噬藻体全长基因组转化蓝藻的方法技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，尤其涉及噬藻体基因组全长转化蓝藻的方法。本发明专利技术首先筛选了噬藻体PP基因组中的毒性基因，构建了用诱导启动子控制毒性基因的表达盒，并将噬藻体PP基因组拆分为两片段，其中一片段与毒性基因表达盒连接。利用聚球藻PCC 7942优秀的同源双交换能力将这两片段分步整合到聚球藻PCC 7942基因组中，从而成功地将包含毒性基因在内的人工噬藻体PP全长基因组转化入聚球藻PCC 7942中，首次实现了噬藻体基因组全长转化蓝藻，为蓝藻水华的治理提供了新的途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，尤其涉及噬藻体全长基因组转化蓝藻的方法。

技术介绍

1、作为水圈中的初级生产者，蓝藻在固碳和造氧等方面具有重要的生态作用。但是由蓝藻水华引起的水华在世界范围内的水库和湖泊中都有发生。蓝藻水华阻挡了其他生物的阳光，同时消耗大量氧气和营养物质，破坏导致水圈生态环境遭到破坏。蓝藻还会合成和释放种类繁多的蓝藻毒素，可通过污染饮用水间接或直接威胁人畜健康。对被蓝藻污染的水的不当处理也可能会引起严重的肝损伤、一定的免疫毒性、生殖毒性或神经毒性最著名的被称为棕榈岛神秘病的蓝藻毒素cylin drospermopsin的案例发生在1979年的澳大利亚。当地使用除藻剂清除食水中的蓝细菌，残余的除藻剂导致百多名儿童中毒，引致肠胃炎。从2017-2019年在美国，超过三百次急诊就诊与有害的蓝细菌有关，涉及皮肤、胃肠道、呼吸道和神经系统疾病。在中国，蓝藻水华经常发生在太湖、巢湖和滇池等淡水水体中。考虑到蓝藻水华对水生态的影响和人群健康的威胁，如何降低水体中蓝藻的丰度、控制蓝藻水华发生频率一直是水生态领域的研究焦点。

2、去除蓝藻的基本措施是预防和控本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.核酸片段在噬藻体转化蓝藻中的应用，所述核酸片段包括噬藻体PP的ORF22、ORF11和ORF6。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述蓝藻包括聚球藻（Synechococcuselongatus） 、项圈藻（Anabaena sp.） 或集胞藻（Synechocystis sp. ）；

3.核酸片段，其特征在于，包括噬藻体PP的ORF22、ORF11和ORF6。

4.根据权利要求3所述的核酸片段，其特征在于，所述核酸片段依次包括ORF22、ORF11和ORF6。

5.根据权利要求3或4所述的核酸片段，其特征在于，所述ORF22...

【技术特征摘要】

1.核酸片段在噬藻体转化蓝藻中的应用，所述核酸片段包括噬藻体pp的orf22、orf11和orf6。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述蓝藻包括聚球藻（synechococcuselongatus） 、项圈藻（anabaena sp.） 或集胞藻（synechocystis sp. ）；

3.核酸片段，其特征在于，包括噬藻体pp的orf22、orf11和orf6。

4.根据权利要求3所述的核酸片段，其特征在于，所述核酸片段依次包括orf22、orf11和orf6。

5.根据权利要求3或4所述的核酸片段，其特征在于，所述orf22和orf11由rbs编码序列相连，所述orf11和orf6由rbs编码序列相连，所述编码序列rbs具有如seq id no:1所示的核酸序列。

6.表达单元，其特征在于，包括启动子和权利要求3~5任一项所述的核酸片段。

7.根据权利要求6所述的表达单元，其特征在于，所述启动子包括trc20启动子。

8.质粒a，其特征在于，包括骨架载体和权利要求6或7所述的表达单元。

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋建兰，李国瑞，孙韬，冯佳，柴玉婕，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：