一株产α－酮戊二酸重组菌的构建及用其实现α－酮戊二酸过量积累的方法技术

一株产α－酮戊二酸重组菌的构建及用其实现α－酮戊二酸过量积累的方法，属于代谢控制策略优化发酵过程技术领域。本发明专利技术采用将来源于酿酒酵母（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ？ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）中编码丙酮酸脱氢酶系亚基的ＰＤＡ１（ＰＤＨ－Ｅ１α）基因过量表达于丙酮酸工业生产菌株ＣＣＴＣＣ？ＮＯ：Ｍ２０２０１９中，获得了一株产α－酮戊二酸重组菌ＣＣＴＣＣ？ＮＯ：Ｍ２０９２４７。其丙酮酸脱氢酶（ＰＤＨ）活性达到０．３５Ｕ／ｍｇｐｒｏｔｅｉｎ，为出发菌（０．０９２Ｕ／ｍｇ？ｐｒｏｔｅｉｎ）３．８倍，过量表达ＰＤＡ１基因提高了ＰＤＨ途径的通量，可有效促进丙酮酸的进一步代谢，将碳代谢流导向ＴＣＡ循环，α－ＫＧ产量达到３１．７ｇ／Ｌ，比出发菌（２２．８ｇ／Ｌ）提高３９％。结果表明可以通过加强ＰＤＨ活性的方法过量积累α－酮戊二酸（α－ＫＧ），提高α－ＫＧ的生产强度。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一株产α－酮戊二酸重组菌，其分类命名为光滑球拟酵母（Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ　ｇｌａｂｒａｔａ）ＰＤＡ１，已保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为ＣＣＴＣＣ　ＮＯ：Ｍ　２０９２４７。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘立明，汪军，周景文，陈坚，张旦旦，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]