双人源肺癌PDX模型及应用制造技术

本发明专利技术提供双人源肺癌PDX模型及应用，涉及生物医药技术领域。该双人源肺癌PDX模型，其建立的具体步骤包括：步骤一：分离和培养；步骤二：注射；步骤三：验证人类T细胞嵌合；步骤四：原始人源肺癌组织的获取与培育；步骤五：接种PDX肺癌。本发明专利技术通过选用重度免疫缺陷小鼠，将人的造血干细胞(HSCs)移植到小鼠体内，重建人免疫系统。在此基础上，按照PDX模型建立方法，建立双人源PDX模型。采用PD1/PD‑L1单抗处理双人源PDX模型小鼠荷瘤，评估疗效，效果显著。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，具体为双人源肺癌pdx模型及应用。

技术介绍

1、pdx(pat i ent-der i ved xenograft)患者来源肿瘤异种移植模型，是指将患者新鲜的肿瘤组织种植到免疫缺陷小鼠体内，从而获得生长。pdx模型的特点是在最大程度上保留了患者肿瘤的形态与结构特征、基因特征以及分子特征，可以为研究肿瘤生物学、寻找标志物与筛选药物靶点提供一个重要的平台。pdx模型能够准确反映抗肿瘤药物疗效，为临床肿瘤患者的个体化精准治疗提供重要的用药建议和指导。

2、近年来，免疫治疗在肿瘤领域广泛应用，尤其是为肺癌患者的治疗带来了新的希望，包括pd-1/pd-l1抗体和ctla4抗体等在内的免疫检查点抑制剂具有非常卓越的抗肿瘤能力。然而，作为免疫疗法的一种，免疫检查点抑制剂无法在常规的肿瘤疗法的研发上进行验证，这意味着我们需要构建一套针对肿瘤免疫疗法特有的临床前研究模型和评价体系。

3、常规使用的基因改造动物模型或者基于免疫缺陷动物构建的pdx模型，并不具备人源免疫系统。它们并不能很好地模拟由肿瘤细胞、免疫细胞、间质细胞及这本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.双人源肺癌PDX模型，其特征在于：其建立的具体步骤包括：

2.根据权利要求1所述的双人源肺癌PDX模型，其特征在于：步骤一中，所述IMDM培养基包括10％FBS、50μMβ-巯基乙醇、2mM谷氨酰胺、10ng/ml IL-6、20ng/ml干细胞因子SCF和10ng/ml Flt3配体FL；所述CD34+人源造血干细胞的密度为1×105cells/ml。

3.根据权利要求1所述的双人源肺癌PDX模型，其特征在于：步骤二中，所述人HSC所注射的数量为2×105个细胞/小鼠。

4.根据权利要求1所述的双人源肺癌PDX模型，其特征在于：步骤三中，所述人类...

【技术特征摘要】

1.双人源肺癌pdx模型，其特征在于：其建立的具体步骤包括：

2.根据权利要求1所述的双人源肺癌pdx模型，其特征在于：步骤一中，所述imdm培养基包括10％fbs、50μmβ-巯基乙醇、2mm谷氨酰胺、10ng/ml il-6、20ng/ml干细胞因子scf和10ng/ml flt3配体fl；所述cd34+人源造血干细胞的密度为1×105cells/ml。

3.根据权利要求1所述的双人源肺癌pdx模型，其特征在于：步骤二中，所述人hsc所注射的数量为2×105个细胞/小鼠。

4.根据权利要求1所述的双人源肺癌pdx模型，其特征在于：步骤三中，所述人类造血细胞嵌合包括mcd45或hcd45，且人类造血嵌合体计算的方式为(hcd45+)/(mcd45++h...

【专利技术属性】
技术研发人员：周建英，周建娅，郑静，姚一楠，
申请(专利权)人：浙江大学医学院附属第一医院浙江省第一医院，
类型：发明
国别省市：