源自ASFV编码p72、p54和p30蛋白的表位肽组合、重组蛋白及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物检测技术领域，尤其涉及源自ASFV编码p72、p54和p30蛋白的表位肽组合、重组蛋白及其应用。所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.20所示，其是将非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的p72、p54、p30蛋白相关B细胞抗原表位肽插入在骨架蛋白上，优化并合成抗原表位肽重组蛋白基因序列后，连接在PET30a载体上，通过原核表达得到可溶性重组蛋白；以所述重组蛋白作为检测抗原，建立非洲猪瘟(ASF)间接ELISA检测试剂盒。本发明专利技术制备的重组蛋白与ASF阳性血清具有良好反应性，建立的ELISA试剂盒检测方法具有灵敏、特异、高效稳定和重复性好的特点，适合于临床ASFV感染检测应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测，尤其涉及源自asfv编码p72、p54和p30蛋白的表位肽组合、重组蛋白及其应用。

技术介绍

1、非洲猪瘟(african swine fever，asf)是非洲猪瘟病毒(african swine fevervirus，asfv)感染猪引起的一种急性、烈性、高度接触性动物传染病，asf被世界动物卫生组织(oie)列为法定报告动物疫病。asf疫情导致养猪业的巨大经济损失，流行病学调查发现较低毒力的自然变异毒株传播性强，引起慢性或持续性感染，增加了asf诊断难度。

2、由于缺乏有效疫苗，现阶段控制asf的唯一有效策略是隔离或消灭被感染的动物，因此，高灵敏度和特异性检测诊断对于发现asfv感染猪至关重要，作为oie指定asf检测标准方法之一，elisa检测方法对asf防控和净化起到至关重要的作用。当前大多商品化asfelisa检测试剂盒包被的抗原为p72、p30或者p54蛋白。p72约占病毒颗粒总质量的33％，是asfv重要的衣壳蛋白，能引起机体产生较高水平的抗体，因此常用来做elisa方法中的包被抗原。然而其为asfv晚期本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.源自ASFV编码p72、p54和p30蛋白的表位肽组合，其特征在于，源自p72的表位肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1-4所示，源自p30的表位肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，源自p54的表位肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。

2.包含权利要求1所述表位肽组合的重组蛋白，其特征在于，氨基酸序列如SEQ IDNO.20所示。

3.编码权利要求2所述重组蛋白的基因，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示。

4.包含权利要求3所述基因的表达载体，其特征在于，是将所述基因插入pET30a质粒的Ndel和Xhol位点之...

【技术特征摘要】

1.源自asfv编码p72、p54和p30蛋白的表位肽组合，其特征在于，源自p72的表位肽的氨基酸序列如seq id no.1-4所示，源自p30的表位肽的氨基酸序列如seq id no.5所示，源自p54的表位肽的氨基酸序列如seq id no.6所示。

2.包含权利要求1所述表位肽组合的重组蛋白，其特征在于，氨基酸序列如seq idno.20所示。

3.编码权利要求2所述重组蛋白的基因，其特征在于，核苷酸序列如seq id no.21所示。

4.包含权利要求3所述基因的表达载体，其特征在于，是将所述基因插入pet30a质粒的ndel和xhol位点之间获得。

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【专利技术属性】
技术研发人员：庄国庆，孙爱军，靳家鑫，张改平，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：