一种鉴定单亲水牛亲权关系的方法及其引物、试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种鉴定单亲水牛亲权关系的方法及其引物、试剂盒，属于 基因工程技术领域。本发明专利技术筛选出多态性丰富的8个微卫星引物，以待检水牛 基因组DNA为模板进行PCR扩增，对PCR扩增片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检 测，根据检测结果判断每个个体的基因型，根据基因型计算单亲亲权指数PI值、 亲子相对概率值W值，根据W值判断亲权关系是否存在。为进一步提高鉴定的 稳定性、准确性和灵敏度，本发明专利技术还根据普通牛mtDNA的D-Loop区设计引物进 行线粒体遗传鉴定。本发明专利技术将微卫星与线粒体遗传标记两种方法相结合，从不 同的角度进行鉴定，且鉴定结果一致，提高了亲权鉴定的稳定性、准确性、灵 敏度，使鉴定范围更广、样品要求更低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测
，具体地说，涉及一种利用微卫星及线粒体遗 传标记技术对中国水牛进行亲权鉴定的方法及专用引物与试剂盒。
技术介绍
在现代动物生产和育种中，要利用各种亲属的表型信息确定准确的遗传系 谱并通过正确的系谱了解种公畜的育种价值，以此来确定个体选留及避免个体近亲繁殖。大规模联合育种工作的开展以及BLUP技术的广泛应用，使得系谱信 息在育种中的影响越来越大。因系谱信息错误产生的误差会在整个选育过程中 被逐级的放大，并极有可能造成群体的大规模近交，导致种群退化，从而导致 育种过程中不可挽回的重大损失。因此，在家畜育种中应用亲权鉴定技术鉴别 个体身份，修正错误系谱信息有着极为重要的意义。亲权鉴定是明确个体间亲 缘关系、建立正确谱系的重要辅助手段，亲权鉴定主要包括以下几个方面个 体生父的确定，个体生母的确定，个体生父生母的确定，生父、生母后代的确 定，爷孙关系的确认(即隔代鉴定)等。亲权鉴定方法按材料不同可以分为很 多种，如利用表型标记、系谱记录、血型、蛋白质多态、同工酶、在DNA分子 水平进行鉴定等。在DNA水平上大致可以分为以下几种DNA指纹技术、MVR-PCR 技本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种鉴定单亲水牛亲权关系的方法，其特征在于包括以下步骤：　（１）从普通牛种微卫星标记中，筛选出多态性丰富的微卫星引物；　（２）以待检水牛基因组ＤＮＡ为模板，在筛选出的微卫星引物的引导下进行２５μＬ反应体系的ＰＣＲ扩增；　（ ３）对微卫星ＰＣＲ扩增片段进行８％聚丙烯酰胺凝胶电泳检测；　（４）根据电泳检测结果判断每个个体的基因型，根据基因型计算单亲亲权指数ＰＩ值、并根据ＰＩ值计算出亲子相对概率值Ｗ值，当Ｗ值大于或等于９９．７３％时，则认定假设亲代与子代个体有 亲生关系，当Ｗ值小于９９．７３％时，则可以认为假设亲代与子代个体不具有亲生关系；　上述微卫星引物...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐亚欧，孙蕊，毛亮，
申请(专利权)人：徐亚欧，孙蕊，毛亮，
类型：发明
国别省市：90