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一种糖酰胺酶的蛋白及其编码序列与应用制造技术

技术编号:4238965 阅读:182 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供了一种糖酰胺酶的蛋白及其作为糖酰胺酶在糖链分析中蛋白脱糖基化的应用;其中所述蛋白具有SEQ?ID?No:2所示的氨基酸序列的多肽,或具有由SEQ?ID?No:1所示核苷酸分子序列所编码的多肽。本发明专利技术所述糖酰胺酶的蛋白在近中性,且温度较低条件下,对糖蛋白具有较高的脱糖基化活性,作为一种新的糖酰胺酶将有巨大的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及糖酰胺酶及其应用,尤其涉及一种具有高稳定性、高活性的糖酰胺酶的蛋白及其编码序列与应用。属于微生物工程和酶工程领域。
技术介绍
碳水化合物是自然界中最为丰富的有机化合物。细胞内的各种糖缀合物如糖蛋 白、糖脂和糖胺等在生物体内细胞-细胞间的识别、信号传导、免疫反应、细胞分化和凋亡 等许多生物过程中扮演着极其重要的角色。糖生物学及糖工程研究已成为继基因工程、蛋 白质工程之后的第三大生物工程,是当今最前沿的生物学科之一。然而,由于细胞表面的糖 成分极其复杂且糖链一般与其它大分子形成复合物来发挥作用而其分离及纯化手段的严 重不足,对细胞表面糖成分的大规模分析一直无法顺利开展。后来发现在生理生化反应中,有一类酶可水解N-连接的糖肽或糖蛋白的β _天冬 胺酰葡糖胺键,将蛋白和糖链完全分开,释放出完整的寡糖链,并生成天冬胺酸残基。具有 此催化功能的酶被统称为糖酰胺酶(ρ印tide-N4- (N-acetyl-β -glucosaminyl) -asparagi ne, Peptide N-glycanase, PNGase, EC3. 5. 1.52)。来源于脑膜炎脓杆菌的糖酰胺酶 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种糖酰胺酶的蛋白,其特征在于:所述蛋白具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的多肽,或具有由SEQ ID NO:1所示核苷酸分子序列所编码的多肽;且具有如下的理化性质:  a)理论分子量为38.6kDa;  b)理论pI为6.02;c)适宜pH为pH6.5~pH10.0;  d)适宜温度为20℃-37℃;  e)对变性底物比活在100,000IU/mg以上或对天然底物比活在50,000IU/mg以上。

【技术特征摘要】
一种糖酰胺酶的蛋白,其特征在于所述蛋白具有SEQ ID NO2所示的氨基酸序列的多肽,或具有由SEQ ID NO1所示核苷酸分子序列所编码的多肽;且具有如下的理化性质a)理论分子量为38.6kDa;b)理论pI为6.02;c)适宜pH为pH6.5~pH10.0;d)适宜温度为20℃-37℃;...

【专利技术属性】
技术研发人员:祁庆生王圣钧
申请(专利权)人:山东大学
类型:发明
国别省市:88[中国|济南]

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