一种特异性靶向HTT mRNA的CRISPR/CasRx系统及其应用技术方案

本发明专利技术提供了一种特异性靶向HTT mRNA的CRISPR/CasRx系统及其应用，属于靶向药物技术领域。本发明专利技术选择具有更高酶切活性和靶向特异性的CasRx，还设计了可识别CAG异常重复的上游和下游区域的4条靶向HTT mRNA的gRNA，可以有效地破坏HTT exon1的异常功能，并将两者与AAV载体连接构建CRISPR/CasRx系统。该系统不会引起DNA发生永久性改变的风险，并且CasRx约930个氨基酸，它的小尺寸使CasRx可以轻松包装到AAV中，提高了病毒包装的效率。CRISPR/CasRx系统还可阻止异常扩张polyQ蛋白的聚集，更好地减轻HD病理，对HD达到更佳的治疗效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及靶向药物，尤其涉及一种特异性靶向htt mrna的crispr/casrx系统及其应用。

技术介绍

1、hd是一种由亨廷顿基因(huntingtin,htt)中胞嘧啶、腺嘌呤、鸟嘌呤(cag)重复序列过度扩增引起的显性遗传的神经退行性疾病，与ad、pd患者相似，hd患者同样会形成难以降解的错误折叠蛋白质，并且也与一系列多聚谷氨酰胺突变疾病具有相似的发病机制，因此，hd具有典型的代表性，是研究神经退行性疾病十分重要的突破口。

2、htt位于四号染色体上，其外显子1中包含cag三核苷酸重复，因此在翻译时，亨廷顿蛋白的n末端会产生一个聚谷氨酰胺(polyq)延伸，当cag重复数目超过36时就会导致hd的发生。尽管我们对hd的发病机制有了更深的认识，但目前仍然没有有效的治疗方法。因为突变的亨廷顿蛋白影响了细胞的多个重要的生理过程，针对这些受影响的下游途径进行药物的开发十分复杂且困难。目前为止，针对这些下游途径制定的治疗策略尚没有成功的例子，表明针对受损伤的下游途径进行药物筛选与开发并不是一个理想的方向。对polyq疾病的广泛研究揭示了异常本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种特异性靶向HTT mRNA的CRISPR/CasRx系统，其特征在于，所述CRISPR/CasRx系统包括CasRx蛋白AAV载体和gRNA的AAV载体。

2.根据权利要求1所述特异性靶向HTT mRNA的CRISPR/CasRx系统，其特征在于，所述CasRx蛋白AAV载体在CasRx序列C端加入Flag标签蛋白，在CasRx序列的N端和C端加入核定位序列。

3.根据权利要求1所述特异性靶向HTT mRNA的CRISPR/CasRx系统，其特征在于，所述gRNA序列为：

4.一种权利要求1～3任一项所述CRISPR/CasRx系统在制备治疗H...

【技术特征摘要】

1.一种特异性靶向htt mrna的crispr/casrx系统，其特征在于，所述crispr/casrx系统包括casrx蛋白aav载体和grna的aav载体。

2.根据权利要求1所述特异性靶向htt mrna的crispr/casrx系统，其特征在于，所述casrx蛋白aav载体在casr...

【专利技术属性】
技术研发人员：闫森，林颖琪，李彩娟，李世华，李晓江，陈艺之，李嘉威，吴健豪，王维，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：