一种双孢蘑菇甲基化转移酶AbRad8基因、重组载体和表达方法技术

本发明专利技术公开了一种双孢蘑菇甲基化转移酶AbRad8基因、重组载体和表达方法，分析鉴定双孢蘑菇中的甲基化转移酶AbRad8基因；通过同源重组法将AbRad8基因插入至pGEX‑4t‑1载体中，构建了重组原核表达载体pGEX‑4t‑AbRad8，然后将重组载体转入大肠杆菌中获得了两种重组菌，然后利用IPTG进行原核表达重组菌的诱导表达从而获得了AbRad8重组蛋白，体外实验证明该重组蛋白具有甲基化活性。本发明专利技术通过系统发育分析和结构域分析解释了食用菌的进化保守性，且得到的AbRad8基因对揭示双孢蘑菇生长发育过程和抗褐化机制提供了理论参考，为阐明食用菌DNA甲基化转移酶基因的功能奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，具体涉及一种双孢蘑菇甲基化转移酶 abrad8基因、重组载体和表达方法。

技术介绍

1、双孢蘑菇( agaricus bisporus(large) sing.)，又名洋蘑菇、白蘑菇，是担子菌门、伞菌目、伞菌科、蘑菇属的一种可食用菌种。因其具有优质蛋白质，高纤维，大量维生素和矿物质，已经成为了世界上栽培地区最广、生产规模最大、消费最普遍的一种食用菌，同时也是生理学特性和栽培技术研究最全面、最深入的物种。双孢蘑菇属于生理活性很强的菌类，具有易褐变、易衰老变质、易腐烂等特点，是难以贮藏的食用菌，其采后在很短的时间内就会发生褐变，使其对贮运保鲜要求高，一般需要冷链物流，如贮运不当或不能及时销售，易造成损失。目前对于双孢蘑菇的抗褐化措施主要集中在采后保鲜方面，例如中国专利cn100536670c公开了双孢蘑菇保鲜剂，能将双孢蘑菇的保鲜期延长至10天以上。但是这些方法又可能存在食品添加剂超标的问题，因此在基因层面研究清楚双孢蘑菇褐化的机制，并采用表观遗传学的方法来实本文档来自技高网...

【技术保护点】

1. 一种双孢蘑菇甲基化转移酶AbRad8基因，其特征在于：所述AbRad8基因来源于双孢蘑菇，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2。

2.一种甲基化转移酶AbRad8基因的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体包括重组原核表达载体和重组真核表达载体。

3.根据权利要求2所述的一种甲基化转移酶AbRad8基因的重组表达载体，其特征在于：所述重组原核表达载体由权利要求1所述的AbRad8基因的核苷酸序列通过插入pGEX-4t-1载体重组而成，得到重组原核表达载体pGEX-4t-AbRad8；所述重组真核表达载体由权利要求1所述...

【技术特征摘要】

1. 一种双孢蘑菇甲基化转移酶abrad8基因，其特征在于：所述abrad8基因来源于双孢蘑菇，其核苷酸序列为seq id no:1，氨基酸序列为seq id no:2。

2.一种甲基化转移酶abrad8基因的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体包括重组原核表达载体和重组真核表达载体。

3.根据权利要求2所述的一种甲基化转移酶abrad8基因的重组表达载体，其特征在于：所述重组原核表达载体由权利要求1所述的abrad8基因的核苷酸序列通过插入pgex-4t-1载体重组而成，得到重组原核表达载体pgex-4t-abrad8；所述重组真核表达载体由权利要求1所述的abrad8基因的核苷酸序列通过插入pyes3载体重组而成，得到重组真核表达载体pyes3_abrad8。

4.一种含有甲基化转移酶abrad8基因的重组菌，其特征在于：所述重组菌包括原核重组菌和真核重组菌。

5.根据权利要求4所述的一种含有甲基化转移酶abrad8基因的重组菌，其特征在于：所述原核重组菌由权利要求2或3中的重组原核...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈祥陵，李贵轩，韩少鹏，曾弓剑，胡永峰，秦心儿，邓竹英，吕阳，王佩，
申请(专利权)人：三峡大学，
类型：发明
国别省市：