针h1序列如seq-id-no.3所示，具体为：5'-ctcacacgagagatagtaatacaagcctctac ttctactcttgtattactatctctct-fam-3'，所述dna探针h2序列如seq-id-no.4所示，具体为：5'-tamra-taatacaaga...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏洁，黄子泠，戴小娇，刘传艺，李志刚，司庆洋，
申请(专利权)人：集美大学，
类型：发明
国别省市：