炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法技术

本发明专利技术提供了一种炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，包含以下步骤：巨噬细胞包含型结肠类器官的诱导分化、传代扩增及扩增物质量检定，TGF‑β诱导造模、以及炎症性肠病与纤维化的体外模拟。该方法可在48h内诱导产生巨噬细胞极化、炎症反应、上皮‑间质转化、屏障损伤等一系列IBD病理表型；并在4天内进展为纤维化，呈现血清标志物升高、胶原沉积等临床病理特征。该疾病模型不但具备人源遗传背景，且能快速实现IBD的多尺度病理模拟，适合作为疾病解析与药效筛选的新一代研究工具。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及诱导多能性干细胞，尤其是涉及一种炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法。

技术介绍

1、由于ibd（炎症性肠病）的复杂性，目前ibd的病理机制仍不清晰。深入揭示疾病机理，开发更有效的治疗策略，是实现ibd彻底治愈的必经之路。其中，作为病理解析与药物开发的基础工具，ibd的疾病模型发挥着关键作用。

2、由于人类的原代肠道难以获取，长期以来，ibd的相关研究仍以啮齿类动物为主要模型（如小鼠、大鼠等）。然而，遗传背景的不同使得这些模型在生理乃至ibd病理水平与人类差异较大，具有明显的局限性。类器官作为一种新兴的体外3d模型，谱系多样且功能丰富，既克服了传统2d细胞模型在生理相关度上的不足，又拥有人源性的优势，有望进一步开发为新一代ibd体外疾病模型。目前，基于类器官的ibd模型大多仅含上皮细胞类型，缺乏ibd发生发展过程的关键细胞类型—巨噬细胞；因此无法模拟炎症反应及其相关的多种病理特征，限制了模型的准确性。

技术实现思路

1、有鉴于此，本专利技术旨在提供一种炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：步骤1）中，类器官的检定通过流式细胞术或免疫荧光染色确认谱系多样性。

3.根据权利要求1所述的炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：步骤1）中，验证巨噬细胞炎症介导功能的方法为：使用200ng/ml LPS刺激类器官24h后，通过ELISA测定上清中炎症因子分泌量。

4.根据权利要求3所述的炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：炎症因子包括IL-23、IL-6、TNF-α、IL-1β中...

【技术特征摘要】

1.一种炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：步骤1）中，类器官的检定通过流式细胞术或免疫荧光染色确认谱系多样性。

3.根据权利要求1所述的炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：步骤1）中，验证巨噬细胞炎症介导功能的方法为：使用200ng/ml lps刺激类器官24h后，通过elisa测定上清中炎症因子分泌量。

4.根据权利要求3所述的炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：炎症因子包括il-23、il-6、tnf-α、il-1β中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：tgf-β的浓度为2-10ng/ml。

6.根据权利要求1所述的炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：ibd病理表型包括以下指标中的一项或多项：巨噬细胞极化、炎症水平增加、粘液含量降低、上皮-间质转化加剧、肠道屏障受损；

7.根据权利要求6所述的炎症性肠病及纤维化体外精准模拟方法，其特征在于：巨噬细胞极化可...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴迪，王莉莉，尹云飞，
申请(专利权)人：淇嘉科技苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：