鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白的制备方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种可溶性鸭甲型肝炎病毒衣壳蛋白VP0的制备方法及其应用，具体制备方法如下：将SEQ ID NO.3所示第1~822位核苷酸连接于pGEX‑4T‑1载体中，然后以大肠杆菌BL21为宿主菌，在Amp抗性的LB培养基中活化后，在IPTG终浓度为0.2～1.2mmol/L、温度为16~37℃条件下诱导表达2～10小时，表达获得可溶性鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白，本发明专利技术的方法蛋白为可溶性表达，获得的蛋白是天然的，无需复性，鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白可利用谷胱甘肽磁珠进行VP0蛋白的纯化。此外，可溶性鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白还可以筛选相互作用的宿主蛋白，对鸭甲型肝炎病毒的抗病毒药物的研发具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化学领域，具体涉及鸭甲型肝炎病毒vp0蛋白的制备方法，还涉及鸭甲型肝炎病毒vp0蛋白的应用。

技术介绍

1、水禽产业是我国农业经济的重要组成部分。随着国际经济发展，我国养殖业也得到了蓬勃的发展。2023年我国肉鸭出栏量超过50亿只，占世界水禽养殖量80%以上，水禽肉类产量超过1200万吨。水禽肉类产量和消费是我国第三大肉类产品，仅次于猪肉和鸡肉。养殖技术的迅猛发展和生物安全管理的薄弱使水禽疫病的发生和流行变得日益复杂，所以传统的疫病防控已经不能满足当前集约化养殖的需求。鸭病毒性肝炎是一种严重危害养鸭业的病毒性传染病，具有发病急、病程短、传播快等特点，雏鸭的死亡率可达100%，给养鸭业造成巨大的经济损失。患病雏鸭的主要病理特征是剖检后可观察到肝脏充血肿大和斑点状出血的现象。鸭病毒性肝炎的发生主要是由鸭甲型肝炎病毒（duck hepatitis a virus,dhav）引起的。

2、dhav是小rna病毒科禽肝病毒属，主要侵害4周龄以内的雏鸭。病毒呈球形或类球形，核衣壳为结构对称的二十面体，直径约20～40nm，衣壳上有32个壳本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白的制备方法，其特征在于：将SEQ ID NO.3所示第1~822位核苷酸连接于pGEX-4T-1载体中，然后以大肠杆菌BL21为宿主菌，在Amp抗性的LB培养基中活化后，在IPTG终浓度为0.2～1.2 mmol/L、温度为16~37℃条件下诱导表达2～10小时，表达获得鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白。

2.根据权利要求1所述可鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白的制备方法，其特征在于：所述诱导表达为在IPTG终浓度为0.6 mmol/L、温度为25℃条件下诱导表达6小时。

3.根据权利要求1所述鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白的制备方法，其特征在于：诱导表达后...

【技术特征摘要】

1.鸭甲型肝炎病毒vp0蛋白的制备方法，其特征在于：将seq id no.3所示第1~822位核苷酸连接于pgex-4t-1载体中，然后以大肠杆菌bl21为宿主菌，在amp抗性的lb培养基中活化后，在iptg终浓度为0.2～1.2 mmol/l、温度为16~37℃条件下诱导表达2～10小时，表达获得鸭甲型肝炎病毒vp0蛋白。

2.根据权利要求1所述可鸭甲型肝炎病毒vp0蛋白的制备方法，其特征在于：所述诱导表达为在iptg终浓度为0.6 mmol/l、温度为25℃条件下诱导表达6小时。

3.根据权利要求1所述鸭甲型肝炎病毒vp0蛋白的制备方法，其特征在于：诱导表达后还包括纯化步骤，具体如下：收集菌液，在 12000r/min 条件下离心10min后收集菌体，收集的菌体用pbs悬浮，然后在冰浴下超声，将破碎后的菌体在4℃、12000r/min条件下离心10min，收集上清，上清用谷胱甘肽磁珠柱纯化，得纯化的鸭甲型肝炎病毒vp0蛋白。

4.由权利要求1~3任一项所述制备方法制得的鸭甲型肝炎病毒vp0蛋白。

5.权利要求5所述鸭甲型肝炎病毒vp0蛋白在筛选宿主互作蛋白中的应用。

6.根据权利要求5所述鸭甲型...

【专利技术属性】
技术研发人员：请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，
申请(专利权)人：四川农业大学，
类型：发明
国别省市：