UDP-葡萄糖基转移酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术属于基因工程和生物催化技术领域，具体涉及UDP‑葡萄糖基转移酶突变体及其应用。所述突变体是将如SEQ ID NO.2所示的UDP‑葡萄糖基转移酶氨基酸序列经以下至少一种突变情况所得：将第61位的亮氨酸突变为甲硫氨酸，将第87位的天冬酰胺突变为亮氨酸，将第129位的谷氨酰胺突变为苯丙氨酸，将第139位的丝氨酸突变为丙氨酸，所述突变体酶活性均明显高于野生型。所述UDP‑葡萄糖基转移酶突变体应用于制备Reb D，转化率较高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程和生物催化，具体涉及udp-葡萄糖基转移酶突变体及其应用。

技术介绍

1、甜菊糖苷（setviolglycosides，sgs），包括甜菊糖、莱鲍迪苷a（reb a）、莱鲍迪苷b（reb b）、莱鲍迪苷c（reb c）、莱鲍迪苷d（reb d）、莱鲍迪苷e（reb e）和莱鲍迪苷f（reb f）、杜尔可苷a（dulcoside a）和甜菊双糖苷、莱鲍迪苷m（reb m）和莱鲍迪苷 i（reb i）等；rebd的甜度大约是蔗糖的150倍，口感好，无苦涩味，reb d是由reb a结构的r1端以β-1,2糖苷键连接葡糖基而形成。reb d的制备大多采用从甜叶菊中提取分离、纯化的方法，由于reb d在甜叶菊中的含量极低（＜0.5%），这种制备方法效率低下，很难满足日益增长的市场需求，因此，酶法合成是比较有效的一种方式。酶法合成reb d的转化率高，中国专利技术专利cn114657227 a公开了一种糖基转移酶突变体f121v，可以制备高纯度reb d。但目前，糖基转移酶定向改造可供选择的位点较少，基于分子对接技术的定向筛选糖基转移酶，提高酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种UDP-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于：所述UDP-葡萄糖基转移酶的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述UDP-葡萄糖基转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示， 所述UDP-葡萄糖基转移酶突变体是将如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列经以下至少一种突变情况所得：

2.如权利要求1所述的UDP-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于：将如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列第61位的亮氨酸突变为甲硫氨酸和第87位的天冬酰胺突变为亮氨酸，得到UDP-葡萄糖基转移酶组合突变体。

3.如权利要求1所述的UDP-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于：所...

【技术特征摘要】

1.一种udp-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于：所述udp-葡萄糖基转移酶的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述udp-葡萄糖基转移酶的氨基酸序列如seq id no.2所示， 所述udp-葡萄糖基转移酶突变体是将如seq id no.2所示的氨基酸序列经以下至少一种突变情况所得：

2.如权利要求1所述的udp-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于：将如seq id no.2所示的氨基酸序列第61位的亮氨酸突变为甲硫氨酸和第87位的天冬酰胺突变为亮氨酸，得到udp-葡萄糖基转移酶组合突变体。

3.如权利要求1所述的udp-葡萄糖基转移酶突变体，其特征在于：所述突变体的构建方法，包括如下步骤：

4.如权利要求3所述的udp-葡萄...

【专利技术属性】
技术研发人员：张顺斌，陈良，张震，丁博青，焦金鹏，
申请(专利权)人：青岛奔月生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：