一种焦亡肿瘤细胞来源的囊泡及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，公开了一种焦亡肿瘤细胞来源的囊泡及其制备方法和应用。具体为通过差速离心法提取乳腺癌细胞焦亡过程中分泌的焦亡样囊泡。本发明专利技术制备的PyrEV上表达焦亡特异性的GSDM‑N端结构域，PyrEV被细胞内化后通过游离的N端结构域与脂质成分结合在细胞膜中形成孔隙，通过孔隙进入的水会引起细胞肿胀和渗透溶解，导致细胞焦亡。此外，该PyrEV表达的大量肿瘤相关抗原，能够提供免疫原性抗原引发广泛的特异性抗肿瘤免疫应答；PyrEV包载有细胞焦亡过程中释放的DAMPs和促炎细胞因子，作为内源性佐剂能够增强免疫反应的强度和持久性。本发明专利技术具有良好的体内安全性，有潜力为肿瘤治疗提供新的策略。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药，具体为通过差速离心法提取乳腺癌细胞焦亡过程中分泌的焦亡样囊泡(pyroptotic extracellular vesicle,pyrev)和其应用。

技术介绍

1、近年来，癌症免疫治疗在临床上取得了较大的进展。细胞外囊泡(ev)已被证明在抗原呈递、抗肿瘤免疫等过程中发挥重要作用。肿瘤细胞来源的ev携带广谱肿瘤相关抗原(taa)，是潜在的免疫原性抗原的天然来源，能够促进dcs成熟和t细胞激活。这些特性使肿瘤细胞来源的ev在肿瘤免疫治疗领域受到了广泛的关注。此外，肿瘤细胞来源的ev是肿瘤细胞自主分泌的产物，无需进行繁杂的提取和重组过程，能够减少抗原丢失。然而肿瘤细胞来源的ev可能包含有免疫抑制成分，能够促进肿瘤进展，严重影响其免疫治疗的效果。

2、焦亡是一种呈高度炎性的细胞程序性死亡。细胞焦亡时细胞膜破裂释放damps和多种促炎因子，触发一系列免疫应答，包括先天性和适应性免疫细胞的活化，以及促进dc的活化和成熟。基于此，本专利技术通过诱导肿瘤细胞焦亡，将肿瘤细胞调整为高度促炎态后提取其分泌的pyrev，提高囊泡的免疫刺激性本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种焦亡肿瘤细胞来源的囊泡。

2.根据权利要求1所述的囊泡，其特征在于，所述的肿瘤细胞为乳腺癌肿瘤细胞，进一步的为三阴性乳腺癌细胞。

3.根据权利要求1所述的囊泡，其特征在于，含有GSDM-N，能够通过GSDM-N结构域在细胞膜内侧成孔造成细胞焦亡，具有广谱的细胞杀伤作用；具备强大的诱导BMDCs成熟的能力。

4.权利要求1-3任一项所述的囊泡的制备方法，其特征在于，采用差速离心法提取囊泡。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，差速离心法具体步骤如下：

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，采用短波紫外线诱...

【技术特征摘要】

1.一种焦亡肿瘤细胞来源的囊泡。

2.根据权利要求1所述的囊泡，其特征在于，所述的肿瘤细胞为乳腺癌肿瘤细胞，进一步的为三阴性乳腺癌细胞。

3.根据权利要求1所述的囊泡，其特征在于，含有gsdm-n，能够通过gsdm-n结构域在细胞膜内侧成孔造成细胞焦亡，具有广谱的细胞杀伤作用；具备强大的诱导bmdcs成熟的能力。

4.权利要求1-3任一项所述的囊泡的制备方法，其特征在于，采用差速离心法提取囊泡。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，差速离心法具体步骤如下：

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，采用短波紫外线诱导肿瘤细胞焦亡；更换培养基，孵育24h后用于差速离心提取囊泡。

7.根据权利要求6所述的制备...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴军勇，唐裕宬，向大雄，徐文杰，郝欣岩，彭彦缙，
申请(专利权)人：中南大学湘雅二医院，
类型：发明
国别省市：