一种缓解BMP15缺陷导致的卵母细胞体外成熟障碍的方法技术

本发明专利技术公开了一种缓解BMP15缺陷导致的卵母细胞体外成熟障碍的方法，所述方法包括在具有BMP15缺陷的卵母细胞的培养过程中添加槲皮素。本发明专利技术还提供了槲皮素在用于缓解BMP15缺陷导致的卵母细胞体外成熟障碍中的用途。本发明专利技术还提供了一种crRNA和tracrRNA复合物及其用于获得具有BMP15缺陷的卵母细胞中的用途。本发明专利技术利用ctRNP编辑系统在猪卵母细胞的BMP15基因中形成双链断裂，通过基因编辑获得了BMP15敲低卵母细胞群，在BMP15基因编辑后添加槲皮素可促进卵母细胞成熟和卵丘颗粒细胞扩展，增加卵母细胞成熟促进因子的活性以及纺锤体正确组装和细胞器功能，为BMP15缺陷导致的女性不孕提供了可行的治疗方案。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生殖生物学和发育生物学领域，具体涉及一种缓解bmp15缺陷导致的卵母细胞体外成熟障碍的方法。

技术介绍

1、骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15，bmp15)是转化生长因子β(transforming growth factor-β,tgf-β)超家族成员，是卵母细胞衍生的特异性分泌因子，以同源二聚体bmp15/bmp15或与同源蛋白生长分化因子9(growth differentiationfactor 9,gdf9)形成异源二聚体gdf9/bmp15发挥生物学功能。成熟的bmp15二聚体蛋白与卵丘颗粒细胞膜表面上的骨形态发生蛋白受体1b型(bmpr1b)和2型(bmpr2)受体结合，从而引起smad信号通路的激活。即同源二聚体与bmpr1b和bmpr2受体结合后激活smad1/5/8信号通路，而异源二聚体则需要与bmpr1b、bmpr2和alk4受体结合后共同激活smad2/3信号通路。研究表明，人和绵羊的bmp15蛋白同时通过异源二聚体gdf9/bmp15与同源二聚体bmp15/bmp15发挥生本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种缓解BMP15缺陷导致的卵母细胞体外成熟障碍的方法，其特征在于，所述方法包括在具有BMP15缺陷的卵母细胞的培养过程中添加槲皮素。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述BMP15缺陷为卵母细胞BMP15基因的外显子1上缺失核酸片段。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所缺失的核酸片段的核苷酸序列如SEQ IDNO：4所示。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，通过基因编辑靶向删除卵母细胞BMP15基因的外显子1上的片段，从而得到具有BMP15缺陷的卵母细胞。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，采用...

【技术特征摘要】

1.一种缓解bmp15缺陷导致的卵母细胞体外成熟障碍的方法，其特征在于，所述方法包括在具有bmp15缺陷的卵母细胞的培养过程中添加槲皮素。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述bmp15缺陷为卵母细胞bmp15基因的外显子1上缺失核酸片段。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所缺失的核酸片段的核苷酸序列如seq idno：4所示。

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，通过基因编辑靶向删除卵母细胞bmp15基因的外显子1上的片段，从而得到具有bmp15缺陷的卵母细胞。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，采用crrna和tracrrna复合物进行基因编辑。

6.根据权利要求5所述的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：何祖勇，焦亚飞，丛佩清，陈瑶生，李心然，郭津铭，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：