氚化的生长激素促分泌素 MK-0677制造技术

本发明专利技术涉及氚化的生长激素促分泌素，可将其用于鉴定能够与生长激素促分泌素受体结合的化合物，或具有如生长激素促分泌素的活性的化合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】氚化的生长激素促分泌素MK-0677由垂体分泌的生长激素，刺激能够生长的身体的所有组织的生长。此外，已知生长激素对于身体的代谢过程具有如下基本作用：(1)增加身体所有细胞的蛋白质合成的速度；(2)减少身体的细胞中的碳水化合物的利用的速度；(3)增加游离脂肪酸的转移和将脂肪酸用于能量。在生长激素分泌中的缺陷可导致各种医学疾病，诸如侏儒症。已知释放生长激素的多种途径。例如，化学品诸如精氨酸，L-3，4-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)，胰高血糖素，血管升压素，和胰岛素诱导低血糖症，以及活动诸如睡眠和运动，其通过以某种方式作用在下丘脑从而也许减少促生长素抑素的分泌或增加已知促分泌素生长释放因子(GRF)或未知内源生长激素释放激素的分泌或所有这些来间接导致生长激素从垂体中释放。至于术语“生长激素促分泌素”(GHS)指在动物中直接或间接刺激或增加生长激素释放的任何化合物或试剂。生长激素促分泌素(特别是具有放射性标记的生长激素促分泌素)作为体外了解生长激素分泌是怎样在垂体水平被调节的独特工具是有用的。这包括在被认为或已知影响生长激素分泌的许多因子诸如年龄、性别、营养因素、葡萄糖、氨基酸、脂肪酸以及空腹和非空腹状态的评价中的应用。此外，生长激素促分泌素在评价其它激素是怎样调节生长激素释放活性中是有用的。例如，已经确定生长激素抑素抑制生长激素释放。作为重要的和需要研究它们对生长激素释放的影响的其它激素包括性激素，例如，睾酮，雌二醇，和孕酮；肾上腺激素，例如，皮质醇和其它皮质激素类，肾上腺素和去甲肾上腺素；胰和胃肠激素，例如胰岛素，胰高血糖素，促胃液素，胰泌素；血管活性肽，例如，铃蟾肽、神经激肽；和甲状腺激素，例如，甲状腺素和三碘甲腺原氨酸。还可将生长激素促分泌素用于研究一些垂体激素，例如生长激素和内啡肽对垂体的可能的反向或正向反馈影响以调节生长激素的释放。在科学上的-->特别重要性是应用生长激素促分泌素来阐明调节生长激素释放的亚细胞机制。本领域已知确定作为生长激素促分泌素的化合物的活性的方法。例如，Smith，et al.，Science，260，1640-1643(1993)描述的来自体内(ex vivo)的测定(见本文图2正文)，但是该测定需要使用细胞培养物并不给出竞争性结合活性的指示。因此，开发用于鉴定和表征在生长激素促分泌素的活性中具有作用的细胞受体的放射性配体将是理想的。获得放射性配体用在测试化合物的生长激素促分泌素活性的测定中也将是理想的。这些研究通常需要高特异性活性的放射性配体。以前使用来自GHRP-6的[T]-标记或[125I]-标记的肽配体开发结合测定取得了有限的成功。见R.F.Walker，et al.Neuropharmacol.989，28，1139和C.Y.Bowerset al.，Biochem.Biophys.Res.Comm.1991，178，31.通常，这些肽配体的结合是低亲和性的并且具有非常高的能力。而且，结合亲和性与肽的生长激素分泌活性不相关。结合和生长激素分泌活性的相关性的缺乏最可能是放射性配体的相对低的特异性活性(在[T]GHRP-6的情形中)和非-特异性结合特性的结果。WO 9722367提供刺激内源生长激素释放并具有高特异性放射化学活性的[35S]放射性标记的化合物。所述化合物作为非肽的生长激素促分泌素属于在WO 94113696/EP0615977和Proc.Natl.Acad.Sci.USA，92，7001-7005(1995 7月)中公开螺环(Spiro)化合物。这些化合物具有刺激天然或内源生长激素释放的能力。在本文公开的优选的化合物中的是具有高生长激素分泌活性的N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1t-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺。这些化合物是作为未标记化合物被公开的。本专利技术的目标存在于提供WO 94113696/EP0615977中描述的类型的放射性标记的化合物，以用在筛选方法分析中。通常，在其中需要特异性活性＞100Ci/mmol的情形中，放射性碘是研究受体的标记的选择。见K.G.McFarthing，In Receptor-Ligand Interactions：A PracticalApproach；Hulme，E.C.，Ed.；Oxford University Press，Oxford，1992；Chapter 1。但是，卤素原子(例如，氯，溴)在苄基基团的对位位置或在螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基)羰基]-2-(苯基甲基-氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙-->酰胺的螺-二氢吲哚苯基基团的5-位置的结合导致在来自大鼠垂体细胞的生长激素释放上的固有活性的＞20倍的丧失。这说明在这些位置上的碘取代(诸如用125I)将不提供高效配体。而且，碘具有高程度的亲脂性并可进一步改变配体的亲和性。增加的亲水性(水溶解性)通常与观察到的放射性配体的“粘性”呈逆相关，所述配体的“粘性”经常严格限制其在各种受体制剂中的有用性，见M.W.Cunningham，et al.In Radioisotopes in Biology：A Practical Approach；Slater，R.J.，Ed.；Oxford University Press，Oxford，1990；Chapter 6。在这点上注意与125I同族元素(1的X值＝1.12)相比，具有甲氨磺酰(methane sulfonamide)基团的配体应显示减少的亲脂性(NHSO，CH，的X值＝1.18)。见C.Hansch，et al.J.Med.Chem.1973，16，1207。此外，发现氨基官能度对于生物学活性是必需的并因此其与广泛应用的Bolton-Hunter试剂的结合不是可行的备选方案。见，K.G.McFarthing，InReceptor-Ligand Interactions：A Practical Approach；Hulme，E.C.，Ed.；OxfordUniversity Press，Oxford，1992；Chapter 1。在WO 9722367中，获得了用[35S]进行放射性标记到高比活的N-[1(R)-[(1，2-二氢-1-甲磺酰基螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1t-基)羰基]-2-(苯基甲氧基)乙基]-2-氨基-2-甲基丙酰胺。然而，使用35S标记的放射性配体的主要缺点是短半衰期和对废物处理的要求。如已经在上面指出的，以前使用衍生自GHRP-6的氚标记的肽配体开发的结合测定取得了有限的成功。令人惊奇的是，本专利技术者发现可以充分高比活提供三-氚化的-2-氨基-N-[(1R)-2-[1，2-二氢-1-(甲磺酰)螺[3H-吲哚-3，4′-哌啶]-1′-基]-2-氧代-1-[(苯基甲氧基)甲基]乙基]-2-甲基-，单甲磺酸酯(monomethanesulfonate)，可将其成功用在结合测定中。专利技术描述本专利技术涉及放射性标记的生长激素促分泌素，其包括下式的至少一个化合物：-->其中，R1-R6互相独立的是H或T，并且其中R1-R6的至少一个是T。用于本文时，术语“放射性标记的生长本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种放射性标记的生长激素促分泌素，其包括下式的至少一种化合物：＊＊＊，其中Ｒ↑［１］－Ｒ↑［６］彼此独立地是Ｈ或Ｔ，并且其中Ｒ↑［１］－Ｒ↑［６］中至少一个是Ｔ。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】EP 2003-6-25 03013471.21.一种放射性标记的生长激素促分泌素，其包括下式的至少一种化合物：，其中R1-R6彼此独立地是H或T，并且其中R1-R6中至少一个是T。2.权利要求1的放射性标记的生长激素促分泌素，其中放射性标记的生长激素促分泌素的比活介于86.4Ci/mmole和115.2Ci/mmole之间。3.权利要求2的放射性标记的生长激素促分泌素，其中放射性标记的生长激素促分泌素的比活是97.5Ci/mmole。4.权利要求1-3的任一项的放射性标记的生长激素促分泌素用于鉴定可与生长激素促分泌素受体结合的化合物的应用。5.权利要求1-3的任一项的放射性标记的生长激素促分泌素用于鉴定作为生长激素促分泌素受体的细胞受体的应用。6.权利要求1-3的任一项的放射性标记的生长激素促分泌素用于鉴定作为生长激素促分泌素的化合物的活性的应用。7.一种合成放射性标记的生长激素促分泌素的方法，其包括使具有下式的化合物：-->与X-(α-氨基异丁酸-[甲基-T]反应，和如果需要形成盐，其中将X定义为保护基，所述保护基如果出现，随后被去除。8.一种鉴定作为生长激...

【专利技术属性】
技术研发人员：科妮莉亚赫特尔，菲利普乌格宁，桑纳何詹森索夫曼，JM普兰凯尔，
申请(专利权)人：霍夫曼拉罗奇有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]