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一种三维睑板腺细胞微球仿生培养方法及获得的睑板腺类器官技术

技术编号:42248042 阅读:47 留言:0更新日期:2024-08-02 13:57
本发明专利技术涉及一种三维睑板腺细胞微球仿生培养方法及获得的睑板腺类器官,所述的方法包括如下步骤:制备仿睑板腺细胞外基质微环境的凝胶微球;制备睑板腺腺体上皮细胞悬液,或和导管上皮细胞配制成的混合细胞悬液;之后将细胞悬液与仿生微球混合均匀加入低吸附培养板;加入增殖培养基培养后得到所述三维睑板腺类器官仿生培养体系;本发明专利技术构建的仿生培养体系能在体外模拟睑板腺微环境,具有诱导和维持睑板腺细胞增殖和分化能力,更好地模拟生理睑板腺脂质成分和分泌模式,为干眼相关疾病建模、药物开发和腺体再生研究提供更精确、理想的模型。

【技术实现步骤摘要】

一种三维睑板腺细胞微球仿生培养方法及获得的睑板腺类器官,属于仿生培养和类器官领域


技术介绍

1、干眼症,指由于泪液量或质的异常引起泪膜不稳定和眼表损害,从而导致眼不适症状的一类疾病。我国干眼症发病率高达21%~30%,估计至少3亿人患病。睑板腺功能障碍(meibomian gland dysfunction,mgd)被公认为引起全世界范围内蒸发型干眼的最主要病因。mgd是一种慢性、弥漫性的睑板腺异常,通常以终末导管阻塞和/或腺体分泌物改变为特征,引起泪膜成分改变、泪液水样层蒸发增强、眼表渗透压升高并损害眼表健康。然而,造成mgd的病因复杂多样,且尚未研究透彻,治愈及对因治疗难度大,只能通过物理办法或对症药物进行改善。

2、仿生细胞培养是目前的前沿技术,致力于通过工程方法在体外为细胞创造仿生微环境。与传统的平板细胞培养相比,它可以为疾病建模、药物开发和再生医学提供更精确的平台。原代睑板腺细胞培养非常困难,且人类正常睑板腺组织样本极难获得,因此想要建立睑板腺细胞长期培养体系存在巨大挑战,也是突破目前mgd致病机制和对因治疗亟待解决的关键问题。大量研本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种三维睑板腺类器官仿生培养方法,所述的方法包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)所述的仿睑板腺细胞外基质微环境的仿生凝胶微球直径为50-200微米。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)所述的仿生凝胶微球由甲基丙烯酸化的硫酸软骨素和甲基丙烯酸化的明胶混合交联制备而成,所述的甲基丙烯酸化的硫酸软骨素和甲基丙烯酸化的明胶浓度均为5%,质量比例为1:10~1:5。

4.根据权利要求1所述的方法,所述的混合细胞悬液由睑板腺功能细胞腺体上皮细胞和导管上皮细胞混合而成。

5.根据权利要求1所述的方法,其特...

【技术特征摘要】

1.一种三维睑板腺类器官仿生培养方法,所述的方法包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)所述的仿睑板腺细胞外基质微环境的仿生凝胶微球直径为50-200微米。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)所述的仿生凝胶微球由甲基丙烯酸化的硫酸软骨素和甲基丙烯酸化的明胶混合交联制备而成,所述的甲基丙烯酸化的硫酸软骨素和甲基丙烯酸化的明胶浓度均为5%,质量比例为1:10~1:5。

4.根据权利要求1所述的方法,所述的混合细胞悬液由睑板腺功能细胞腺体上皮细胞和导管上皮细胞混合而成。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的细胞悬液中总睑板腺细胞的总浓度为1~2×105/ml。

6.根据权利要求4所述的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐佩芳陈芃洁吴涵叶娟于珊
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:

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