一种规模化干细胞外泌体提取方法技术

本发明专利技术属于生物医疗技术领域，提供了一种规模化干细胞外泌体提取方法，包括间充质干细胞的三维微载体大规模培养上清收集和外泌体的超速差速离心规模化提取制备；本发明专利技术通过间充质干细胞的三维微载体大规模培养收集包含外泌体的上清，解决了传统二维细胞培养方式无法大量收集有效上清液的问题，同时本发明专利技术整个操作过程易上手，避免了试剂盒等方法对提取规模的限制，适合大规模提取和浓缩，可以做到工业化生产，无需复杂的过程，且可以处理大量的不同来源细胞上清的外泌体，提取后的外泌体经过活性的鉴定、电镜检测、粒径分析、蛋白含量检测等一系列鉴定验证，损伤率小，突变率小，性质稳定、产量高于二维方式。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医疗，具体地说是一种规模化干细胞外泌体提取方法。

技术介绍

1、外泌体是由细胞分泌的，是具有脂质双层膜的一种纳米囊泡，外泌体的直径为30-150nm，在透射电镜下呈现椭圆的杯状结构；外泌体可以被多种不同的细胞分泌，如内皮细胞、基质细胞等；且外泌体中包含了许多类型的分子，其中就包括蛋白质、脂质和核酸。当体内的其他细胞吸收外泌体时，这些外泌体所包含的各种分子就会被转移到受体细胞内发挥作用，因此外泌体可以作为通讯载体并且能够介导许多生理和病理的过程，干细胞的外泌体也成为了医疗界的新星，外泌体为疾病的治疗带来了新思路。

2、目前，临床前和临床开发都需要大量的外泌体，而提取外泌体的方法有多种，主要有差速超速离心法、试剂盒法，蔗糖密度梯度离心法；试剂盒法提取的数量有限，过程也比较费时；蔗糖密度梯度离心法回收率有限，纯度也达不到要求，这两种方法的外泌体产量较低，不能解决大规模提取纯化的要求，限制了外泌体产业化的应用范围；

3、为此，本领域技术人员提出了一种规模化干细胞外泌体提取方法。

<b>技术实现思路...

【技术保护点】

1.一种规模化干细胞外泌体提取方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.如权利要求1所述一种规模化干细胞外泌体提取方法，其特征在于：在步骤一的(3)中，所述无血清培养基按照原始无血清培养基：IMDM培养基为1：2稀释后的培养基。

3.如权利要求1所述一种规模化干细胞外泌体提取方法，其特征在于：在步骤一的(3)中，所述无血清培养基的比例为3ml SFM+4ml IMDM。

4.如权利要求1所述一种规模化干细胞外泌体提取方法，其特征在于：在步骤一中，所述间充质干细胞包括脐带间充质干细胞上清、胎盘间充质干细胞上清中任意一种或多种。

【技术特征摘要】

1.一种规模化干细胞外泌体提取方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.如权利要求1所述一种规模化干细胞外泌体提取方法，其特征在于：在步骤一的(3)中，所述无血清培养基按照原始无血清培养基：imdm培养基为1：2稀释后的培养基。

3.如权利要求1所述一种规模化干...

【专利技术属性】
技术研发人员：马艺菡，
申请(专利权)人：马艺菡，
类型：发明
国别省市：