提高神经管类器官DV图示化效率的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高神经管类器官DV图示化效率的方法，包括以下步骤：(a)通过3D培养诱导多能干细胞向早期神经管类器官分化；(b)将早期神经管类器官诱导分化为DV图示化的神经管类器官；其中，在步骤(b)的诱导分化过程中，引入丙戊酸和/或丙戊酸盐以提高神经管类器官DV图示化效率。该方法能够简单、高效且低成本的诱导神经管类器官发生DV图示化，为基础研究、药物筛选和再生医学研究提供重要的平台。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于类器官培养，具体涉及一种提高神经管类器官dv图示化效率的方法。

技术介绍

1、在早期胚胎发育过程中，各种诱导因子和信号途径参与三胚层的分化和诱导，但是胚胎不仅仅需要三个胚层发育为不同胚层的组织器官，还需要这些组织器官前体按照前后轴、背腹轴和左右轴确定的空间位置有序整合起来，胚胎细胞形成不同组织、器官，构成有序空间结构的过程称为图式形成(pattern formation)。其中，脊椎动物神经管发育过程中，其祖细胞沿着身体背腹(dorsal ventral，dv)轴方向形成有序空间排布的过程，称为神经管的dv图式形成。该过程对于中枢神经系统沿dv轴不同位置产生不同类别的神经元，进而构建精确的神经环路至关重要。

2、研究表明，影响神经管沿dv轴图式化的形态发生素主要是背侧顶板分泌的wnt蛋白和骨形成蛋白(bmp)，以及腹侧底板(fp)分泌的音猬因子(shh)。在背侧和腹侧形态发生素的共同作用下，不同的转录因子沿着dv轴的不同位置激活表达，从而决定了沿dv轴产生6个背侧神经祖细胞域(dp1-dp6)和5个腹侧神经祖细胞域(p0-p2，p本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高神经管类器官DV图示化效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的提高神经管类器官DV图示化效率的方法，其特征在于，步骤(a)中所述的多能干细胞为经过培养的多能干细胞，其采用的培养基为多能干细胞维持培养基。

3.如权利要求2所述的提高神经管类器官DV图示化效率的方法，其特征在于，所述多能干细胞的培养步骤包括：

4.如权利要求1所述的提高神经管类器官DV图示化效率的方法，其特征在于：所述步骤(a)包括以下步骤：

5.如权利要求4所述的提高神经管类器官DV图示化效率的方法，其特征在于，所述3D培养系统采用Geltr...

【技术特征摘要】

1.一种提高神经管类器官dv图示化效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的提高神经管类器官dv图示化效率的方法，其特征在于，步骤(a)中所述的多能干细胞为经过培养的多能干细胞，其采用的培养基为多能干细胞维持培养基。

3.如权利要求2所述的提高神经管类器官dv图示化效率的方法，其特征在于，所述多能干细胞的培养步骤包括：

4.如权利要求1所述的提高神经管类器官dv图示化效率的方法，其特征在于：所述步骤(a)包括以下步骤：

5.如权利要求4所述的提高神经管类器官dv图示化效率的方法，其特征在于，所述3d培养系统采用geltrex凝胶床，通过以下方式构建：

6.如权利要求4所述的提高神经管类器官dv图示化效率的方法，其特征在于，所述神经诱导培养液包括：：advance dmem/f12基础培养基、neurobasal medium基础神经诱导培养基、n2无血清添加剂、sm1无血清添加剂、非必需氨基酸、谷氨酰胺和β-巯基乙醇；

7.如权利要求4所述的提高神经管类器官dv图...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑媛媛，张方荣，李新玉，荀家莉，吴李君，
申请(专利权)人：安徽大学，
类型：发明
国别省市：